5 型磷酸二酯酶在子宫腺肌病中的表达以及与临床症状的关系分析

吴 婷

（苏州市独墅湖医院<苏州大学医学中心>妇产科 江苏 苏州 215000）

子宫腺肌病（adenomyosis, AM）是女性常见的良性妇科病变，常常造成女性月经疼痛、盆腔疼痛及月经异常等症状，治疗上目前最为有效的是子宫切除为主的手术治疗，在药物保守治疗上尚缺乏理想有效的药品，严重威胁着育龄妇女的健康生活[1]。AM 的发病机制复杂，很多的相关研究均发现子宫平滑肌的异常收缩与痛经的发作和程度有关，而且应用平滑肌舒张剂对痛经症状有有效的缓解的作用[2]，在平滑肌收缩和舒张过程中，5 型磷酸二酯酶（PDE5）是调节环鸟苷酸（cGMP）分解的关键酶，所以PDE5 被其抑制剂抑制后，分解cGMP 的作用降低了，使平滑肌处于舒张状态，从而缓解AM 疼痛症状[3]。本次研究拟收集AM 和非AM 的患者相关资料，对比PDE5 在子宫组织中的表达情况，以及分析PDE5AM中并发的痛经程度和骶韧带触痛的发作程度的关系，以分析PDE5 在AM 发病中的关系，为AM 的药物治疗寻找新的方向，现报道如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2015 年6 月—2016 年6 月苏州大学附属第二医院妇科因妇科良性疾病行子宫全切或者次全切除的患者108 例，依据术后病理结果将患者分为AM 组56 例和非AM 组52 例。纳入标准：因良性疾病行全子宫或次全子宫切除术；非绝经女性；手术前均无应用激素或曼月乐环等治疗。排除标准：合并有内分泌或遗传代谢疾病的患者；术后病理确认为恶性肿瘤患者；不同意纳入研究，或依从性不佳者。所有患者术前均详细沟通手术和研究目的及相关影响，并签署知情同意书。本研究方案取得苏大附属第二医院伦理委员会批准（ChiCTRCOC-16008363）。

1.2 方法

（1）收集基础资料，包括年龄、月经史、生育史、痛经、慢性盆腔痛等症状及体格检查结果等。其中患者疼痛相关症状程度的评估采用视觉模拟评分法（Ⅴisual Analogue Score, ⅤAS）。（2）术后病例标本的处理PDE5 的检测的方法：免疫组化法——取子宫体部子宫内膜及子宫平滑肌，采用免疫组化二步反应法进行染色。使用高倍镜（400倍）下随机观察4 个观察视野。以镜下见到细胞胞浆内棕黄色细颗粒者为阳性染色。按阳性细胞的数量及染色强度进行半定量评分描述。

1.3 统计学方法

应用SPSS 23.0 统计分析软件。正态分布计量资料用均数±标准差（± s）表示，用独立样本t检验；非正态分布计量资料对比采用秩和检验；计数资料用[n（%）]表示，采用χ2检验。相关性分析则应用Spearman 相关分析。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 两组一般临床资料比较

AM 组患者痛经、骶韧带触痛等疼痛症状的发病率明显高于非AM 组患者，差异有统计学意义（P＜0.01）；其他基本信息如年龄、月经异常情况等对比差异均无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 两组患者一般情况比较

2.2 两组患者子宫各组织中的PDE5 表达情况

在月经的增生期和分泌期，两组患者的子宫内膜都可检测出PDE5，但各自表达水平参差不齐，PDE5 在AM组患者中的表达明显高于非AM 组，差异有统计学意义（χ2=12.11，P＜0.01），增生期两组的PDE5 表达对比差异有统计学意义（χ2=26.82，P＜0.01）；分泌期两组子宫内膜的PDE5对比差异有统计学意义（χ2=14.87，P＜0.01），见表2。

表2 两组患者内膜中PDE 的表达比较（例）

2.3 AM 组中平滑肌细胞中PDE5 的表达与痛经、骶韧带触痛程度的相关性

结果显示，子宫平滑肌中PDE5 的表达水平与痛经程度呈正相关（r=0.71，P＜0.01）；在与骶韧带触痛程度上，随着触痛程度的加剧，子宫平滑肌的PDE5 表达也在增加；两者呈正相关（r=0.76，P＜0.01），见表3 ～4、图1 ～2。

表3 子宫平滑肌细胞中PDE5 表达水平与痛经程度关系（例）

图1 AM 患者PDE5 表达水平与痛经程度的相关性

图2 AM 患者PDE5 表达水平与骶韧带触痛程度的相关性

表4 AM 患者PDE5 表达水平与骶韧带触痛相关性（例）

3.讨论

AM 是育龄期女性较为常见的妇科良性疾病，其主要的发病机理是子宫内膜侵入至子宫平滑肌层，引起平滑肌细胞等周边细胞变性，原有功能紊乱，从而引起月经异常、痛经等症状，为子宫内异症的特别类型之一。有大型相关研究发现其发病率高达为15%～25%，严重影响着育龄妇女的生活质量[4]。目前尚无特别满意的治疗药物，在病理分子层面寻找合适的治疗方向是当前研究的热点问题[5]。

A M 的成因复杂，发现的形成机制线索众多，尚缺乏一个完整的统一的观点。反复多次妊娠、流产、子宫附件的炎症等都会损伤内膜基底层，进而引起一系列复杂的病理生理改变，造成子宫内膜迁移进肌层从而形成A M[6]。5 型磷酸二酯酶是人体调节肌肉细胞收缩舒张的关键催化酶之一，通过特异性催化cGMP 水解而减少肌肉细胞内环鸟苷酸水平，从而影响子宫平滑肌细胞的收缩，而子宫的异常收缩是A M 痛经等不适临床症状的主要病理基础，分析PDE5 在子宫肌层的表达以及和痛经、骶韧带触痛的关系，可为临床治疗的选择提供很好的靶点[7]。

本实验收集了手术切除子宫的AM 等妇科良性病变的患者，检测PDE5 的表达水平，并对比分析增生期和分泌期子宫内膜中PDE5 的表达水平，以及分析平滑肌细胞的PDE5 表达水平与疼痛程度的相关性。发现PDE5在不同的月经周期均有较高的表达，而且高于非AM 组，提示PDE5 的高表达在AM 中可能存在一定的特异性。很早就有研究证实硫化氢（hydrogen sulfide, H2S）在调节平滑肌的功能的关键物质之一，H2S 属于常用的PDE5 抑制剂之一，可以通过抑制PDE5 水解cGMP 来使平滑肌处于舒张态，从而缓解肌肉组织的收缩[8]。本研究发现AM 患者子宫内膜和平滑肌中检测出相对高水平的PDE5，进一步其与临床症状相关性，分析发现AM 患者的子宫平滑肌中PDE5 的表达水平与疼痛发生程度均呈明显正相关性。本实验具体分析PDE5 表达与痛经、骶韧带触痛的相关性，结果提示PDE5 可能与AM 的进展和症状发作密切相关，可能是AM 疾病发生发展的关键物质之一。而且很多相关研究发现平滑肌舒张剂对妇科疼痛发作的缓解有很大的作用[9]。综合而言，多项研究提示AM 患者痛经、骶韧带触痛等临床症状与平滑肌中PDE5 密切相关。应用PDE5 抑制剂可能对缓解患者AM的临床症状有很大意义。但本次探究入选样本量相对不多，需继续加大样本量进一步分析并判研其对此类疾病的治疗具有很大的临床价值。

综上所述，PDE5 在AM 患者的子宫内膜及平滑肌细胞中有大量存在，而且PDE5可能与AM的疼痛类症状如痛经、骶韧带触痛的程度和进展存在相关性，应用PDE5 抑制剂是治疗AM 的新思路，值得临床进一步深入分析讨论。