HIV/AIDS合并侵袭性真菌感染GM和BG抗原检测的价值*

黄宛虹，陈松林，罗晓璐，刘泽端，磨立达，林英辉△

1.广西壮族自治区南宁市第四人民医院/广西医科大学附属南宁市传染病医院/广西艾滋病临床治疗中心(南宁)检验科，广西南宁 530023；2.广西中医药大学第一附属医院检验教研室，广西南宁 530023

众所周知，获得性免疫缺陷综合征(AIDS)主要因为人类免疫缺陷病毒(HIV)攻击细胞免疫，导致机体免疫功能低下从而容易发生各种感染，特别是致病性真菌和某些条件致病性真菌引起的侵袭性真菌感染(IFI)，给患者造成较大危害[1]。而IFI具有缺乏典型临床症状，影像学无特异性表现，不易病理活检，真菌涂片镜检检出率低及真菌培养时间长等特点[2-3]，严重影响了IFI的临床诊治。因此，寻求一种对IFI的诊断既准确又及时的检验方法非常必要。半乳甘露聚糖(GM)和(1，3)-β-D-葡聚糖(BG)检测已在国内外得到广泛应用，并且已证实它们对IFI的诊断效果良好[4]。本研究拟探讨GM、BG检测在HIV/AIDS合并IFI诊断中的价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年1月至2020年10月在南宁市第四人民医院住院的1 333例HIV/AIDS患者作为研究对象，所有研究对象中男986例、女347例，年龄16～94岁、平均(54.25±15.75)岁。所有HIV/AIDS患者均经确证试验证实。回顾性查阅患者住院病历，根据IFI诊断标准[5]将HIV/AIDS分为IFI组(380例)和非IFI组(953例)。IFI组中，男299例、女81例，年龄17～88岁、平均(50.51±14.91)岁；非IFI组中，男687例、女266例，年龄16～94岁、平均(56.49±15.92)岁。2组患者性别、年龄比较差异无统计学意义(P<0.05)，具有可比性。

1.2仪器与试剂 念珠菌显色平板、血培养瓶来自郑州安图生物工程股份有限公司；真菌鉴定药敏检测试剂盒、TDR-1002细菌鉴定药敏分析仪来自长沙天地人生物科技有限公司；BACT/ALERT 3D120全自动血培养仪来自法国梅里埃公司；LKM动态试管检测仪、智能恒温检测仪及配套的BG检测试剂来自湛江安度斯生物有限公司，GM检测试剂来自丹娜生物科技有限公司。所有试剂均在使用有效期内。

1.3方法 HIV/AIDS住院患者出现感染症状时，于清晨空腹抽取静脉血分别注入真空干燥管5 mL、无热源肝素钠抗凝采血管2 mL，分别以3 500 r/min离心 5min分离血清、血浆。采用酶联免疫吸附试验竞争法检测血清GM水平，GM水平≥0.85 μg/L为阳性；采用光度法检测血浆BG水平，BG≥100.5 pg/mL为阳性。同时，抽取静脉血10 mL于血培养瓶中进行血液真菌培养，并留取痰、灌洗液等标本进行真菌培养。分析GM、BG单独检测、并联检测及串联检测诊断IFI的灵敏度(SE)、特异度(SP)、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)，并比较IFI组与非IFI组的GM、BG水平及真菌分布情况。

1.4统计学处理 采用SPSS22.0统计软件对数据进行统计分析。非正态分布的计量资料以M(P25,P75)表示，组间比较采用Mann-whitneyU检验。计数资料以频数、率表示，组间比较采用χ2检验或Fisher确切概率法。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1GM、BG单独检测与联合检测对IFI的诊断效能 IFI组380例患者中，GM、BG同时阳性140例，单一GM阳性76例，单一BG阳性111例，GM、BG同时阴性53例；非IFI组953例患者中GM、BG同时阳性5例，单一GM阳性106例，单一BG阳性69例，GM、BG同时阴性773例。GM、BG单独检测、并联检测及串联检测诊断IFI的SE、SP、PPV、NPV比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；两两比较，GM单独检测与GM和BG并联检测的PPV差异无统计学意义(P>0.05)，其余差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 GM、BG单独检测与联合检测的诊断效能[%(n/n)]

2.2IFI组与非IFI组GM、BG水平比较 IFI组GM、BG水平高于非IFI组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 IFI组与非IFI组GM、BG水平比较[M(P25,P75)]

2.3IFI组与非IFI组真菌培养结果 IFI组380例患者标本真菌培养均阳性，部分患者多部位可分离出同一种或两种真菌，其中各类标本真菌培养阳性的有痰205份，骨髓或血液195份，灌洗液8份，咽拭子29份，脑脊液22份，尿液10份，大便5份，胸腔积液、腹水及脓液4份，皮肤组织2份。380例患者标本培养结果为念珠菌214例(56.32%)，以痰培养(85.06%)阳性为主；马尔尼菲篮状菌197例(51.84%)，以血液或骨髓培养(95.94%)阳性为主；隐球菌26例(6.84%)，以脑脊液培养(92.31%)阳性为主；曲霉菌15例(3.95%)，阿萨希孢子菌10例(2.63%)；混合真菌82例(21.58%)。非IFI组中400例痰或咽拭子真菌培养结果阳性，以念珠菌(98.25%)为主。见表3。

表3 IFI组与非IFI组真菌培养结果[n(%)]

组别n马尔尼菲篮状菌+隐球菌马尔尼菲篮状菌+阿萨希孢子菌念珠菌+隐球菌念珠菌+曲霉菌念珠菌+阿萨希孢子菌IFI组3803(0.79)3(0.79)11(2.89)5(1.32)4(1.05)非IFI组4000(0.00)0(0.00)0(0.00)0(0.00)0(0.00)

3 讨 论

AIDS是一种由HIV感染引起，大量破坏CD4+T细胞，导致机体免疫功能受损乃至缺陷，极易引起细菌、真菌、病毒或者原虫等多种病原体感染，而且通常伴有二重或者多重感染及肿瘤的发生等，严重危害人们健康生活的传染病。而AIDS合并真菌感染率逐年上升，且病死率高，主要由该类患者临床症状多，缺乏特异性，极易被漏诊、误诊，患者不能得到及时的救治，滥用抗真菌药物或延迟抗真菌药物治疗所致[6-8]。一般而言，诊断IFI的金标准是通过真菌培养的方法，该方法既能明确致病菌，又能做相应的真菌药物敏感试验，但是真菌培养需要的时间长，在早期无法及时指导临床使用抗真菌药物[9]，因此必须寻求一种快速而又准确的检测方法用于指导临床诊断及治疗。

GM是大多数曲霉菌属和青霉菌属真菌细胞壁的多糖抗原成分，可通过酶联免疫吸附试验竞争法对其进行检测；而BG是除隐球菌以外的真菌(包括念珠菌、曲霉菌、毛孢子菌)细胞壁的多糖成分。在IFI时，真菌被人体吞噬细胞吞噬或消化，GM、BG从细胞壁释放入血，使血液或体液中GM、BG水平升高；而在浅部真菌感染或存在定植菌时，GM、BG不释放入血，其血中水平不升高。GM、BG常在患者出现症状或影像特征前，通过不同的检测原理，对患者的血清或其他体液进行检测，可在2 h内得到检测结果。因此，通过GM、BG检测有助于临床对早期IFI与非IFI进行鉴别诊断和治疗[9-12]。本研究结果显示，GM、BG单独检测诊断IFI时，除SE较低外，其余指标均较高，与冯凯等[13]研究的结果相一致，提示GM、BG检测应用于早期IFI的诊治有较高的价值，SE较低可能原因是本研究对象主要是HIV/AIDS患者，体内处理真菌的吞噬细胞较缺乏，导致假阴性。也有报道认为，GM主要检测的是曲霉菌细胞壁GM成分，而BG主要检测真菌细胞壁的BG成分，适用于除隐球菌和接合菌以外的所有深部真菌感染的早期诊断，尤其适用于侵袭性念珠菌和曲霉感染的诊断[14]，而HIV/AIDS患者合并IFI主要以念珠菌与马尔尼菲篮状菌为主。本研究显示，BG单独检测诊断IFI的SE、SP、PPV、NPV均高于GM单独检测(P<0.05)，提示在HIV/AIDS合并IFI中BG的诊断价值高于GM；GM、BG并联检测诊断IFI的SE、NPV为86.05%、93.58%，串联检测的SP、PPV为99.48%、96.55%。GM、BG单独与联合检测诊断IFI的SE、SP、PPV、NPV比较，除GM单独检测与GM和BG并联检测的PPV差异无统计学意义(P>0.05)外，并联检测的SE、NPV和串联检测的SP、PPV均高于单独检测(P<0.05)，说明GM、BG联合检测可提高HIV/AIDS合并IFI的诊断效能，减少漏诊率与误诊率。

本研究结果还显示，IFI组的GM、BG水平高于非IFI组(P<0.05)，提示GM、BG升高有助于IFI与非IFI的鉴别，而且GM、BG检测可在2 h内得到结果，优于细菌培养[15]，可早期指导HIV/AIDS合并IFI的临床诊断和治疗，避免滥用抗真菌药物或者延迟抗真菌药物治疗，使患者能够得到及时有效救治。

本研究中IFI组主要以念珠菌(56.32%)及马尔尼菲篮状菌(51.84%)为主，其中马尔尼菲篮状菌的检出率较其他学者报道的高，可能原因为马尔尼菲篮状菌较念珠菌更容易引起血液播散，而且本研究主要以HIV/AIDS患者为主，其病原体分布与普通患者存在差异[16-17]。而不同真菌在不同部位的取材，其真菌检出情况也不一致，本研究中念珠菌以痰为主，马尔尼菲篮状菌以血液或骨髓为主，隐球菌以脑脊液为主，但不局限于这些标本，皮肤组织标本中也有马尔尼菲篮状菌检出；而非IFI组有400例培养出念珠菌或曲霉菌，标本均为痰或咽拭子，经查阅病历等证实为定植菌，因此多部位取材有助于IFI的诊断与鉴别诊断。

综上所述，HIV/AIDS患者合并IFI时GM、BG水平升高，二者联合检测可提高其诊断HIV/AIDS合并IFI的效能，临床上有助于HIV/AIDS患者合并IFI的早期诊断与鉴别诊断，减少漏诊与误诊，降低患者病死率。HIV/AIDS患者合并IFI真菌培养以念珠菌和马尔尼菲篮状菌为主，多部位取材有利于IFI的诊断。