尿TRF、NAG1和血清CysC对早期糖尿病肾病的诊断价值

刘 芳，李扬宇，毛起官，林 青

福建中医药大学附属人民医院检验科，福建福州 350004

糖尿病肾病(DN)是糖尿病的常见微血管并发症之一，晚期可以出现严重的肾衰竭，是导致糖尿病患者死亡的主要原因[1]。据统计，DN患者进展至终末期肾病的速度比一般肾小球疾病患者快约14倍[2]，DN患者约占开始血液透析肾病患者的25%[3]，因此，寻找早期敏感生化指标对DN的早期诊断及预防具有十分重要的意义。目前临床上常用肌酐和尿素氮作为肾功能检测指标，但是早期诊断的灵敏度较差[4]。本研究对90例2型糖尿病(T2DM)患者和30例健康者的尿转铁蛋白(TRF)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG1)和血清胱抑素C(CysC)水平进行观察比较，旨在探讨尿TRF、NAG1和血清CysC水平在DN早期诊断中的意义，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2020年9-11月本院内分泌科及肾病科门诊和病房收治的T2DM患者90例，其中男60例、女30例，平均年龄(54.43±1.46)岁；另选择同期本院体检健康者30例作为对照组，其中男19例、女11例，平均年龄(52.15±2.31)岁。T2DM患者与体检健康者的性别和年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2纳入标准 (1)T2DM纳入标准：入选患者均符合2014年美国糖尿病协会(ADA)糖尿病诊疗指南的糖尿病诊断标准[5](即空腹血糖≥7.0 mmol/L，口服糖耐量试验2 h血糖≥11.1 mmol/L)，除DN外所有入选患者均排除肿瘤、妊娠、心脏病、泌尿系统疾病、血液系统疾病、其他内分泌疾病、肝脏疾病及其他肾脏疾病。(2)DN纳入标准：符合2009年美国肾脏病基金会(NKF)和美国食品药物监督管理局(FDA)制定的DN诊断标准[6]。(3)对照组纳入标准：受试者及直系亲属既往无糖尿病史，且排除肝脏、肾脏、心血管和内分泌系统等疾病，肝功能、肾功能、血糖、血脂、血压及尿常规均正常。

1.3T2DM患者分组标准 按照2009年NKF和FDA制订的尿清蛋白分级系统[6]，依据尿微量清蛋白(mAlb)/肌酐比值(ACR)水平，将糖尿病患者分为无肾病的单纯糖尿病组(DM组，30例，男23例、女7例，ACR<10 mg/g)、早期DN组(30例，男16例、女14例，10 mg/g≤ACR≤29 mg/g)和DN组(30例，男21例、女9例，ACR>29 mg/g)。

1.4方法 所有受试者均清淡饮食3 d，空腹8 h后于早晨采集静脉血5 mL置于无抗凝剂的抽血管内，同时采集新鲜中段晨尿10 mL于采尿管内，尿mAlb、肌酐检测采用酶法，使用雅培C16000全自动生化分析仪及配套试剂完成测定。采用散射比浊法在西门子BNⅡ System特定蛋白分析仪上测定尿TRF，试剂由西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供。尿TRF的正常参考值为0～0.20 mg/dL；尿NAG1采用MNP-G1CNAc底物法，血清CysC采用散射比浊法，均使用雅培C16000全自动生化分析仪及配套试剂完成测定。尿NAG1的正常参考值为0～11.50 IU/L，CysC的正常参考值为0.56～1.22 mg/L。均按照仪器、试剂说明书及相关标准操作规程进行检测。

2 结 果

2.1尿TRF、NAG1和血清CysC水平比较 4组尿TRF、NAG1和血清CysC水平比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；两两比较，早期DN组的尿TRF、NAG1和血清CysC水平高于DM组及对照组，DN组高于早期DN组、DM组及对照组(P<0.05)，见表1。

表1 4组尿TRF、NAG1和血清CysC水平比较

2.24组尿TRF、NAG1和血清CysC单独及联合检测的阳性率比较 尿TRF、NAG1和血清CysC阳性率随着疾病进展不断升高，其中早期DN组尿TRF、NAG1阳性率均高于50.0%，而TRF、NAG1、CysC联合检测的阳性率高达93.3%，见表2。

表2 4组尿TRF、NAG1和血清CysC单独及联合检测的阳性率比较[n(%)]

2.3尿mAlb、TRF、NAG1及血清CysC水平间的相关性分析 Pearson相关分析显示，尿TRF、NAG1及血清CysC水平与尿mAlb均呈正相关(r=0.91、0.65、0.42，P<0.05)，其中尿TRF与尿mAlb相关性最好；尿TRF与NAG1、尿TRF与血清CysC、尿NAG1与血清CysC之间也均呈正相关(r=0.58、0.34、0.56，P<0.05)，见表3。

表3 尿mAlb、TRF、NAG1及血清CysC间的相关性

2.4尿TRF、NAG1和血清CysC单独和联合检测对早期DN的诊断效能 ROC曲线分析显示，尿TRF、NAG1和血清CysC 3项联合检测诊断早期DN的曲线下面积(AUC)为0.991，优于这3项指标单独检测的0.913、0.852、0.880(P<0.05)，见表4。

表4 尿TRF、NAG1和血清CysC对早期DN诊断的ROC曲线分析结果

3 讨 论

DN发病隐匿，症状往往不明显，在早期不能得到及时诊断，从而延误治疗。目前诊断DN的实验室指标包括两类：反映肾小球功能损伤的检测指标及反映肾小管损伤的检测指标[7]。DN是一种低度的炎症性疾病，NAG1是一种在肾损伤期间释放的分泌蛋白，可作为早期肾损伤的标志物[8]。CysC可以通过肾小球自由过滤，并被近端小管重吸收和分解代谢[9]，研究表明，CysC是早期肾功能不全的良好指标[10]。铁作为机体的重要氧化剂,具有启动和催化机体氧化应激反应,加速活性氧形成的作用，因此，其水平变化会对机体细胞内的物质交换产生影响,诱发肾脏血管内皮细胞功能异常，是导致T2DM血管病变的发病机制之一[11]，尿TRF水平可反映机体血液循环中蛋白结合铁的总含量[12]。因而本研究采用上述3项指标进行观察。

本研究结果显示，早期DN组的尿TRF、NAG1和血清CysC高于DM组及对照组(P<0.05)，而DN组高于早期DN组、DM组及对照组(P<0.05)，说明随着肾损伤程度的加深，尿mAlb水平不断增加，其余各指标也相应升高。进一步分析尿TRF、NAG1和血清CysC检测的阳性率，在早期DN组中，TRF、NAG1单独检测的阳性率均高于50.0%，而3项联合检测的阳性率高达93.3%，说明3项指标联合检测可减少早期DN漏诊率。在相关性研究中，尿TRF、NAG1和血清CysC任意二者之间均呈现良好的正相关，其中TRF与NAG1相关性最好(r=0.58，P<0.05)。ROC曲线分析显示，尿TRF、NAG1，血清CysC单独检测诊断早期DN的AUC分别为0.913、0.852、0.880，说明这3项指标对早期DN均有较好的诊断价值；本研究还分别对TRF、NAG1、CysC两两联合、3项联合检测的诊断效能进行了分析，结果显示，3项指标联合检测诊断早期DN的AUC、灵敏度及特异度均高于两两联合检测(P<0.05)。因此，TRF、NAG1、CysC 3项联合检测诊断早期DN的效能优于单独检测及两两联合检测。

综上所述，尿TRF、NAG1和血清CysC联合检测具有较高的诊断价值，可提高早期DN的确诊率，为DN的早期干预提供帮助，延缓DN进展，提高患者生存质量。