吉林省2～<6岁健康儿童血清N末端B型利钠肽原参考范围的建立*

何 冰，徐攀洋，周 琪，许建成△

吉林大学第一医院:1检验科;2.儿科，吉林长春 130021

N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)可用于心力衰竭筛查、诊断、鉴别诊断、病情严重程度及预后评估[1]。出院前的NT-proBNP检测有助于评估心力衰竭患者出院后的心血管事件发生风险[2]。NT-proBNP无生物学活性，具有半衰期长、体外稳定、血清中水平高易检测等特点[3]。基于NT-proBNP较高的临床应用价值，其受到了临床医生的普遍认可与重视。目前，NT-proBNP参考范围多由检测试剂生产厂商所提供，或来源于欧美人群的研究数据，并不能反映和代表我国人群的水平特征。我国至今尚未发布全国性儿童检验项目参考范围，儿童多沿用成人的参考范围，而临床实践表明，成人参考范围不适用于评估儿童健康状况和疾病，这会导致临床诊断误差。目前，国内缺乏健康儿童NT-proBNP的大规模筛查，本研究旨在评估吉林省2～<6岁健康儿童NT-proBNP水平，并探讨其相关影响因素，以期为临床提供诊疗依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年8月至2018年11月来自吉林省长春市、吉林市、延边朝鲜族自治州、松原市的社区和儿童保健中心2～<6岁健康儿童1 406例为研究对象，男692例，女714例。其中长春市645例(男306例，女339例)，吉林市147例(男73例，女74例)，延边朝鲜族自治州149例(男81例，女68例)，松原市465例(男232例，女233例)。2～<3岁儿童437例，其中男212例，女225例；3～<4岁儿童309例，其中男158例，女151例；4～<5岁儿童186例，其中男98例，女88例；5～<6岁儿童474例，其中男224例，女250例。以调查问卷的方式进行初步筛查，排除标准：合并急慢性感染、消化系统疾病、肾脏疾病、内分泌系统疾病、血液系统疾病、结缔组织病及心血管疾病；近6个月内有手术史，近4个月内有输血史，近2周内有药物使用史；体质量指数(BMI)超出同龄人标准BMI的10%。经调查问卷排除后剩余儿童再进行实验室筛查，排除标准：乙肝病毒表面抗原阳性，丙肝病毒抗体阳性，人类免疫缺陷病毒抗体阳性，血清肌酐>120 μmol/L，血清尿酸>475 μmol/L，空腹血糖>7.0 mmol/L，C反应蛋白>12.0 mg/L，血清肌酸激酶>500 U/L。本研究经本院医学伦理委员会批准(伦理审批号：2016-306)。

1.2仪器与试剂 VITROS 5600全自动生化免疫分析仪及配套NT-proBNP试剂盒。

1.3标本采集与检测 儿童采血前3 d正常饮食及活动，采血前1 d空腹8 h(3岁以下儿童空腹时间为3～6 h)后于清晨统一采血。血液标本采集后于室温下静置30 min以上，以3 000 r/min离心10 min，剔除明显溶血、脂血、黄疸标本。经上述处理后，长春市来源标本于2 h内，非长春市来源标本于8 h内经冷链送至本院检验科检测，检测方法为化学发光法。

1.4质量控制 本院检验科已经通过中国国家合格评定委员会ISO15189医学实验室质量与能力认可，参加本研究的技术人员均经过系统培训及考核。检测设备由工程师定期维护及校准。

1.5统计学处理 采用SPSS25.0、LMS2.54软件进行数据分析和绘图。首先绘制分布图和各年龄段箱图，判断计量资料是否服从正态分布，并直接观察是否有离群值，使用Dixon法剔除离群值。呈非正态分布的计量资料以M(P25,P75)表示，两组间比较采用Mann-WhitneyU检验，多组间比较采用Kruskal-WallisH检验；采用Spearman相关分析各指标与NT-proBNP水平的相关性；采用逐步法多重线性回归分析NT-proBNP水平的独立影响因素。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.12～<6岁健康儿童NT-proBNP的参考范围 各年龄段NT-proBNP水平均呈偏态分布。同一年龄段内男、女NT-proBNP水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，故无需按性别分组建立参考区间，见表1。随年龄增加，NT-proBNP水平略呈下降趋势，但总体较平稳，见表2。各年龄段间NT-proBNP水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，故无需按年龄分组建立参考区间。 2～<6岁健康儿童NT-proBNP的参考范围为25～272 pg/mL，P2.5参考限、P97.5参考限的90%CI分别为23～28、258～288 pg/mL。

表2 吉林省2～<6岁各年龄段健康儿童NT-proBNP各百分位点水平(pg/mL)

2.2各指标与NT-proBNP水平的相关性 Spearman相关分析结果显示，未控制年龄因素时，健康儿童NT-proBNP水平与年龄、三酰甘油、高密度脂蛋白、肌酐、尿素氮水平呈负相关(P<0.05)。控制年龄因素后，Spearman相关分析结果显示，三酰甘油、BMI、尿素氮水平与NT-proBNP水平呈负相关(P<0.05)。进一步控制BMI因素后，Spearman相关分析结果显示，尿素氮、三酰甘油水平与NT-proBNP水平仍呈负相关(P<0.05)，见表3。

表3 各指标与NT-proBNP水平的相关性

续表3 各指标与NT-proBNP水平的相关性

2.3NT-proBNP水平的影响因素分析 将NT-proBNP水平进行自然对数转换，使其近似正态分布。将年龄、BMI、三酰甘油、高密度脂蛋白、肌酐、尿素氮引入多重线性回归分析模型，结果显示，年龄、BMI、三酰甘油、尿素氮为NT-proBNP水平的独立影响因素(P<0.05)，见表4。

表4 NT-proBNP水平的影响因素分析

2.4与国内外相关研究建立的血清NT-proBNP参考范围比较 与国内外相关研究建立的血清NT-proBNP参考范围比较，本研究得出的参考范围上限和下限均略有差异，见表5。

表5 与国内外相关研究建立的NT-proBNP参考范围比较

3 讨 论

NT-proBNP是心脏内分泌活动的产物，主要由心室肌细胞产生，通过肾脏排泄清除。近年来，血清NT-proBNP由于检测快速、结果准确，在儿童心力衰竭中的应用越来越广泛，因此建立适合儿童的NT-proBNP参考范围十分必要。本研究在吉林省进行了健康儿童NT-proBNP水平调查，建立了2～<6岁健康儿童的参考范围，并分析了健康儿童NT-proBNP水平的影响因素，为临床诊治提供了基础数据。

本研究入组的样本量较大，每一年龄段男女数量较平均，筛选标准严格，能较为客观地反映健康儿童的NT-proBNP水平特征。本研究同一年龄段内男、女NT-proBNP水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，这与国外诸多报道结果一致[4-6]。随年龄增长，NT-proBNP水平略呈下降趋势，但各年龄段间NT-proBNP水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，因此无需按年龄分组建立参考区间。德国学者NIR等[6]对690例0～18岁健康者进行了NT-proBNP检测，按年龄分为7组，其中>2～6岁儿童(81例)的参考范围为5～391 pg/mL，参考上限高于本研究，出现此差异可能与检测系统、种族、样本量等不同有关。使用与本研究相同检测系统的加拿大1～5岁儿童的NT-proBNP参考范围为28～310 pg/mL[4]，参考上限及参考下限与本研究略有差异，可能与种族、样本量等因素有关。国内长沙地区的相关研究结果显示，1～4岁、>4～7岁健康儿童NT-proBNP的参考上限均高于本研究[7]，可能与检测系统、年龄分布不同等因素有关。

本研究中，NT-proBNP水平的主要影响因素包括年龄、BMI、三酰甘油、尿素氮，与既往报道类似[8-10]。NT-proBNP水平随着儿童年龄的增长有所改变，可能是由于随着年龄增长，儿童心脏结构或功能发生了变化，或是多种因素相互作用的结果，其确切机制仍有待继续研究。BMI是NT-proBNP水平的独立影响因素，肥胖者心肌细胞神经肽的合成和释放功能受损，释放利钠肽减少，从而影响NT-proBNP水平[11]。利钠肽清除受体在脂肪组织中含量丰富，说明脂肪细胞可能参与了NT-proBNP在血液循环中的清除过程。有研究表明，糖基化失调可能对NT-proBNP水平也有一定影响[12]。三酰甘油对NT-proBNP的影响可归因于非血流动力学因素。NT-proBNP主要通过肾脏排泄，受肾功能影响较大[13]。本研究中尿素氮是健康儿童NT-proBNP水平的独立影响因素，验证了SHENKMAN等[14]的报道。SAI等[10]的研究发现，年龄、血脂、肾功能等均与NT-proBNP水平有显著相关性，上述因素对NT-proBNP的生物学影响仍有待进一步确定，但可以确定的是根据影响因素来探讨人群NT-proBNP参考范围具有重要的意义。

综上所述，2～<6岁健康儿童NT-proBNP水平的参考范围为25～272 pg/mL。年龄、BMI、三酰甘油、尿素氮是2～<6岁健康儿童NT-proBNP水平的独立影响因素。建立各地区健康儿童NT-proBNP的参考范围对儿童相关疾病的诊疗具有重要意义。