脾多肽联合PAD对多发性骨髓瘤血清BALP、β-CTX和OPG水平的影响

范小红，孙丽华

复旦大学附属中山医院青浦分院血液科，上海 201700

多发性骨髓瘤主要表现为浆细胞的恶性增殖，是一种严重的血液性疾病，以老年患者居多，占血液恶性肿瘤中的第2位，构成比为10%～15%。随着我国进入老年化社会，其发病率呈逐年上升趋势[1]。此类患者一旦发病，出现浆细胞的异常增殖，可造成机体的极大损伤，几乎不可能完全治愈，并且临床控制的缓解率较低，目前对其致病机制的研究仍不清楚，主要考虑为与免疫因素有关的血液性疾病[2]。现有的治疗主要采用硼替佐米、阿霉素和地塞米松(PAD)方案，虽然一定程度上能够提高生活质量，但其复发率仍较高，容易产生耐药性[2]。脾多肽是从健康小牛脾脏中提取获得，能够改善机体的免疫功能，加速机体T细胞成熟和分化，维持机体的免疫功能，与传统的化疗结合能够提高疗效和改善预后的作用[4-5]。本研究采用脾多肽联合PAD治疗多发性骨髓瘤，取得了较好的疗效，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2017-2018年在本院就诊的96例多发性骨髓瘤患者作为研究对象，按照随机数字表法分为对照组和观察组，每组48例。观察组男31例，女17例；年龄48～86岁，平均(65.31±12.76)岁；病程9～36个月，平均病程(21.38±6.27)个月；肿瘤分期：Ⅰ期18例，Ⅱ期16例，Ⅲ期14例。对照组男28例，女20例；年龄46～85岁，平均(64.89±11.29)岁；病程7～36个月，平均病程(22.16±7.15)个月；肿瘤分期：Ⅰ期16例，Ⅱ期18例，Ⅲ期14例。纳入标准：所有患者均符合多发性骨髓瘤的诊断标准。排除标准：预期生存时间不超过6个月的患者；已经诊断为浆细胞白血病的患者；智力障碍和精神障碍患者；合并心、肝、肾等重要脏器疾病患者；其他恶性肿瘤患者；对药物过敏的患者。2组的性别、年龄、病程和肿瘤分期比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有患者均签署了知情同意书。本研究经医院医学伦理委员会审核通过。

1.2方法

1.2.1治疗方法 所有患者入院后完善各项检查，如血常规、凝血功能和肝肾功能检查，排除化疗禁忌，对于白细胞计数小于1×109/L者，予以集落刺激因子治疗；血红蛋白小于60 g/L者予以红细胞悬液治疗。对照组采用PAD治疗方案：硼替佐米注射液，按照1.3 mg/m2，皮下注射给药，在第1、4、8、11天给药；脂质体阿霉素，25～30 mg/m2，静脉滴注，在第1天给药；地塞米松40 mg，静脉滴注或者口服，在第1～4天给药。观察组在对照组的治疗基础上，予以脾多肽注射液10 mL静脉滴注，在化疗前1 d开始用药，连续使用5 d。2组均以28 d为1个疗程，连续治疗3个疗程后评价疗效。

1.2.2疗效评价 参照国际骨髓瘤工作组的标准[6]，尿液和血清中无M蛋白，骨髓浆细胞不超过5%，溶骨性病变数量和大小未改变为完全缓解(CR)；血清和尿液中的M蛋白呈阳性，其他与CR完全一致为接近完全缓解(nCR)；M蛋白减少≥50%为部分缓解(PR)；M蛋白减少在25%～<50%为轻微缓解(MR)；M蛋白减少<25%为无变化(NC)；M蛋白增加≥25%，浆细胞增加≥25%或者出现新的溶骨性病变或原有病变增大为疾病进展(PD)。总有效率=(CR例数+nCR例数+PR例数)/总病例数×100%。

1.2.3标本留取和指标检测 患者入院时和3个疗程结束后抽取肘静脉血10 mL，分装于干燥管和抗凝管内。抗凝管内血液标本用于血常规检测，血常规采用日本日立公司7600-020自动生化仪进行检测。干燥管内血液标本以3 000 r/min，半径15 cm，离心15 min，抽取上清液放置在除酶管内，置于-70 ℃冰箱中保存。血清M蛋白、β2-微球蛋白检测采用免疫扩散电泳法，血清骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、β-骨胶原交联(β-CTX)和护骨素(OPG)水平采用酶联免疫法进行检测，试剂盒来自上海森珏公司，并根据试剂盒说明书进行操作。患者治疗前和治疗3个疗程后在无菌操作下经髂骨骨髓穿刺采集骨髓液0.2 mL，在骨髓涂片下观察骨髓瘤细胞和浆细胞比例、成骨细胞和破骨细胞个数。

1.2.4观察指标 观察2组疗效，治疗前后血清M蛋白、β2-微球蛋白水平，骨髓瘤细胞比例、成骨细胞个数、破骨细胞个数、浆细胞比例，血小板计数、中性粒细胞绝对值、血红蛋白，以及血清BALP、β-CTX、OPG水平的变化。

2 结 果

2.12组疗效比较 观察组总有效率为83.33%，高于对照组的60.42%(χ2=5.153，P<0.05)，见表1。

表1 2组疗效比较

2.22组治疗前后血清M蛋白、β2-微球蛋白水平和骨髓瘤细胞比例比较 2组治疗前M蛋白、β2-微球蛋白水平和骨髓瘤细胞比例差异无统计学意义(P>0.05)，治疗后均较治疗前降低(P<0.05)，且观察组降低程度较对照组更明显(P<0.05)，见表2。

表2 2组治疗前后血清M蛋白、β2-微球蛋白水平和骨髓瘤细胞比例比较

2.32组治疗前后成骨细胞个数、破骨细胞个数和浆细胞比例比较 2组治疗前成骨细胞个数、破骨细胞个数和浆细胞比例差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后成骨细胞个数较治疗前增加，而破骨细胞个数和浆细胞比例较治疗前降低(P<0.05)，且观察组增加或降低的程度较对照组更明显(P<0.05)，见表3。

表3 2组治疗前后成骨细胞个数、破骨细胞个数和浆细胞比例比较

2.42组治疗前后血小板计数、中性粒细胞绝对值和血红蛋白水平比较 2组治疗前血小板计数，中性粒细胞绝对值和血红蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后血小板计数和中性粒细胞绝对值均较治疗前降低，而血红蛋白水平较治疗前升高(P<0.05)；观察组与对照组比较，对照组治疗后血小板计数和中性粒细胞绝对值降低程度更明显，而观察组血红蛋白水平升高程度更明显(P<0.05)，见表4。

表4 2组治疗前后血小板计数、中性粒细胞绝对值和血红蛋白水平比较

2.52组治疗前后血清BALP、β-CTX和OPG水平比较 2组治疗前血清BALP、β-CTX和OPG水平差异无统计学意义(P>0.05)，2组治疗后BALP和OPG水平均较治疗前升高，而β-CTX水平较治疗前降低(P<0.05)，且观察组升高或降低程度较对照组更明显(P<0.05)，见表5。

表5 2组治疗前后血清BALP、β-CTX和OPG水平比较

3 讨 论

多发性骨髓瘤约占全部恶性肿瘤的1%左右，占血液系统恶性肿瘤的10%，以中老年患者为主。随着我国老年化社会进程的加快，其发病率呈上升趋势。多发性骨髓瘤早期症状常常不明显，待确诊时多数属于Ⅱ期以上，未治疗患者中位生存期仅为6个月，常规化疗仅有10%的生存率，中位生存期不超过3年[7]。临床上其治疗以PAD化疗方案为主，近期有效率为60%～70%[8]。本研究发现观察组的疗效明显优于对照组(P<0.05)，可能与脾多肽能够激活非特异性的免疫功能，加速T细胞成熟，促进淋巴细胞的免疫水平，激活自然杀伤(NK)细胞活性，同时具有抑制肿瘤细胞的糖酵解，导致肿瘤细胞的能量代谢发生障碍[9]，从而达到抑制肿瘤的作用有关。

多发性骨髓瘤主要的病理生理改变是破骨细胞异常活跃，破骨细胞是来源于单核巨噬细胞，对骨质具有再吸收作用的细胞。当机体受到恶性浆细胞侵犯和骨髓微环境改变时，由于各种细胞因子和微环境的刺激，破骨细胞出现异常增殖和功能活跃，并破坏骨质。M蛋白是B淋巴细胞和浆细胞异常增殖分泌的一种蛋白质，其水平的高低与骨髓瘤的严重程度密切相关[10-11]。β2-微球蛋白是骨髓浆细胞分泌的单链低相对分子质量蛋白，当骨髓瘤负荷增加时，浆细胞比例明显升高，β2-微球蛋白水平也出现相应升高，而且随着骨髓瘤分期严重程度的升高，血清β2-微球蛋白水平也会出现明显升高[12]。本研究显示，治疗后观察组与对照组比较，M蛋白、β2-微球蛋白水平，骨髓瘤细胞比例、破骨细胞个数和浆细胞比例降低程度更为明显(P<0.05)，可能与脾多肽能够提高机体免疫力，改善骨髓的微环境，降低骨髓瘤的负荷，改善成骨细胞和破骨细胞的紊乱，达到骨质重建的效果有关。这说明脾多肽提取物能够改善骨髓细胞的比例，改善骨髓功能，从而提高机体的免疫力。骨髓抑制是化疗药物常见的不良反应，可出现骨髓抑制、血小板计数和中心粒细胞绝对值的降低。本研究中，对照组治疗后血小板计数和中性粒细胞绝对值降低程度更为明显，而观察组血红蛋白水平升高程度更为明显(P<0.05)，说明脾多肽能够改善化疗后的骨髓抑制，增加骨髓储备能力，改善患者的症状，一定程度上减轻化疗的不良反应。脾多肽不仅能够提高非特异性免疫功能，而且能够激发骨髓的增殖功能，提高机体的造血功能，从而达到改善化疗引起的机体的骨髓抑制的目的[13]，这与本研究结果一致。

在骨质转换过程中，可以在血液和尿液中检测到一些反映骨代谢速率、破骨细胞和成骨细胞功能的物质。骨基质90%以上为Ⅰ型胶原，是骨和软骨中的主要胶原。β-CTX是骨质吸收的特异性标志物，破骨细胞活跃，骨质破坏增强，Ⅰ型胶原降解明显增高，血清β-CTX是最具有代表性的骨质吸收标志物[14]。现有研究表明，骨质破坏和骨转移灶数目增加，多发性骨髓瘤分期就越晚，而β-CTX水平也越高，故认为β-CTX是反映骨质吸收的特异性指标，有助于了解骨质损害和病情严重程度[15]。本研究表明，脾多肽能够明显增强PAD对多发性骨髓瘤的疗效，缓解肿瘤对骨质的破坏，从而降低血清β-CTX水平。OPG是成骨细胞分泌的糖蛋白，对骨破坏和吸收具有明显抑制作用，保护骨的完整性。在骨髓瘤的发生、发展过程中，各种细胞因子作用于成骨细胞和破骨细胞，抑制成骨细胞活性，增强破骨细胞的作用，降低机体OPG水平，OPG水平降低与骨损害程度密切相关，是反映骨质破坏程度的指标[16]。另一个指标BALP是由成骨细胞产生，是成骨细胞成熟和活性的重要指标，该指标可反映成骨细胞的状态[17]。本研究证实，观察组治疗后血清OPG和BALP水平升高程度较对照组更为明显(P<0.05)，说明脾多肽联合PAD治疗多发性骨髓瘤可保护成骨细胞，抑制破骨细胞的活性，从而使机体的OPG和BALP水平升高。

综上所述，脾多肽联合PAD治疗多发性骨髓瘤的疗效更佳，可改善骨髓细胞的比例，促进骨髓造血功能恢复。