孕妇血浆PEDF和妊娠期高血压的关系

尹萍,陈妍,宋宛莹,赵燕珍

(广州医科大学附属第三医院检验科，广东 广州 510150)

妊娠期高血压是妊娠引起的一般在孕20周之后才出现的新发高血压患者，是新生儿和产妇致死的重要原因[1]。根据有无蛋白尿、病理性水肿和惊厥分为一过性高血压、子痫前期和子痫期。发病率约为5-10%。约有一半的妊娠期高血压患者最终会发展为子痫前期[2]。子痫前期是以高血压和蛋白尿为特点的涉及多个器官的疾病进程，当出现高血压并且伴有以下特征时即可诊断：血小板减少、肾功能不全、肝功受损、肺水肿或脑部及视力障碍。慢性高血压、孕前糖尿病、高龄初产、肥胖和抽烟是其发病的危险因素，但是其具体发病机制尚不清楚[3]。

研究报道胎盘组织中血管新生促进因子和抑制因子的失衡在子痫前期的发生和发展中发挥重要作用：血管新生抑制因子和促进因子的失衡引起内皮细胞功能障碍，导致血管渗透性增强、血管收缩、凝血过程启动以及溶血发生[4]。色素上皮衍生因子(Pigment epithelium-derived factor，PEDF)是一种具有多种生物功能的重要的血管新生抑制因子[5]，在多种器官和组织中均有表达，其在生殖系统中的表达主要受雌激素、孕激素、HCG等激素的调控[6,7]。在妊娠过程中也能够发挥拮抗内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的促血管新生作用。关于VEGF在妊娠期高血压中的变化情况已经有相关研究，但是PEDF在PIH病人血浆中的表达规律尚未见文献报道[8]。因此，本文旨在检测妊娠期高血压患者外周血血浆PEDF含量，探索PEDF水平与妊娠期高血压严重程度之间的关系。

1 材料与方法

1.1 标本收集

在产妇知情同意的前提下，收集在广州医科大学附属第三医院进行产检的临床诊断为妊娠期高血压以及慢性高血压合并妊娠的妇女70例为实验组，随机收取同期产检的正常妊娠妇女41例为对照组，产妇基本信息及产检相关数据由LIS系统收集，并分别取EDTA-2K抗凝的血浆1 mL，3 000 rpm/min离心5 min，分装后立即保存到-20 ℃冰箱。

1.2 ELISA

检测血浆PEDF含量的ELISA试剂盒购自美国R&D公司(DY1177-05)，按照试剂盒说明书进行检测，操作步骤简要如下：空白酶标板中加入包被抗体100 μL/孔，室温过夜；洗板后加入Reagent Diluent 300 ul/孔室温封闭2 h；洗板后加入稀释后的标本及标准品100 μL/孔，室温孵育2 h；洗板后加入检测抗体100 μL/孔，室温孵育2 h；洗板后加入亲和素链接的HRP100 μL/孔，室温孵育20 min；然后加入底物反应，根据反应颜色决定终止时间。酶联免疫分析仪检测酶标板在波长为450 nm和540 nm处的吸光度值。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 研究对象基本信息及PEDF水平

从表1可见，重度子痫前期组及慢性高血压合并子痫前期组妊娠妇女平均年龄较其他三组更大，各组之间孕周不存在显著差异。但是，与正常对照相比，妊娠期高血压组、子痫前期组、重度子痫前期及慢性高血压合并子痫前期组孕妇PEDF水平均明显升高，差异均有统计学意义，P值分别为0.004，<0.001，0.002和<0.001(图1)。与妊娠期高血压组相比，子痫前期组、重度子痫前期及慢性高血压合并子痫前期组孕妇PEDF水平进一步升高，P值分别为0.027，0.057和<0.001(图1)。因此，妊娠期高血压以及高血压合并妊娠孕妇血浆PEDF水平均比正常妊娠孕妇明显升高，且血浆PEDF含量是随着妊娠高血压疾病的严重程度而逐渐升高的。

表1 研究对象基本信息及PEDF水平

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3 讨 论

本研究通过检测广州医科大学附属第三医院(重症孕产妇救治中心)产检的妊娠相关高血压疾病孕妇血浆的PEDF水平，揭示其在PIH及高血压合并妊娠孕妇中的表达规律。结果显示，与健康产检孕妇相比，PEDF在妊娠期高血压及高血压合并妊娠孕妇中均显著升高，且随着妊娠期高血压疾病严重程度增加而增加。

随着普通人群代谢性疾病发病率的升高，以及生育年龄的普遍推迟，妊娠这一特殊生理时期代谢性疾病的发生率也逐渐增加，比如糖尿病、高血压和高脂血症。高龄初产、双胞以及多胞胎和体外受精均是妊娠期高血压发生的危险因素[9-10]。妊娠相关高血压疾病包括慢性高血压合并妊娠以及妊娠中晚期才出现的妊娠期高血压，严重危害产妇和胎儿的身体健康，关于其发生机制的探索一直都在进行。子痫在胎儿娩出而胎盘仍在的情况下发生，但胎盘一旦娩出，子痫相关症状迅速消失，因为这一现象，学者们推测胎盘在PIH的发生发展中发挥着重要的作用[11]。其中，有一种理论认为母体、胎儿或者胎盘的相关因素诱导胎盘脉管系统发育不良，导致胎盘灌注不佳，促进了血管新生抑制因子的合成和释放，打破其与血管新生促进因子之间的平衡，引起母体内皮功能障碍进而诱导了高血压的发生[12]。已经有研究表明妊娠期高血压孕妇胎盘中VEGF含量明显减低，PEDF作为最主要拮抗VEGF促进血管新生作用的血管新生抑制因子，本研究结果表明妊娠期高血压患者血浆PEDF含量较正常孕妇是明显升高的，且在发生子痫前期以及重度子痫前期的孕妇中升高的水平更明显。

PEDF是受激素水平控制的全身多器官表达和分泌的重要生物大分子，在多种代谢性疾病包括高血压、糖尿病以及高脂血症中明显升高[13,14]。之前有研究报道循环PEDF在妊娠期糖尿病中是显著升高的，并且能够预测妊娠期糖尿病孕妇产后发展为2型糖尿病的风险[15]。本文揭示了在PIH及高血压合并妊娠孕妇血浆中PEDF的含量也是明显升高的。但是升高的PEDF具体在妊娠相关高血压疾病中发挥什么样的作用以及发挥作用的可能机制需要进一步探讨。既然有研究认为胎盘被认为是循环中升高的血管新生抑制因子重要来源，那么本研究中妊娠相关高血压疾病孕妇血浆中明显升高的PEDF也有可能来自胎盘组织，但是需要进一步设计相关实验进行验证。