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2020年新疆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测与分析

2021-07-21王紫阳屈勇刚孙琼飞党瑞莹周海琴张小玉张家瑞常军帅

中国猪业 2021年3期
关键词:猪群后备阳性率

王紫阳 屈勇刚* 孙琼飞 党瑞莹 周海琴 张小玉 张家瑞 常军帅 李 岩

(1石河子大学动物科技学院,新疆石河子 832003;2新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站,新疆乌鲁木齐 830063)

猪繁殖与呼吸障碍综合征(Porcine Reporductive and Respiratory Syndrome,PRRS),俗称蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)引起的高度接触性传染病,主要表现为以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸系统疾病为主要特征的病毒性疾病[1]。PRRS被世界动物卫生组织(OIE)列为必报传染病,我国将其列为二类动物传染病,在2008年我国规定其为强制免疫病种[3]。此病1987年在美国的中西部首次被发现,随后在加拿大、德国、法国、荷兰等国家相继出现,此后该病在世界各国相继发生和流行,给养猪企业造成了严重的经济损失。1996年猪繁殖与呼吸障碍综合征在我国大陆地区的猪场发生并趋于流行,2006年该病毒出现变异,引起成年猪出现发热、呼吸障碍以及大量急性死亡,被称为“高致病性蓝耳病”[2]。目前,我国所有猪群几乎存在此病,是威胁养猪业健康发展的最严重的疫病之一。此病没有非常有效的治疗方法,猪群免疫效果的评价以及补免工作的开展在PRRS防控中起到了积极的作用[4,5]。

为进一步了解新疆部分地区PRRS的免疫抗体水平,本试验从新疆6个地区(石河子、奎屯、阿克苏、巴州、塔城、伊宁)的10个规模化猪场采集血液样品1 218份。用猪繁殖与呼吸障碍综合征ELISA抗体检测试剂盒对血清样品进行抗体检测和结果分析,以期为猪场的免疫效果提供参考,为后续制定或调整免疫程序提供可靠依据。

1 材料与方法

1.1 样品来源

2020年1月至12月期间从新疆6个地区(石河子、奎屯、阿克苏、巴州、塔城、伊宁)的10个规模化猪场采集血液样品1 218份。其中包括不同类型的猪群(保育猪139份、哺乳仔猪165份、育肥猪161份、后备猪223份、种公猪200份、繁殖母猪330份)。

1.2 材料与仪器

PRRSV的ELISA试剂盒(北京爱德士元亨生物科技有限公司),自动酶标仪(美国BioTek公司生产),一次性5 mL兽用采血针(武汉民生医用器械有限公司生产),微量移液器(Eppendorf)。

1.3 方法

1.3.1 血液样品的处理

用一次性兽用采血器从待检猪只的前腔静脉一次性采血(3~5 mL/头),在室温下静置待血清析出,将析出的血清收集于EP管内放在4℃冰箱,作为待检血清。

1.3.2 间接ELISA检测法

试验严格按照PRRSV的抗体检测试剂盒说明书进行操作,使用前将所有试剂恢复至18~26℃。使用前先将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水10倍稀释,用样品稀释液40倍稀释待检样品。取出抗原包被板,将100 μL没有稀释的阴性对照和阳性对照加入孔内,各加2孔。在相应的孔中加入100 μL已稀释好的样品,于18~26℃条件下孵育30 min。用洗涤液洗涤3~5次后,每孔加入100 μL酶标抗体,在18~26℃条件下再次孵育30 min,洗涤3~5次,拍干各孔内残留的洗涤液。每孔加入100 μL TMB底物液,孵育15 min,每孔加入100 μL终止液,终止反应,置于酶标仪中,测定OD650nm值,记录并保存数据。

1.3.3 结果判定

本试验成立必须满足2个阳性对照的平均OD650nm值与2个阴性对照的平均OD650nm值的差≥0.150,且阴性对照的平均 OD650nm值≤0.150。S/P≥0.40为阳性,S/P<0.40为阴性。(其中S=样品OD650nm值-阴性对照OD650nm平均值;P=阳性对照OD650nm-阴性对照OD650nm平均值)。

1.3.4 统计分析试验结果

使用SPSS软件对试验结果进行统计分析,计算PRRSV抗体的S/P平均值、阳性率、阴性率、标准差以及各类别猪群抗体的离散度(离散度用变异系数表示,变异系数=(标准差÷S/P平均值)×100%)[6]。

2 结果

2.1 各猪场PRRSV抗体检测结果

由表1可知,10个规模化养殖场(用A~J表示)的1 218份血液样品中,有956份血清呈PRRSV抗体阳性,平均阳性率为78.49%,S/P的平均值是(1.22±0.84),变异系数为69.45%。除C场以外,其余9个猪场抗体阳性率均高于70.00%,其中G场的抗体阳性率最高,达到了95.38%。在A~J猪场中,变异系数最高的C场达到了134.85%,最低的是I场,其变异系数为47.36%。A场与B、C、D、F、G、H、I、J场,存在显著差异(P<0.05),B场与D、F2个场差异不显著(P>0.05)。

表1 新疆地区10个规模化养猪场PRRSV抗体检测结果

2.2 不同类别猪群PRRSV抗体检测结果

对不同类别猪群PRRSV抗体检测结果统计发现:哺乳仔猪、保育猪、育肥猪、后备猪、种公猪、繁殖母猪的抗体阳性率分别为72.73%、87.77%、78.88%、59.19%、91.50%、80.61%。除后备猪外,其余类别猪群抗体阳性率均达到70.00%以上,其中种公猪的抗体阳性率最高,其次是保育猪群,抗体阳性率最低的为后备猪群,仅有59.19%。不同类别猪群之间PRRSV平均抗体水平存在一定差异,种公猪与哺乳仔猪、保育猪、育肥猪、后备猪、繁殖母猪之间存在显著差异(P<0.05),保育猪、育肥猪和繁殖母猪之间差异不显著(P>0.05) (表 2)。

3 结果与讨论

3.1 各猪场PRRSV免疫效果评价

通过对新疆地区10个规模化养殖场1 218份血清样品进行猪繁殖与呼吸障碍综合征ELISA检测得知,有956份血清样品检测呈阳性,平均抗体阳性率为78.94%,高于国家规定的70%抗体水平标准[7]。其中G场和H场抗体合格率达90%以上,达到了规模化养殖场控制PRRS疫情的水平[8]。与2019年常军帅等[6]检测到新疆部分地区猪场PRRSV平均抗体阳性率92.82%相比,2020年抗体阳性率出现下降。C场猪群的抗体检测阳性率仅为31.30%,未能达到国家规定的免疫标准。以上结果都应该引起猪场管理人员的重视,及时对阴性猪只进行疫苗补免,1月后再次采血检测抗体,若仍为阴性,则进行淘汰,以免造成更大的损失[9]。同时,应根据抗体检测结果对猪群已有的免疫程序进行优化,及时找出抗体阳性率不高的内在原因,如果是疫苗问题,应严格对猪场疫苗进行把关,掌握正确的疫苗储存方式,对疫苗的注射剂量进行严格的把控,对参与免疫操作的相关人员进行培训,找出原因及时解决。以保障猪群的健康发展,获得更大的养殖效益。

3.2 不同类别猪群PRRSV免疫抗体的差异

通过对不同类别猪群PRRSV抗体检测结果分析得知,各类别猪群的抗体水平存在一定差异。种公猪的抗体阳性率最高,高达91.50%;后备猪群的抗体阳性率最低,接近于59.19%,后备猪群作为养殖场未来的繁育母猪,做好疫苗免疫以及抗体水平的监测至关重要,后备猪群的优劣,直接关系到猪群的繁育效果,只有养出健康的后备猪,才能繁育出健康的仔猪[10]。对不同类别猪群的变异系数观察得知,其变异系数均高于国家农业农村部关于阳性抗体变异系数小于40%之规定[7],说明这些类别的猪群PRRSV免疫抗体水平整齐度不高,需对免疫程序进行优化,为猪群的健康打下坚实的基础。

北部区8省 (区、市)印发分区防控实施方案

据哈尔滨新闻网2021年6月5日报道,辽宁、北京、天津、河北、山西、内蒙古、吉林、黑龙江8省(区、市)联合印发了《北部区非洲猪瘟等重大动物疫病分区防控实施方案(试行)》 (以下简称《方案》),北部区8省(区、市)分区防控框架合作协议同时生效。经协商,辽宁省为北部区首轮牵头省份。根据《方案》规定,北部区将建立分区防控联席会议制度,统筹推进北部区非洲猪瘟等重大动物疫病分区防控工作。联席会议由北部区8省(区、市)政府分管负责同志作为成员,牵头省份政府分管负责同志担任召集人。分区防控联席会议办公室设在轮值省份农业农村(畜牧兽医)部门,该部门主要负责同志为主任,成员由大区内各省级农业农村(畜牧兽医)部门分管负责同志等组成。

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