QuEChERS结合液相色谱-串联质谱法快速测定鸡肉中喹诺酮类残留

吕警

摘要：采用QuEChERS方法提取和净化鸡肉样品，建立测定8种兽药残留的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测方法。样品经乙腈和缓冲盐包SBEQ-CA8802-B提取，提取液经净化管净化后取上清液，旋转蒸发仪减压蒸干，溶解过膜，在电喷雾离子源多反应监测（MRM）模式下进行测定，基质外标法定量。结果表明，8种喹诺酮类药物的线性范围为1～100μg/kg，线性相关系数r均大于0.996，定量检出限为0.05～0.10μg/kg，10 ?g/kg添加范圍的平均回收率为89.7%～97.7%，相对标准偏差为3.87%～11.7%。该方法操作简单、净化效果好、灵敏度高，能够快速有效地检测鸡肉中的喹诺酮药物残留。

关键词：鸡肉;喹诺酮残留;液相色谱-串联质谱法;外标法定量

喹诺酮类药物又称吡喹酮酸类化合物，具有良好的抗菌性，适用于家畜养殖行业。调查发现，在日常使用中，一些家畜易出现多种类型的不良反应，最严重的是胃肠道疾病。目前，检测鸡肉中喹诺酮类药物最常见的方式是微生物法、酶联免疫法和放射免疫法，最具有普遍应用价值的是液相色谱法和液相色谱-质谱联用法。本文用QuEChERS结合液相色谱-串联质谱法对鸡肉中喹诺酮类残留的检测工作进行了详细探究，为相关行业人士提供参考。

1. 材料与方法

1.1 试剂与仪器

Milli-Q 高纯水;氧氟沙星;洛美沙星等;液相色谱-质谱联用仪等。

1.2 样品前处理

上述提取液按先后顺序依次加入到净化管中，涡旋混合5min，5000-10000r/min离心5min。取出净化管中所有上清液，40℃减压蒸发至近干。加入1mL甲醇-水溶液（1∶1）溶解，涡旋混合1min，过0.22?m滤膜，供液相色谱-质谱联用仪测定。

1.3 仪器条件

1.3.1 液相色谱条件

沃特世ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1mm×50mm，1.7μm），进样量10μL，柱温35℃，流速为0.3mL/min，流动相A为0.1%甲酸水溶液，B为甲醇。梯度洗脱程序见表1。

1.3.2 质谱条件

ESI离子源;正离子扫描;毛细管电压3.2kV;离子源温度110℃;去溶剂气温度400℃;去溶剂气流量（氮气）650L/h;气帘气流量50L/h;多重反应监测模式扫描（MRM）。

2. 结果与分析

2.1 质谱分析条件的优化

参与本次检测活动的工作人员，前后开展了多次检测流程，期间完全按照行业操作标准实时处理，最终获取了8种喹诺酮类兽药的最优质谱条件。具体见表2。

2.2 基质效应

鸡肉的基质物质较复杂，对其进行质谱研究时，浸提物分组对电喷雾离子化效果和检测信号有增强作用。相关工作人员在确定检测样品时，主要借助阴性部分，结合基质溶液配制标准，妥善做好标准溶液制定工作，减少或消除基质反应。

2.3 线性范围与检出限

由表3可知，在1-100μg/kg浓度范围内，8种喹诺酮药物呈良好的线性关系，相关系数r均大于0.996。以定量离子3倍的信噪比响应值对应的浓度为检出限，10倍的信噪比响应值对应的浓度为定量限。

2.4 回收率与精密度

取鸡肉空白基质配制的10?g/kg的混合标准溶液，重复进样6次，计算回收率和标准相对偏差，结果见表4。8种喹诺酮药物的回收率为89.7%-97.7%，相对标准偏差为3.87%-11.70%。

结论

本文将QuEChERS方法与液相色谱-串联质谱联用法相结合，测定鸡肉中8种喹诺酮药物残留。与其他方法相比，该方法大大缩短了前处理周期，节约了检测成本，而且这种方法操作简便、快速、准确，可有效消除基质中蛋白质的干扰，提高了喹诺酮药物测定的灵敏度、分析效率和确证能力等，不仅为喹诺酮类药物的测定提供了技术支持，也适用于日常样品的检测分析。