甲状腺病变的液基细胞学诊断病理分析

田晓琴，林艳丽，张睿，王丽婷，徐显辉，邱威明，马多，林鹭平

1.厦门市医学院附属第二医院病理科，福建厦门 361021；2.厦门市医学院附属第二医院内分泌科，福建厦门 361021；3.厦门市医学院附属第二医院超声影像科，福建厦门 361021

甲状腺病变在临床非常见，主要高发群体为成年人，具有较高发病率，且大部分会形成恶性结节，因此早发现、早治疗非常关键。随着高分辨率超声技术的进展，以及甲状腺体检的普及，临床对甲状腺结节的检出率逐年上升，但是恶性阳性率的检出率却十分低下[1]。临床对于对甲状腺结节良、恶性的判断一直非常重视，对该病症的诊断方式有很多种，但如何提升诊断准确性一直是临床面对的难题，其中临床认为最安全、便捷的诊断方式为细针吸取细胞学检查，该诊断方式能够避免患者进行不必要的手术，减少患者痛苦，具有创伤小、敏感性高、准确性高的特征。甲状腺病变的恶性阳性率诊断是按照组织细胞的恶性形态进行病理诊断得出，因此对甲状腺细针穿刺制片质量的提升非常必要，其直接关系到诊断准确率[2]。该文采用该院于2018年2月—2019年3月这一时间段内接收的甲状腺病变患者共计100例作为研究对象，针对液基细胞学对甲状腺病变病理诊断的作用进行分析，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

随机选取该院接收的甲状腺病变患者100例作为研究对象，所有患者均进行细针穿刺细胞学诊断。100例患者中，男52例，女48例；年龄最小者12岁，最大者78岁，平均(41.12±2.93)岁；病程5 d~31年，平均（17.27±1.98）年；全部患者的甲状腺区域都存在体积各异的结节，少量患者可触及肿大淋巴结，肿物直径为0.6~11.9 cm；甲状腺左叶肿块35例，甲状腺右叶肿块30例，甲状腺双叶和峡部肿块35例。患者在穿刺检查后1个月内全部进行组织学切片检查。纳入标准：所有患者均持有临床医生开具的穿刺细胞学检查申请单和临床资料；患者的甲状腺肿块抽吸物具备进行传统制片以及液基细胞制片的条件；患者的经济能力可以接受液基细胞学检查费用；该实验经过医学伦理委员会批准；全部患者自愿接受该实验，并签署同意协议书。排除标准：不愿意接受该研究的患者；存在重大疾病史的患者；存在其余恶性肿瘤疾病的患者。

1.2 方法

患者保持居中坐位或仰卧位，颈部微微向后倾斜，完全展露甲状腺，对患者进行问诊、触诊后，选取穿刺位置。首先进行局部消毒处理后，将穿刺位置进行固定，将5~20 mL一次性注射器连接22G针头，之后进行穿刺，穿刺方式可通过超声引导进行，也可以盲穿方式进行。

超声引导下细针抽吸细胞学检查方法：以甲状腺检查条件为准，对超声诊断仪、高频线阵探头参数进行设定，横切和纵切对甲状腺和颈部淋巴结进行全面检查，并将结节指标和血流情况进行记录，对可疑病灶进行穿刺，按照病灶情况调整深度、增益和聚焦位置，保持图像清晰，穿刺位置以微小钙化、囊实性结节实性处或囊壁为准，在超声引导下对穿刺方向和角度进行监视。对患者进行局麻操作，刺入甲状腺内或甲状腺结节内持续性负压穿刺，反复进退针20次后，将组织吸取出进行涂片操作[3]。

涂片分两种方式，一种是传统涂片，涂片2~7张，用乙醇进行湿片固定；另一种是液基细胞学制片，再次穿刺后进行薄层液基细胞学涂片；将两组制片放在95%乙醇内固定放置20 min后进行染色（常规或巴氏）、封片、显微镜下观察。液基细胞学制片：把液基保存液放置在试管内，进行梯度离心操作，次数为2次。第1次注入梯度离心液5 mL，离心时间10 min，转速为1 080 r/min，吸取上清液后注入5 mL缓冲液。第2次离心时，时长10 min，转速2 000 r/min，吸取上清液后注入1 mL缓冲液，放在震荡器上进行混合震荡30 s，之后把混合液放在全自动沉降式液基薄层细胞制片机内，对细胞进行转移、沉降、贴附和染色等操作，最后完成细胞薄片[4]。

1.3 观察指标

对比两种制片方式诊断结果。病理组织学分类以甲状腺病变分类标准为参考，共计包括5个类型，分别为良性病变、恶性病变、可疑恶性、涂片不满意、滤泡性肿瘤。其中良性病变包括甲状腺肿、亚急性甲状腺炎和桥本甲状腺炎3个方面；恶性病变包括淋巴瘤、髓样癌和甲状腺乳头状癌3个方面；可疑恶性是指存在恶性可能，但无法确认；涂片不满意是指不能进行诊断，涂片中能见到的、可以观察的滤泡细胞团少于6个，且每团含有的滤泡细胞少于10个或超过20个滤泡细胞；甲状腺癌的恶性阳性率为癌病例数占病例总数的百分比。

1.4 统计方法

通过SPSS 18.0统计学软件统计数据，计数资料以频数及百分比表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

液基细胞学制片诊断结果显示，良性、恶性、可疑恶性、制片不满意、滤泡性肿瘤的例数分别为86例、11例、1例、1例和1例；传统方法制片诊断结果显示，良性、恶性、可疑恶性、制片不满意、滤泡性肿瘤的例数分别为81例、3例、5例、8例和3例；液基细胞学制片不满意占据1%（1/100），传统方法制片不满意占据8%（8/100），两种制片方式制片不满意占据百分率相比，差异有统计学意义（χ2=5.701，P=0.017）。液基细胞学制片诊断下恶性阳性率为11.0%（11/100），传统方法制片诊断下恶性阳性率为3%（3/100），两种制片方式恶性阳性率相比，差异有统计学意义（χ2=4.916，P=0.027），见表1。

表1 液基细胞学制片诊断结果及传统方法制片诊断结果

3 讨论

甲状腺肿块也叫甲状腺结节，在临床是一种常见病症。临床经验表明，细针穿刺检查甲状腺病变性质的效果显著优于放射性核素影像以及超声波检查，所以在临床甲状腺病变的诊断方面，以细针穿刺为主，但是进行病理诊断时，必须要在标本和制片质量达标的前提下进行。因为细针穿刺细胞学存在一定缺陷，要根据细胞形态的改变为依据进行穿刺，若穿刺的结节过小、病灶太多，病变部位比较特殊，细胞量过少，病变组织整体构造不足，病变组织以及周围组织间结构关系缺乏等。在这些背景条件下，都不能进行有效穿刺，所以细胞学诊断和组织学病理诊断并不相同。相关研究表明，细针穿刺细胞学和组织病理学检查诊断具有较高符合率，对于细胞的形状排列特征等能够进行准确诊断，但是在滤泡性肿瘤诊断方面，准确率较低，必须显现肿瘤包膜或其下血管浸润处才能提升诊断准确率，对于可疑恶性结节进行穿刺时，特别是囊实性结节，应该以超声引导穿刺方式进行，可以避免漏诊情况。但是对于淋巴细胞甲状腺炎进行制片时，要防止将血液中的淋巴细胞当做甲状腺炎的诊断标准，当淋巴细胞与中性粒细胞比例和外周血涂片接近时，要慎重诊断[5-6]。

液基细胞学涂片技术将标本的采集和处理方式进行了优化，因此涂片质量有所提升，已经在临床被广泛应用在妇科疾病领域，用于对尿液、体液和呼吸道的标本进行检测，随着技术的不断提升，也逐渐被应用在细针抽吸细胞学诊断领域当中。和传统细胞学涂片相比，液基细胞学涂片背景更清晰，更干净，胶质更少，且以浓染的水滴状显现，细胞核虽然小但细节更易观察。甲状腺组织血供丰富且含有滤泡胶质，因此传统涂片中细胞会被血液、胶质遮盖，对制片质量造成影响，直接影响诊断结果[7-8]。液基细胞学检查应用在甲状腺细针穿刺当中，可以减少血液、胶质的干扰，将有限的细胞进行聚集，制作成均匀的液基薄片，能够改善穿刺细胞丢失情况，从而提升制片质量，进而提升甲状腺病变细胞学诊断准确性。甲状腺乳头状癌的细胞学特征在液基细胞学涂片以及传统细胞学涂片方面存在一定差异，而液基细胞学涂片中的粉状染色质和甲状腺乳头状癌诊断密切相关，更利于诊断，表明在甲状腺病变诊断中，利用液基细胞学涂片技术便于制片的深入制作，进行特殊染色和辅助技术[9-11]。

该文研究中，涂片特征包括细胞学形态和标本质量。细胞学形态包括细胞学面积、背景、细胞量、细胞排列、细胞大小和细胞核6个方面。标本质量包括滤泡上皮组织碎片、胶质、血液成分遮盖、人为细胞变形和退变4个方面。液基细胞学制片的细胞学面积是直径大小为13 mm的圆形薄片，而传统涂片的面积为超过2/3面积大小的玻片；液基细胞学制片的细胞学背景非常清晰，且血细胞、胶质和杂质非常少；传统涂片的细胞学背景不但血细胞和胶质非常多，而且互相交叉，非常混乱；液基细胞学制片的细胞量非常多，并且比较聚集；传统涂片的细胞量或多或少，十分散乱；液基细胞学制片的细胞排列以单层平铺形式显现，且形状为薄片和腺团状；传统涂片的细胞排列多层交叉，以团块状呈现；液基细胞学制片下的细胞比较小；而传统涂片的细胞比较大；液基细胞学制片的细胞核比较清晰，但是传统涂片的细胞核不够清晰；液基涂片的滤泡上皮组织碎片结构大多数可见，且十分清楚，但是传统涂片的滤泡上皮组织碎片却大多数不可见，且不够清楚；液基涂片的胶质比较少，且呈现出粉红色的圆形小团形状，而传统涂片的胶质比较多，常和血液融合，形状不固定；液基涂片的血液成分遮盖基本没有，但是传统涂片大部分都被血液成分遮盖；液基涂片的人为细胞基本没有出现变形和退变现象，但是传统涂片的人为细胞变形和退变现象却时有发生。通过对比传统涂片方法和液基细胞学进行制片两种形式，发现液基细胞学制片不满意例数少于传统方法制片，表明液基细胞学制片质量远远优于传统制片；在恶性阳性率方面，液基细胞学制片诊断恶性阳性例数也多于传统方法制片。杨汶士[12]研究中表明，液基细胞学制片诊断准确率是92.60%，高于传统涂片制片诊断准确率是86.42%（P＜0.05），体现出液基细胞学制片方法存在较高诊断准确性。该研究中液基细胞学制片诊断下恶性阳性率为11.0%，传统方法制片诊断下恶性阳性率为3.0%，液基细胞学制片诊断方式中恶性阳性的检出率更高（P＜0.05），表明相对于传统方法，液基细胞学制片检查方式更具优越性。

综上所述，在甲状腺癌恶性阳性率检测方面，液基细胞学技术与传统方法制片方式均能对其进行诊断，但液基细胞学技术应用于甲状腺细针穿刺其诊断恶性阳性检出数据更高，可为临床提供更为准确的数据参考。