外周血单个核细胞EB病毒DNA检测的结果分析及临床意义

蔡丽娟 任妹 刘剑荣 潘幸

（萍乡市人民医院检验科, 江西 萍乡 337000）

EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）是一种双链DNA病毒，属于γ-疱疹病毒亚科淋巴浅隐病毒属，容易长期潜伏于淋巴细胞中，通过环状DNA的方式游离于胞浆整合染色体内。一般情况下，EBV对免疫功能正常者基本无影响；但当免疫功能受损后，EBV会大量复制，引起临床出现病理变化。大量研究发现，EBV好发生于儿童时期，尤以幼儿期常见，且大部分患儿感染后无明显症状；但该病毒会终身伴随患儿，影响患儿免疫机制，可能造成患儿免疫功能出现障碍，发生淋巴组织增殖性疾病等相关并发症[1～2]。

目前，临床对于EBV的诊断主要依赖患者临床症状及实验室辅助诊断，但存在检测率较低、高假阳性率等缺点。有研究发现，采用PCR技术对外周血单个核细胞EBV的DNA检测较血清学检测阳性率高[3]。类似的，既往研究表明，对怀疑EBV感染或免疫异常的婴幼儿予以PCR技术检测对患儿病情具有良好评估作用[4]。因此，采用PCR技术可提升临床对EBV的检出率，为EBV相关疾病的诊治提供一定临床价值。鉴于此，本研究选取本院就诊治疗的120例疑似EBV患者的临床资料，分析外周血单个核细胞EBV的DNA检测的结果分析及临床意义，具体见下。

1 对象与方法

1.1 一般资料

选取2020年1月至2020年12月于本院疑似EBV感染诊疗的120例患者，儿童97例，成人23例，97例儿童中男52例，45例，年龄为0.5～14岁，平均年龄7.24±2.38岁，其中0-3岁患儿71例，大于3岁患儿26例。23例成人中男14例，女9例，年龄为22～46岁，平均年龄25.84±6.71岁。该研究经医院伦理委员会批准。纳入标准：受检者资料完整；无中途退出研究者；所有患者及其家属均知晓本研究并签署知情同意书。排除标准：合并心、肝、肾等脏器病变者；临床资料缺失者。

1.2 方法

荧光定量PCR检测EBV-DNA：抽取患者EDTA 抗凝外周血3 mL,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞。将采集好的外周血单个核细胞经12000 r•min-1离心机离心5 min，去上清，沉淀后将50 μL提取液混匀，以100 ℃恒温孵育10 min。再次采用12000 r•min-1离心机离心5min，上清液即为模板。利用中山达安公司 EBV 荧光PCR检测试剂盒进行EBV-DNA测定。小于500拷贝•mL-1为阴性。

1.3 观察指标

对比不同人群EBV-DNA阳性检出率情况。

1.4 统计学方法

本研究数据采用SPSS22.0软件进行统计分析，计量资料采用平均值±标准差（±SD）表示，行t检验；计数资料采用例（n）及百分数（%）表示，行χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 EBV-DNA在各人群中的阳性检出率

EBV-DNA阳性检出率在儿童检出率明显高于成人（P<0.05），见表1。

表1 EBV-DNA在各人群中的阳性检出率

2.2 不同患儿中的EBV-DNA阳性检出率

EBV-DNA阳性检出率在小于3岁的患儿常见于上呼吸道感染、肺炎、支气管炎，在大于3岁的患儿中常见于上呼吸道感染、肺炎、扁桃体炎等患儿中；两组EBV-DNA阳性检出率比较（43.66% vs 46.15%，P>0.05）,差异无统计学意义；见表2。

表2 不同患儿中的EBV-DNA阳性检出率

2.3 患儿临床表现与EBV-DNA阳性率的关系

在小于3岁的患儿中，发热、黄疸、咳嗽、眼睑浮肿的患儿EBV-DNA阳性检出率较高；在大于3岁的患儿中，发热、咳嗽、咽峡炎、颈淋巴结肿大的患儿EBV-DNA阳性检出率较高；但两组EBV-DNA阳性检出率比较（43.66% vs 46.15%，P>0.05），差异无统计学意义；见表3。

表3 患儿临床表现与EBEBV-DNA阳性检出率

3 讨论

EBV好发于儿童，是儿科常见感染疾病。本研究发现，检出EBV-DNA阳性者以儿童居多；这与既往研究对可疑EBV感染患者阳性检测发现，该阳性率高达42.94%相一致[5]。为明确影响EBV-DNA阳性在患儿疾病分布情况，本研究对患儿疾病进行追踪发现，在发生上呼吸道感染、肺炎、支气管炎、扁桃体炎等疾病中具有较高的阳性率。可能与EBV可侵犯B淋巴细胞，使B淋巴细胞抗原发生改变，引起T淋巴细胞防御形成细胞毒性效应，导致患者机体细胞溶解、死亡有关。本研究结果表明3岁以下及3岁以上儿童EBV-DNA阳性检出率比较无差异，但本研究样本量较少，有待今后继续研究。

另研究表示，原发性EBV感染的临床表现与感染时患者的年龄密切相关，当原发性感染发生在1～5岁时常不表现出特异性的疾病。EBV可以影响身体的任何器官系统，临床可表现为疲劳、发热、颈后淋巴结肿大、脾肿大等，亦可伴有黄疸、肝肿大[6]。这与本研究结果相符，因此，临床上医师在接诊该类患儿时应密切关注并予以针对性检测，避免漏诊及误诊。

综上所述，外周血单个核细胞中EBV-DNA检测发现，儿童感染最为常见，且常隐匿于上呼吸道感染、肺炎、支气管炎、扁桃体炎中。对该类患儿进行外周血单个核细胞EBV-DNA检测有利于临床早期诊治疾病，降低重症疾病发生，值得临床推广。