铁皮石斛焕肤液的研制

卢诗剑，陈 俊，黄 丹，李金库，刘文婷，黄卫萍

（1.广西农业职业技术学院，广西 南宁 530001；2.广西弄峰山铁皮石斛科技股份有限公司，广西 南宁 530001）

铁皮石斛（Dendrobium candidum）是多年生附生草本植物,属于兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）药用植物[1]。我国的浙江、四川、安徽、贵州、广西、云南等省份有较大面积的种植，东南亚的缅甸、泰国、越南等地也有分布[2]。铁皮石斛中含有石斛多糖、微量元素和生物碱等物质，这一类物质具有广泛的药理活性，如：清除自由基、抗氧化、抗肿瘤和抗衰老等，因此，铁皮石斛成为新药、药妆、保健功能食品的新型功效原料的研究热点，得到广大健康产品研发人员的重视。石斛多糖类物质是铁皮石斛抗氧化的主要活性成分，有学者对铁皮石斛多糖提取物与同等质量的透明质酸钠进行了保湿性能研究，结果表明，铁皮石斛提取物在2～4h 内，能很好地保持皮肤表皮细胞的水分，防止干燥损伤，两者有相当的保湿效果[3]。铁皮石斛保湿、抗氧化的作用得到越来越多的验证，药妆行业对其需求量日益增长。本研究通过低温超微破壁技术提取铁皮石斛多糖，研发铁皮石斛护肤产品，为铁皮石斛的综合开发利用提供新路径。

1 材料与方法

1.1 试验器材

电磁炉、不锈钢锅、剪刀、蒸发皿、1000mL 量筒、低温超微破壁榨汁机、80 目筛、圆锥瓶、天平、德国Corneometer CM825 型皮肤水分测量仪。

1.2 试验药材

质量优良的铁皮石斛，由广西弄峰山铁皮石斛科技股份有限公司提供，经广西农业职业技术学院药学系戴传勇副教授鉴定为兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）的铁皮石斛的茎。

1.3 试验方法

1.3.1 试验方案设计和药材处理方法

试验方案的设计流程为：药材采购→低温超微研磨→胶原蛋白制备→铁皮石斛活力焕肤液的研制。

挑选市场上质量优良的铁皮石斛，洗净，在温水中“淬”2～3min，取出切成1.0～2.0 cm 的小段，后置纯净水中冷却后备用。

1.3.2 试验步骤

铁皮石斛提取液制备：将铁皮石斛洗净，在沸水中煮1 min，取出后静置冷却，切成0.5～2.0 cm 的小段备用，将切小段后的150g 铁皮石斛与1500mL 纯净水置于榨汁机中（水料液比为1∶10），启动榨汁机，得到铁皮石斛研磨粗液[4]。过40 目药筛，用电磁炉煮沸，清除表面浮起的叶绿素，清除干净后，置冰箱0～5℃冷藏过夜。取上清液，装干净玻璃瓶备用。

胶原蛋白制备：称取明胶100g，加纯净水500mL 浸泡10min，然后水浴加热，不断搅拌溶化成液体。明胶液移出水浴待降温至50°C 时，加入蛋白酶粉3g，搅拌均匀，然后水浴保温50～55°C 水解4h，不断搅拌；水解4h 后，将水浴温度升至85°C、30min 灭酶；灭酶后加热至100°C 灭菌，装干净玻璃瓶备用。

将上述石斛提取液、胶原蛋白液、茉莉花精油和甘油葡糖苷按比例优选最佳原料配方比，选取最佳配方。

1.4 最佳原料配比考察

将石斛提取液、胶原蛋白、茉莉花精油和甘油葡糖苷按照表1 配比，混合加热至85 ℃，维持30min 灭菌，让基料自然冷却到50℃时，将上述铁皮石斛研磨上清液加到圆锥瓶的基料中，沿同一个方向不断震荡25 min，混合均匀，得铁皮石斛活力焕肤液，考察其性状与细腻度、保湿性和刺激性，实验确定最佳配比。

表1 铁皮石斛活力焕肤液配方（单位：mL）

1.4.1 细腻度与性状

称取上述铁皮石斛活力焕肤液样品15g，置于干净玻璃板上，观察其外观性状。称取1.0g 的活力焕肤液样品，随机请10 名女性（年龄18～25 岁），将其均匀涂抹在受试者手臂内侧，用手、鼻、眼等感官指标评价其细腻度[5]，综合评价见表2。

表2 不同配比铁皮石斛焕肤液形状与细腻度评价表

根据以上试验结果，综合考虑铁皮石斛活力焕肤液性状、细腻程度、效果，确定配方3 综合评价更突出。

1.4.2 保湿性实验

将实验中温度控制在25±1℃，用5cm×5cm 的医用透气胶带模拟人体皮肤，称取0.5g 铁皮石斛活力焕肤液样品，均匀涂布于模拟胶带表面，将其置于含有变色硅胶（RH=50%）的干燥器中，称取12h 后的重量，并计算其保湿率[6]。

（1）式中:G1为放置前样品的质量，g；G2为放置12 h 后样品的质量，g。

3 个配方样品放置12 h 后，保湿率测试结果为（配方1～3）：31.9%，32.6%，33.1%；RSD 为1.02%，1.21%，0.56%。数据表明配方3 保湿率最高、配方1 相对较弱。

1.4.3 刺激性实验

选择40 名志愿者（要求：年龄在18～22 岁、男女各半、皮肤健康），将志愿者的左手手背，均匀涂抹适量铁皮石斛活力焕肤液样品作为实验观察，右手手背不涂抹作为对照观察，保持15min 后，用温清水洗去，对3 种不同配方铁皮石斛活力焕肤液进行涂抹试用，观察涂抹手背皮肤的变化现象，连续进行7d 实验测试。经过上述实验，志愿者反馈3 种不同配方的铁皮石斛活力焕肤液，均未出现明显的过敏、皮肤红肿、瘙痒等不良刺激现象。

2 结果与分析

2.1 确定制法及配比

根据上述研究实验，铁皮石斛活力焕肤液的工艺为：铁皮石斛净制、切段，1∶10 料液比低温研磨提取并除去叶绿素，60 目筛网滤过，与制备好的胶原蛋白液、甘油葡糖苷按10∶3∶2 的比例混合后，再加入4.67%比例的茉莉花精油即得。

2.2 配方的保湿性能验证

按照配方3，制作好铁皮石斛活力焕肤液样品，对照样品选取市场认可度较高的同类保湿品种百雀羚水润深层保湿乳，批号：20200916，规格：100mL，按照自愿原则选取10 名年龄在18～22 岁的女性志愿者，采用随机、单盲分为实验组和对照组，实验组使用样品涂抹两侧脸颊，对照组则使用百雀羚水润深层保湿乳涂抹两侧脸颊，受试期间不得使用其他护肤产品，早晨洁面后使用一次，晚上临睡前使用1 次，15d 为一个周期。在使用前、使用后第5d、第10d 和第15d 分别进行检测志愿受试者皮肤角质层水分含量。皮肤角质层的含水量（MMV）能反映出皮肤的干燥程度，从而体现产品的保湿功效。测试前受试者需要在恒温恒湿24±2℃、相对湿度50%±5%环境下静坐15 min，按要求洁面并暴露测试部位。启动CM825 型测量仪皮肤水分测试探头测定实验组、对照组受试部位的MMV，5 次平衡测试取平均值，结果以MMV 表示[6]。通过测定实验组、对照组受试者两颊在使用样品前和使用不同时间后MMV 值，用公式（2）计算样品MMV 变化率，从而检验产品的保湿性能。使用软件SPSS 19.0 处理数据，进行t 检验。

图1 为根据上述实验测得实验组、对照组受试者在使用样品不同时间后皮肤含水量变化率。由图1 可知，实验组使用铁皮石斛活力焕肤液样品后皮肤含水量变化率随着使用时间逐渐增大，随使用时间增加显著提高，而对照组使用百雀羚后皮肤含水量变化率随时间变化不大，两者变化率对比具有显著差异（P＜0.05），说明铁皮石斛焕肤液可显著增加皮肤表皮的水合作用，具有即时和延期保湿效果。

图1 铁皮石斛焕肤液与百雀羚水润深层保湿乳皮肤含水变化率

3 讨论

通过文献检索确定铁皮石斛的成分，主要含石斛多糖，以低温超微研磨提取工艺进行提取，最大程度保证多糖的活性，减少由于传统长时间加热提取所造成的有效成分灭失的可能，最大限度保持铁皮石斛多糖原液的活性，再加入皮肤所必需的胶原蛋白液，起到补充水分、修复皮肤基底和充盈皮肤间隙的作用，再加入天然萃取的道地茉莉花精油，在天然芬芳、舒缓肌肤的同时，缓解身体的紧张情绪，起到内外兼修、综合调养肌肤的作用，再辅以甘油葡糖苷作为保湿剂，深度锁住水分，保持肌肤滋养、保证肌肤一整天的活力焕发。

对确定的配方工艺制成的铁皮石斛焕肤液进行保湿性能评价，结果证明制成的铁皮石斛焕肤液符合《化妆品注册和备案检验工作规范》的要求，使用后，皮肤无不良刺激、过敏、红肿等情况。

4 结语

本实验采用低温超微破壁技术提取铁皮石斛多糖作为主要原料，加入产地萃取的广西横县茉莉花精油，研制出来的铁皮石斛焕肤液具有较好的保湿、护肤、滋养的效果，同时安全，无不良刺激、过敏等现象，符合国家化妆品的相关要求，这将为铁皮石斛、茉莉花综合开发利用提供新思路、新路径。