手足口病合并肺炎支原体感染患儿实验室指标检测的临床意义

胡妞

手足口病（hand-foot-and-mouth disease，HFMD）是由肠道病毒[以柯萨奇病毒A16（coxsachie virus 16，CA16）型和肠道病毒71（enterovirus 71，EV71）型为主]感染引起的急性传染病，好发于5岁以下儿童，其中3岁以下的婴幼儿的发病率最高，呈急性起病，是儿科常见病[1-2]。抗病毒治疗是临床上治疗HFMD的一种常用方法，然后HFMD并非仅由肠道病毒感染引起，还可能合并其他病原微生物，其中以合并肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，MP）感染最为常见[3]。在HFMD患儿的临床治疗中，若患儿合并MP感染而临床上仅给予单纯抗病毒治疗，则很难获得理想的临床效果。因此，早期明确是否合并其他病原微生物感染对HFMD患儿的临床治疗至关重要。本课题组经文献检索分析发现，目前关于HFMD患儿合并MP感染的相关研究较罕见[4-5]。本文通过分析EV71和CA16阳性表达率、血压、心率、空腹血糖（fasting blood-glucose，FBG）、白细胞（white blood cell，WBC）计数及心肌酶谱等实验室指标检测对HFMD合并MP感染患儿诊疗的临床意义，以期为临床提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年12月-2019年11月本院诊治的HFMD合并MP感染的患儿158例为研究对象。纳入标准：（1）符合文献[6]诊断标准；（2）血清中特异性抗体MP-IgM定性检测呈阳性；（3）年龄5个月～7岁，一般资料完整；（4）患儿父母或主要监护人配合检测所需标本采集。排除标准：（1）合并先天性心脏病、肝疾病、肾疾病、肺疾病及脑病；（2）本研究中观察项目未全部完成；（3）存在标本采集时间不当可能影响检测结果。根据患儿病情严重程度分组，并发脑炎、脑膜炎、脑脊髓炎、肺水肿、循环衰竭等其中之一或多种为重症组（65例），其余为轻症组（93例）。重症组男37例，女28例；年龄6个月～7岁，平均（4.13±1.23）岁；病程1～5 d，平均（3.35±1.18）d。轻症组男53例，女40例；年龄5个月～7岁，平均（4.06±1.35）岁；病程1～6 d，平均（3.18±1.05）d。两组性别、年龄、病程等一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），有可比性。本研究获得医院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 EV71及CA16检测 采用荧光定量RT-PCR法检测EV71和CA16。均于患者入院时取咽拭子和疱疹液保存于-20 ℃待测；仪器使用瑞士罗氏LC-480实时荧光PCR仪器，试剂盒采用通用型EV71、CA16核酸检测试剂盒，根据试剂盒说明方法进行质控品和标本的核糖核酸（ribonucleic acid，RNA）提取，RNA提取后通常直接检测，若延时检测则保存于-70 ℃待测；将已提取RNA分别加入EV71、CA16的检测试剂的反应液中，然后将反应管放入PCR仪中；RT-PCR反应条件设置：40 ℃ 25 min，1个循环；94 ℃3 min，1个循环；93 ℃ 15 s→55 ℃ 45 s，40个循环。结果判断：反应结束后根据RT-PCR扩增图像分析调节Baseline的Start值、End值和Threshold值，通过仪器系统分析得出结果，在阳性和阴性质控品同时满足质量控制的条件下，受检样品呈典型S型扩增曲线且CT值≤35.1时判断EV71阳性、CT值≤34.8时判断CA16阳性[7]。

1.2.2 常规实验室指标检测 患儿确诊后常规监测血压（包括收缩压和舒张压）、心率（连续监测1 d，每2 h记录一次，取平均值）；FBG：清晨空腹采集患儿无名指血2 ml，采用葡萄糖氧化酶法检测，日立7180全自动生化分析仪进行分析；WBC计数：采用显微镜计数法检测，具体操作步骤概述为：采用稀乙酸将血液稀释并破坏红细胞，混匀后取0.3 ml的白细胞稀释液于试管中，然后用微量吸管吸取20 μl末梢血，擦去微量管外余血厚插入稀释液底部，轻轻将血放出并吸取上清液洗涤微量吸管2～3次，混匀后取混匀的细胞悬浮液1滴，充入计数池与盖片缝隙中，静置2 min使WBC下沉，然后在低倍镜下观察并计数，然后计算每升血液中白细胞总数。

1.2.3 心肌酶谱检测 患儿于就诊当日或次日清晨空腹抽取静脉血3 ml，常规分离血清后留取血清保存于-20 ℃冰箱，采用日立7180全自动生化分析仪检测血清心肌酶谱水平，心肌酶谱类测定系列试剂盒由上海易博生物技术有限公司提供，操作严格按照试剂盒说明及提供的资料进行；心肌酶谱构成包括：门冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase，AST）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme，CKMB）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、 乳 酸 脱 氢 酶 同 工 酶 1（lactate dehydrogenase 1，LDH-1）。

1.3 观察指标

采用单盲法（观察者不知道对象所属组别）观察记录各检测指标，EV71阳性率、CA16阳性率、心率、舒张压、收缩压、FBG、WBC计数、AST、CK、CK-MB、LDH、LDH-1重症组与轻症组进行比较。

1.4 统计学处理

本研究数据采用SPSS 17.0统计学软件进行分析和处理，计量资料以（±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组EV71及CA16阳性率比较

重症组EV71阳性率高于轻症组，差异有统计学意义（P＜0.01）；两组CA16阳性率比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表 1。

表1 两组EV71及CA16阳性率比较 例（%）

2.2 两组常规实验室指标比较

重症组舒张压、收缩压、心率、WBC计数、FBG等水平均高于轻症组，差异有统计学意义（P＜0.01），见表2。

表2 两组常规实验室指标比较 （±s）

表2 两组常规实验室指标比较 （±s）

组别 收缩压（mm Hg） 舒张压（mm Hg） 心率（次/min） WBC计数（×109/L） FBG（mmol/L）重症组（n=65） 94.75±6.23 65.18±7.43 145.39±11.28 13.73±4.16 7.23±1.85轻症组（n=93） 86.25±5.74 56.64±5.16 120.17±10.63 10.09±2.54 4.74±1.06 t值 4.528 4.962 5.139 3.716 5.314 P值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 两组心肌酶谱水平比较

重症组心肌酶指标（AST、CK、CK-MB、LDH及LDH-1）水平高于轻症组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 两组心肌酶谱水平比较 [U/L，（±s）]

表3 两组心肌酶谱水平比较 [U/L，（±s）]

组别 AST CK CK-MB LDH LDH-1重症组（n=65） 56.73±7.68 151.94±16.81 64.34±11.17 503.56±112.78 106.72±43.87轻症组（n=93） 46.17±6.49 125.76±23.47 49.65±7.38 437.89±92.74 89.76±33.75 t值 3.175 3.205 2.674 4.471 3.865 P值 0.000 0.000 0.006 0.000 0.000

3 讨论

HFMD是由肠道病毒（enterovirus，EV）引起的一种常见的全球性传染病，近年来我国HFMD发病率呈逐步增长的趋势，该病好发于5岁以下婴幼儿，以3岁以下儿童发病率最高。据相关调查显示：仅2014年7月我国HFMD病例已超过30万，死亡73例，发病占丙类传染病的70%左右，死亡病例占丙类传染病的90%左右[8-9]。可见HFMD是一种严重影响儿童健康并威胁其生命安全的疾病，应引起高度重视。EV71及CA16感染是引起HFMD最主要的两种病毒，且由这两种类型病毒引起的HFMD对机体的损伤更大、并发症更多。总结多年的临床经验并结合文献[10]发现，多数HFMD患儿在EV感染的同时，还合并其他病原微生物感染，以合并MP感染最为常见。对于HFMD合并MP感染的患儿，如果临床上仅针对EV感染进行治疗，不仅影响临床疗效，还可能造成严重不良后果。基于此，本文探讨HFMD合并MP感染的患儿实验室检测指标对该病诊疗的临床意义，旨在为提高该病的临床治疗水平提供参考经验。

本研究显示，重症组与轻症组CA16阳性率比较差异无统计学意义（P＞0.05），提示CA16检测对HFMD合并MP感染患儿病情评估不具有明显的参考价值。重症组EV71阳性率高于轻症组，差异有统计学意义（P＜0.05），这提示：EV71阳性率与HFMD合并MP感染患儿病情又密切的关系，早期检测EV71对评估病情严重程度有一定的指导意义，可将EV71作为临床治疗方法制定的参考指标。有文献[11]报道亦显示：重症HFMD患儿EV71阳性率明显高于轻症者，本研究与其基本一致。

血压、心率、WBC及血糖水平检测是实验室检测的常规指标，血压、心率及血糖监测可有效评估患者的身体基本状况。而WBC被称为人体与疾病斗争的卫士，当机体遭受病菌侵入时，WBC能穿过毛细血管壁集中到病菌入侵部位，一旦机体内WBC数偏高，说明很可能是身体有了炎症。本研究显示：重症组血压、心率、WBC计数、FBG等水平均高于轻症组，差异均有统计学意义（P＜0.05），这说明，较轻症患儿而言，病情较重的HFMD合并MP感染患儿，其血压、心率、WBC及FBG水平均有一定程度升高，早期血压、心率、WBC及血糖水平检测可作为HFMD合并MP感染患儿早期病情评估的参考指标，可为临床治疗提供丰富的信息。有文献[12]报道显示：重症HFMD合并MP感染患儿WBC血压、心率、WBC及血糖水平明显高于轻症患儿，本研究与其具有一致性。

心肌酶谱主要由AST、CK-MB、CK、LDH及LDH-1构成，其活性与心脏损伤有密切的关系，通过检测心肌酶谱法发现机体的心肌损伤情况。CK-MB被认为是心肌特异性同工酶，主要存在于心肌细胞，正常血液中含量极少，但心肌损伤后CK-MB释放进入血液引起血液中CK-MB水平升高（CK-MB的生物半衰期较短，水平下降较快，需掌握好监测时机）；AST、LDH、CK存在于机体多种组织细胞，较其他心肌酶指标而言其特异性偏低，但其半衰期较长。本研究显示：重症组AST、CK-MB、CK、LDH及LDH-1水平均高于轻症组，差异有统计学意义（P＜0.05）。这提示：重症HFMD合并MP感染患儿心肌损伤情况重于轻症患儿，通过检测AST、CK-MB、CK、LDH及LDH-1水平可有效评估HFMD合并MP感染患儿心肌损伤程度，为临床治疗提供依据。文献[13]的报告显示重症HFMD合并MP感染患儿与轻症患儿心肌酶谱水平比较差异无统计学意义（P＞0.05），与本研究不一致，其原因可能是因为患儿病情严重程度差异造成的，心肌酶谱水平与HFMD患儿病情严重程度有关。

本研究结果提示：HFMD合并MP感染患儿实验室检测指标对病情判断具有重要意义，然而却未对各检测指标对判断病情严重程度的临界值进行深入探讨，还有待于进一步开展专题研究。另外，HFMD合并MP感染患儿，随着其病情的加重，血压、心率、WBC、血糖水平及心肌酶谱活性增加，但其机制尚待更多的体外试验进行证实。

综上所述，血压、心率、WBC、血糖及心肌酶谱等实验室检测指标对HFMD合并MP感染患儿病情评估具有重要价值，可为该病的临床治疗提供依据。