医疗器械最终冲洗水中月桂醇聚氧乙烯醚硫酸钠残留量测定

刘延忠，蔡 虎

（1. 甘肃省医疗器械检验检测所，甘肃 兰州 730070； 2. 陕西省医疗器械质量监督检验院，陕西 咸阳 712046）

月桂醇聚氧乙烯醚硫酸钠（AES）为通过非离子月桂醇聚氧乙烯醚（AEO－3）经硫酸化、中和等过程，由聚氧乙烯链连接亲水基和疏水基的表面活性剂。其分子结构具有氧乙烯基团和硫酸化基团，兼有非离子表面活性剂和阴离子表面活性剂（LAS）的优点，具备双重性能［1］，去污、乳化、润湿、增溶、溶解、发泡等性能均好，抗硬水性强，配伍广［2－3］，生物降解度高，对皮肤和眼睛的刺激性低［4－6］。此外，用 AES 部分取代 LAS 还可少用或不用磷酸盐，并减少总活性物的用量。近年来，AES 被广泛用于包括生物医药在内的各个领域，尤其是一次性使用高分子医疗器械在末道清洗工艺中常选用一定浓度的AES 为清洗剂。比较传统分光光度法［7－8］、两相滴定法［9－10］、色谱法［11－12］、电化学法［13－14］后，本研究中选择仪器普及率高、操作简便、灵敏、快速和重复性好的分光光度法［15］测定医疗器械最终冲洗水中AES 的残留量。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

DU800 型紫外－可见分光光度计（美国Beckman公司）；KQ－100VDE 型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，功率为 100 W，频率为 45 kHz）；MS105DU 型电子分析天平（德国梅特勒－托利多公司，精度为十万分之一）；分液漏斗（配有聚四氟旋塞，规格为250 mL）。

1.2 试药

三氯甲烷（色谱纯），亚甲蓝（指示剂级），异丙醇（分析纯），均购自国药集团化学试剂有限公司；一水磷酸二氢钠（分析纯，上海麦克林生化科技有限公司）；AES 标准溶液（分析纯，含量为98%，山东西亚化学试剂有限公司）；纯化水（自制），最终冲洗水（西安× ×医疗器械有限公司，批号分别为 190516，190517，190518）。

2 方法与结果

2.1 定量分析原理

阳离子染料亚甲蓝与LAS 作用，生成亚甲蓝活性物质，用三氯甲烷萃取，其吸光度与浓度成正比，用分光光度计在652 nm 波长处测量三氯甲烷层的吸光度，可对LAS 进行定量分析。

2.2 溶液制备

取0.1 g AES，精密称定，加水溶解，转移至100 mL容量瓶中，定容，摇匀，保存于4 ℃冰箱内，即得AES 贮备液。临用新配，精密吸取AES 贮备液1.0 mL，置100 mL容量瓶中，用水定容，摇匀，即得AES 标准溶液。取一水磷酸二氢钠25 g，溶于150 mL 水中，转移至500 mL 容量瓶中，缓慢加入浓硫酸3.4 mL，摇匀；取亚甲蓝15 mg，加25 mL 水溶解，转移至容量瓶中，用水定容，摇匀，即得亚甲蓝溶液。贮存于棕色试剂瓶中。

2.3 方法学考察

检测限（LOD）和定量限（LOQ）考察：对于光谱法，可与空白信号区别的最小信号 XL由下列公式确定：式中，表示空白信号的平均值；Sb表示空白信号的标准偏差；k 为根据置信水平确定的系数，国际纯粹与应用化学联合会建议取值为3。由上式可知，LOD 为能产生净响应信号的被测物的浓度或质量。为确定空白信号的标准偏差和平均值，测定20 个空白样品的响应值（见表 1）。结果，Sb＝0.001 335，即 LOD 的净响应信号值为 0.004 004。配制 1，2，3 μg 的标准样品，对 LOD 进行复核，LOQ 为 LOD 的 3 倍，结果见表 2。可见，该方法的 LOD 为 1 μg，LOQ 为 3 μg。

表1 20 个空白样品响应值测定结果Tab.1 Determination results of response value of 20 blank samples

表2 标准样品响应值测定结果Tab.2 Determination results of response value of standard sample

标准曲线考察：取梨形分液漏斗7 只，按表3 分别加入纯化水和一定体积AES 标准溶液，再分别加入25 mL亚甲蓝溶液和5 mL 异丙醇，摇匀，用单标线刻度吸管分别加入15 mL 三氯甲烷，密塞，剧烈振荡30 s，置漏斗架上静置分层，在各分液漏斗下出口处塞入少量处理后的脱脂棉（脱脂棉在索氏提取器中用三氯甲烷提取4 h，取出，干燥），将三氯甲烷层通过脱脂棉，置具塞锥形瓶中，即 得 AES 含 量 为 3.069，5.115，10.230，20.460，30.690，40.920 μg 的系列 AES 标准溶液，以三氯甲烷为空白溶液，在625 nm 波长处测定上述待测溶液的吸光度。以标准样品的吸光度减去空白样品的吸光度（Y）为纵坐标，以标准样品含量（X，μg）为横坐标进行线性回归。得回归方程 Y ＝0.012 7 X －0.015 9（r ＝0.999 8，n ＝ 6）。结果表明，AES 含量在 3.069 ～ 40.920 μg 范围内与吸光度线性关系良好。

表3 AES 系列标准溶液配制方法（mL）Tab.3 Preparation method of AES series standard solution（mL）

加样回收试验：取分液漏斗7 只，分别加入100 mL最终冲洗水，其中6 只加入AES 标准溶液（质量浓度为25 μg ／ mL）各 200 μL，加入亚甲蓝溶液 25 mL、异丙醇5 mL、三氯甲烷15 mL，按标准曲线项下方法测定吸光度，计算回收率。结果见表4。

表4 AES 加样回收试验结果（n ＝6）Tab.4 Results of the recovery test of AES（n ＝6）

重复性试验：由于样品实测值低于LOD，故重复性试验的 RSD 值采用加样回收试验的 RSD 值3.00%。

2.4 样品残留量测定

精密量取 3 批（批号分别为 190516，190517，190518）最终冲洗水各100 mL，分别置250 mL 分液漏斗中，按标准曲线考察项下方法操作，测定待测溶液在652 nm 波长处的吸光度，以纯化水为空白对照，将样品溶液测得的吸光度减去空白样品的吸光度并带入线性回归方程，计算最终清洗水中AES 的残留量。结果3 批最终冲洗水中均未检出AES，均符合要求。

3 讨论

参考《水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法（GB7494－87）》《水和废水监测分析方法（第四版）》中阴离子洗涤剂亚甲蓝的分光光度测定方法，加入5 mL 异丙醇，以避免提取过程中因振摇而发生乳化现象。比较了pH 值对结果的影响，结果无论是否调节pH值，检测结果均不存在差异，故最终未调节pH 值。萃取时，采用色谱纯级别的三氯甲烷，极大降低了空白值，方法的 LOD 由 5 μg 降至 1 μg。同时，分离三氯甲烷层后无需再次定容，可直接测定，极大简化了测定过程，减少了三氯甲烷的用量。比较了异丙醇的纯度级别，结果发现，不论采用分析纯或色谱纯进行测定，对空白值和检测结果均无显著影响。

综上所述，本研究中建立的分光光度法LOD 低，灵敏度高，重复性好，可用于最终冲洗水中AES 残留量的测定。