生产工艺变更对舒肝益脾颗粒质量的影响

2021-09-12汪小康王吉东徐久春田海王旭超

牡丹江师范学院学报（自然科学版） 2021年3期

汪小康王吉东徐久春田海王旭超

摘要：对舒肝益脾颗粒中五味子醇甲进行含量测定，对黄芪、山楂进行定性鉴别，并确认工艺变更对舒肝益脾颗粒质量的影响.实验结果表明，五味子醇甲含量为0.01～0.08 mg/mL，平均回收率为98.24%，RSD为0.92%，工艺变更对舒肝益脾颗粒质量没有影响.

关键词：工艺变更;质量对比;薄层鉴别;含量测定

[中图分类号]R917 [文献标志码]A

Abstract：To determine the content of Schisandrin A and identify the Milkvetch Root and Crataegus pinnatifida Bunge in Shugan Yipi granules，to confirm the effect of technological changes on the quality of Shugan Yipi Granules.The contents of the Schisandrin A had a favourable linear correlation ranging 0.01～0.08mg/mL，the average recovery was 98.24%（RSD=0.92%）;Technological changes did not affect the quality of drugs.

Key words：process change;quality comparison;TLC identification;content determination

舒肝益脾颗粒为复方中成药，由茵陈、蒲公英、五味子、茯苓、山楂和黄芪六味中药材组成，临床上主要用于治疗湿热阻滞而致的急慢性肝炎、胆囊炎等病症.为了克服湿法制粒技术存在的设备占地面积较大，操作工体力消耗大且多凭经验等缺点，本实验在不加辅料蔗糖的情况下，采用流化床造粒技术制备无糖型舒肝益脾颗粒，根据舒肝益脾颗粒质量标准，对变更前后的样品进行检测，观察变更生产工艺对产品质量的影响.

1 仪器和药品

日本岛津高效液相色谱仪（N2000型，日本），分析天平（Sartorius BPZ110，上海），超声波清洗仪（KQ2200，佛山），数显鼓风干燥箱（GZX-9000，上海），电热恒温水浴锅（DK-S26，上海），薄层色谱摄影仪（GoodSee-II，北京），紫外分光光度计（UV-2450;上海）.

茵陳、蒲公英、五味子饮片购于吉林敖东中药饮片股份有限，山楂、黄芪甲苷、五味子醇甲均购自中国食品药品检定研究院.

2 方法与结果

2.1 生产工艺对比

原工艺取处方量药材，五味子按照渗漉法，用3倍量55%乙醇为溶剂进行渗漉，溶液浓缩至1.26～1.28（60 ℃）.茵陈等与五味子渗漉后的药渣加8倍量水煎煮二次.第一次2 h，第二次1 h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至1.28～1.30（60℃）.将渗漉稠膏与水煎稠膏混合，加适量蔗糖混匀，制粒，干燥，制成舒肝益脾颗粒.[1]

新工艺取处方量药材，五味子按照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，以3倍量55%乙醇为溶剂进行渗漉，渗漉液浓缩成干膏;其余茵陈等五味与五味子渗漉后的药渣加8倍量水煎煮二次，第一次2 h，第二次1 h，合并煎液，滤过[1]，滤液浓缩成干膏，与五味子提取物合并，粉碎过80目筛，药粉采用流化床制粒法制粒，制成舒肝益脾颗粒.

2.2 质量对比

取本品适量，平铺于白色比色板上，在日光灯下观察.[1]原工艺生产制剂为棕黄色，味甜、微涩;新工艺生产制剂为棕黄色至棕褐色，味酸、涩.

2.2.1 鉴别

黄芪取黄芪甲苷对照品，精密称定至10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释，摇匀，作为对照品溶液.取工艺变更前后舒肝益脾颗粒适量，研细，加甲醇30 mL，加热回流1 h，滤过，挥干.残渣加水30 mL溶解，用正丁醇萃取2次，每次20 mL，合并正丁醇液.用氨试液提取2次，每次30 mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇1 mL溶解.10 ℃以下放置过夜，分层，取下层溶液作为供试品溶液.取处方中黄芪以外的药材，制备成阴性对照品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液.[2-5]

吸取对照品溶液2 μL，供试品溶液8 μL，阴性对照品溶液8 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（13∶6∶2）为展开剂展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，100 ℃加热至斑点显色清晰[2-5]，结果见图1.

图1显示，工艺变更后三批样品色谱与变更工艺前供试品色谱相同，证明此法专属性良好，故将此法列入质量标准正文.变更工艺前后产品中黄芪的成分没有发生变化.

山楂取山楂对照药材，研细，至置具塞试管中.加乙酸乙酯10 mL，超声处理20 min，滤过.滤液浓缩至4 mL作为对照品溶液.取工艺变更前后舒肝益脾颗粒适量，研细，置具塞试管中，加乙酸乙酯10 mL，超声处理15 min，滤过，滤液浓缩至4 mL作为供试品溶液.取处方中山楂以外的药材，制备成阴性对照品，按供试品溶液制备方法操作，制备成阴性对照品溶液.[2，5-6]

吸取对照药材溶液3 μL，供试品溶液8 μL，阴性对照品溶液8 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水（10∶4∶1）的上层溶液为展开剂，预饱和15 min，展开，取出，110 ℃加热10 min，放冷至室温，喷用0.1 M氢氧化钠溶液调为绿色的0.2%溴甲酚绿乙醇溶液[2，5-6]，结果见图2.

图2显示，工艺变更后三批样品色谱与变更工艺前供试品色谱相同，证明变更工艺前后产品中山楂的成分没有发生变化.此法专属性良好，可以将此法列入质量标准正文.

2.2.2 粒度检查照粒度与粒度分布测定法（《中国药典》2015年版四部通则0982）第二法双筛分法操作，分别测定工艺变更前、后各三批样品不能通过一号筛和能通过四号筛的颗粒和粉末总和所占百分比.实验结果表明，变更前三批不能通过一号筛和能通过四号筛的颗粒和粉末占2.5%，变更后占2.9%，均符合要求.[2]

2.2.3 水分检查

采用水分测定法第二法（甲苯法）对舒肝益脾颗粒的水分进行测定.称取舒肝益脾颗粒适量，照水分测定法（《中国药典》2015年版四部通则0832）第四法（甲苯法）操作[2]，检查工艺变更前、后各三批舒肝益脾颗粒的水分.结果表明，变更前水分占4.32%，变更后水分占2.31%，均符合标准规定.

2.2.4 溶化性检查

称取舒肝益脾颗粒适量，按照溶化性（《中国药典》2015年版四部0105颗粒剂）项下可溶性颗粒检查法操作[2]，检查工艺变更前、后各三批舒肝益脾颗粒的溶化性.结果表明，变更前后舒肝益脾颗粒溶化性均符合标准规定.

2.2.5 装量差异检查

称取舒肝益脾颗粒10袋/批，照装量差异（《中国药典》2015年版四部0105颗粒剂）项下操作[2]，计算工艺变更前、后各批次自制品装量差异，结果见表1.

2.2.6 含量测定

取五味子醇甲对照品溶液，按《中国药典》2015年版四部“紫外-可见分光光度法”项下方法进行测定.结果表明，五味子醇甲对照品溶液在248 nm波长处有最大吸收.其色谱峰的保留时间与对照品一致.取五味子醇甲对照品溶液，加甲醇稀释至不同浓度，分别吸取10μL进样，记录峰面积，以峰面积值对浓度进行回归[2，7-9]，得回归方程为：

Y=1 382 X+6.354（r=0.999）.

实验结果表明，五味子醇甲在0.01～0.08 mg/mL范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系.

精密度实验、重复性实验、稳定性实验和加样回收实验结果表明，精密度和重复性实验的RSD值均小于1.5%，稳定性实验24 h内测定结果RSD小于1.0%.加样回收实验平均回收率为98.24%，RSD为0.92%.表明分析仪器精密度和分析方法重复性良好，所制备的溶液至少在24 h内稳定，证明所建立的分析方法适用于产品的含量测定.[2，7，8]回收率结果见表2.

取工艺变更前后各3批舒肝益脾颗粒，依法制备成供试品溶液，按含量测定中的条件进样，测定五味子醇甲含量.结果见表3.结果表明，工艺变更前后每袋舒肝益脾颗粒中五味子醇甲的含量均符合标准.

3 结论

實验结果表明，工艺的变更没有对产品的质量产生影响.因蔗糖为非功能性辅料，处方本身没有发生变化，根据《已上市中药变更研究技术指导原则》等相关指导原则，变更后可不进行临床实验，按补充申请程序申报.获得补充申请批件后可生产上市，并继续检测其临床效果和不良反应等.

参考文献

[1]中华人民共和卫生部.中华人民共和国卫生部标准：中药成方制剂第十九册（WS3-B-3709-98）[S].北京：人民卫生出版社，1990.

[2]中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典（2020版）[S].北京：化学工业出版社，2020.

[3]王冰.补肾活血颗粒的制备工艺与质量标准研究[D].济南：山东中医药大学，2017.

[4]张永昕，李莎恩，俞发，等.补中益气丸中相关药味的薄层鉴别补充研究[J].中国药业，2018，27（22）：17-20.

[5]王黎荣，王旭超，田海等.护肾安胶囊中丹参酮含量测定及主药薄层鉴别[J].牡丹江师范学院学报：自然科学版，2021（1）：46-49.

[6]周青青.健胃消食颗粒的制备工艺与质量标准研究[D].贵阳：贵州大学，2017.

[7]王春贺.复方山楂泡腾片的研究[D].长春：吉林大学，2017.

[8]李继彬.五味子咀嚼片的制备及质量控制[D].天津：天津医科大学，2017.