广州市天河区户籍妇女人乳头状瘤病毒基因与宫颈细胞病变筛查结果分析

吴海燕 侯赋园 梁泽瑜 刘运科

广州市天河区妇幼保健计划生育服务中心 510000

宫颈癌已经发展成为威胁我国妇女健康的第二大妇科恶性肿瘤［1］。研究表明，引发宫颈癌的主要因素是高危型人乳头状瘤病毒（high risk human hapillonma virus，Hr-HPV）的持续感染。从宫颈细胞癌前病变发展为浸润癌、宫颈癌，大约需要10 年的时间。因而宫颈癌的防控关键在于早发现、早诊断、早治疗。目前，液基薄层细胞学（thinprep cytologic test，TCT）与HPV-DNA 检测技术已经广泛应用于宫颈病变的临床检测。在宫颈癌筛查中，HPV-DNA和TCT的联合检测具有较高的应用价值［2］。

为了了解广州市天河区妇女HPV 感染及宫颈病变情况，探索对本地区有针对性的宫颈癌防治措施，为宫颈癌防控策略的制定提供参考依据。本文对广州市天河区5 618例宫颈癌筛查标本的HPV-DNA 亚型及TCT 结果进行了分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 在2019年至2020年内，按宫颈癌筛查项目的要求，对辖区内适龄妇女进行宣传动员，并按规范采集广州市天河区女性的宫颈脱落细胞标本，共5 618例。标本采集对象年龄范围为20～70岁，年龄（44.42±8.64）岁。标本采集后当天带回检验科及时检测（4 ℃储存，72 h内检测）。

1.2 检测方法

1.2.1 HPV-DNA 分型检测 使用细胞裂解液（分离法）试剂盒分离提取标本总核酸，用ABI2720PCR 仪扩增靶基因片段后，采用医用核酸分子杂交仪HB-2012A 对扩增产物进行反向半点杂交，显色，最后根据显色斑点做结果判断（提取、扩增、杂交试剂及杂交仪均由凯普生物提供）。本方法所检测的HPV 亚型共21 种，包括15 种高危型，分别为16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68 型，以及6种低危型，分别为6、11、42、43、44、81型。

1.2.2 TCT 检测 按照宫颈液基细胞制片检测流程（BD prepstainTMsystem）制成宫颈细胞薄层涂片，巴氏染色后经显微镜下阅片检测［液基细胞制片机，染色试剂均由BD 医疗器械（上海）有限公司提供］。依据贝塞斯达系统（TBS）分类诊断标准，宫颈细胞学诊断报告分为正常（NR）、意义不明的不典型鳞状细胞（ASCUS）、不除外高级别鳞状上皮细胞病变（ASC-H）、低度鳞状上皮内病变（LSIL）、高度鳞状上皮内病变（HSIL）、鳞状细胞癌（SCC）和腺癌。

1.2.3 统计学方法 利用Excel 建立数据库，百分位数采用四舍五入法保留两位小数点。SPSS 20.0进行统计学分析。计数资料用例（%）表示，组间比较使用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 HPV 和TCT 阳性率概况 共检测5 618 例标本，检出HPV 感染570 例（10.15%），其中Hr-HPV 感染426 例，Hr-Lr-HPV（高危合并低危HPV）47 例，Lr-HPV 97 例。在Hr-HPV 感染中，52 型阳性检出率最高（2.81%），其次依次是58、16、53型。在低危型HPV感染中，81型阳性检出率最高（1.03%），如图1 示。检出TCT 异常348 例（6.19%），其中ASCUS 286例，LSIL 61例，HSIL 1例。

图1 570例广州市天河区户籍妇女HPV亚型感染率分布

2.2 HPV 感染与TCT 异常的关系 TCT 异常者中，HPV 感染与未感染占比分别为99.14%和0.86%（P＜0.05）。其 中，Hr-HPV，Hr-Lr-HPV，Lr-HPV 感染率分别 为84.48%、12.93%、1.73%（P＜0.05），如表1 所示。LSIL/HSIL组 中HPV16 或HPV18感染率显著高于ASCUS组（P＜0.05），如表2所示。

表1 广州市天河区户籍妇女TCT异常者中各型别HPV感染情况[例（%）]

表2 广州市天河区户籍妇女TCT异常者中各HPV16、HPV18型感染情况[例（%）]

2.3 Hr-Hr-HPV（高危合并高危HPV）复合型感染检出Hr-HPV 感染共471 例，其中单一型Hr-HPV 感染415 例（88.11%），Hr-Hr-HPV 复合型感染56 例（11.09%）。从TCT 正常组至ASCUS组、LSIL/HSIL组，Hr-Hr-HPV 复合型感染率和总Hr-HPV 感染率均逐渐升高（均P＜0.05），见表3。

表3 广州市天河区户籍妇女各TCT组中单一型Hr-HPV和复合型Hr-HPV感染情况[例（%）]

2.4 年龄组间HPV 感染率分布 40～49 岁组HPV 和Hr-HPV 感染率最低，60 岁以上年龄组感染率最高，整体成“V”字形分布。各年龄组间HPV和Hr-HPV感染率比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。Hr-Hr-HPV 型混合感染率随着年龄增长而呈升高趋势。见表4。

表4 广州市天河区户籍妇女各年龄组间HPV阳性率分布（%）

2.5 年龄组间TCT 细胞学异常率分布随着年龄的增长，ASCUS 和LSIL 阳性率分别呈现降低和升高的趋势，各年龄组间TCT 异常率差异无统计学意义（P＞0.05），见表5。

表5 广州市天河区户籍妇女各年龄组间TCT异常率分布（%）

3 讨 论

已有研究表明，绝大多数宫颈上皮内瘤变与HPV 感染有关，在2 年内HPV 病毒常可由人体自身免疫系统清除［3］。但Hr-HPV的持续感染将会导致宫颈细胞癌变，最终发展为浸润癌及宫颈癌。积极开展HPV 及细胞学筛查有利于患者的早发现、早分流、早治疗。本文数据显示广州市天河区妇女HPV总体感染率为10.15%，其中育龄期妇女Hr-HPV 感染率为8.06%，与广州市白云区、东莞、惠州流动人口育龄妇女数据相近［4-7］。广州市天河区妇女Hr-HPV感染率为8.42%，低于上海闵行区妇女的11.7%［8］。广州市天河区妇女Hr-HPV 感染率最高的为52 型，其后依次是58、16 型。此3 个优势型别构成与东莞、惠州、上海闵行区相同。以上数据提示，广州市天河区妇女HPV 感染率情况与省内外其他地区均较为一致。

不同的HPV 亚型，其致病性和自我清除速度也不同［9］，Hr-HPV 感染致病性更高，其中HPV16 型和18 型感染在宫颈癌患者中更为常见。本文分析结果显示，细胞学病变程度越高，Hr-HPV 感染率越高（P＜0.05）。HPV16 或18 型感染者的TCT 异常率均在92%以上。在HPV16 型阳性样本中，LSIL/HSIL 型异常率达63.04%，为Hr-HPV 亚型中最高，其次是HPV18 型（48.15）。检出的62 例LSIL/HSIL 中，含HPV16 或18 型感染占64.52%（40/62）。表明相对于其他亚型，16型和18型对人体的致病性更高。

在本研究中，单一型HPV 感染率是二重以上型HPV 感染率的7 倍，远高于其他几个地区［8］。刘颂等［10］报道从CINⅠ到CINⅢ，二重以上HPV 感染率依次降低，宫颈癌组则均为单一型HPV 感染。由此可推测单一型HPV 感染在宫颈癌中可能更为常见［11］。但本研究显示，从TCT 正常到ASCUS 到LSIL/HSIL，二重以上型Hr-HPV 混合感染率依次升高（P＜0.05），与Spinillo等［12］研究结果相符。本文TCT异常患者中，单一型Hr-HPV 感染占82.18%，则接近于刘颂等［10］报道的CIN 单一型HPV 感染率的81.4%。但本研究中存在不足之处在于HSIL 异常样本量过少以及缺乏宫颈癌中二重以上Hr-HPV 感染的检测数据。通过上述分析，可推测从宫颈细胞学正常至ASCUS、LSIL，二重以上Hr-HPV感染率逐渐上升，而从LSIL 到HSIL 再到宫颈癌，则呈下降趋势。足量的宫颈癌前病变及宫颈癌样本的检测研究，将有利于二重以上型Hr-HPV 混合感染与宫颈癌变关系的进一步阐明。

本文结果显示，60 岁以上年龄组的HPV 及Hr-HPV 感染率均最高，40～49 岁年龄组最低，总体呈“V”字形分布。随着年龄的增长，Hr-HPV 复合型感染率及LSIL 异常率逐渐升高，与黄艳和郝春佳［13］报道的侯马市农村妇女CIN 检出率的年龄分布特征基本一致。广州市天河区HPV、Hr-HPV 感染率、TCT 异常率在各年龄组间差异均无统计学意义。除了年龄以外，遗传、环境、职业、文化、性生活年限以及微生物共感染等因素也与HPV 感染及宫颈细胞病变有关［14-16］。

有随访数据显示，伴有HPV感染的ASCUS异常，在3年内进展为CIN Ⅰ+者超过47.20%［17］。因而TCT 初筛结果为异常者应积极做进一步的检查，如可行阴道镜检查或活检等。同时，对HPV阳性而TCT正常者应定期进行随访检测，从而达到早发现、早诊断、早治疗的防控目的。