微生态制剂对过敏性紫癜患儿肠道菌群状态的影响观察

刘玲佩 李小兵 陈跃华 赖盼建

[摘要] 目的 探討微生态制剂对过敏性紫癜患儿肠道菌群状态的影响。 方法 选取2017年6月至2019年6月我院收治的80例过敏性紫癜患儿，随机数表法分为两组，对照组40例利用常规药物治疗，试验组40例在此基础上加用微生态制剂治疗。比较两组的临床疗效，治疗前后免疫学及尿蛋白指标水平、肠道菌群水平和治疗6个月内的复发情况。 结果 治疗结束后，试验组治疗有效率（95.00%）高于对照组（77.50%）（P<0.05）;两组治疗后血清球蛋白A（IgA）、补体C3、尿白蛋白（Alb）和β2-微球蛋白（β2-MG）水平均低于治疗前;治疗后，试验组血清IgA、C3和尿液Alb 、β2-MG水平均低于对照组（P<0.05）;两组治疗后大肠杆菌水平低于治疗前，双歧杆菌和B/E值高于治疗前;治疗后，试验组的大肠杆菌水平均低于对照组，双歧杆菌和B/E值高于对照组（P<0.05）;对两组患儿随访6个月，试验组复发率为10.00%，低于对照组的27.50%（P<0.05）。 结论 口服酪酸梭菌活菌散可提高过敏性紫癜患儿临床疗效，改善肠道菌群失调状态，减少复发率，安全性较高。

[关键词] 过敏性紫癜;微生态制剂;肠道菌群;儿童

[中图分类号] R554.6          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701（2021）13-0005-04

Observation of the effect of microecological preparation on the intestinal flora of children with allergic purpura

LIU Lingpei1   LI Xiaobing2   CHEN Yuehua1   LAI Panjian2

1.Department of General Medicine， Affiliated Jinhua Hospital， Zhejiang University School of Medicine， Jinhua   321000， China; 2.Department of Padiatrics， Affiliated Jinhua Hospital， Zhejiang University School of Medicine， Jinhua   321000， China

[Abstract] Objective To explore the effect of microecological preparation on the state of intestinal flora in children with allergic purpura. Methods Eighty patients with allergic purpura admitted to the hospital from June 2017 to June 2019 were selected. The patients were divided into 2 groups by random number table method. The control group （40 cases） was treated with conventional drugs， and the experimental group（40 cases） was added with microecological preparation based on the above treatment. The clinical efficacy， immunological and urinary protein index levels before and after treatment， intestinal flora levels， and relapse within 6 months of treatment were compared between the two groups. Results After treatment， the effective rate of treatment in the experimental group was 95.00%， higher than that（77.50%） in the control group （P<0.05）. The serum globulin A （IgA）， complement C3， urinary albumin （Alb） and β2-microsphere protein（β2-MG） after treatment in both groups were lower than those before treatment. After treatment， the levels of serum IgA， C3 and urine Alb and β2-MG in the experimental group were lower than those in the control group（P<0.05）. After treatment， the E. coli level in two groups was lower than that before treatment， and the Bifidobacterium and B/E values were higher than those before treatment. After treatment， the E. coli level in the experimental group was lower than that in the control group， and the Bifidobacterium and B/E values in the experimental group were higher than those of the control group（P<0.05）. The two groups of children were followed up for 6 months. The recurrence rate of the experimental group was 10.00%， lower than that 27.50% of the control group（P<0.05）. Conclusion The oral administration of Clostridium butyricum live bacteria powder can improve the clinical efficacy of children with allergic purpura， improve the state of intestinal flora imbalance， reduce the recurrence rate， and has higher safety.

[Key words] Allergic purpura; Microecological preparation; Intestinal flora; Children

过敏性紫癜是3～10岁儿童高发的过敏性疾病之一，据统计，亚洲<5岁患儿约占总患病儿童的50%[1]。过敏性紫癜根据侵犯部位的不同，分为单纯型、肾型、关节型、腹型、混合型五种，临床症状各不相同[2-4]。过敏性紫癜患儿治疗周期长且病情反复，同时并发症多，给患儿及其家长带来极大的痛苦[5]。既往研究揭示了肠道菌群与过敏性疾病之间存在密切关系，两者可能互为因果，相互影响，一般来说肠道微生态稳定的过敏性疾病患儿，临床症状会出现一定程度的缓解，因此肠道微生态的相关与过敏性疾病的防治研究息息相关，临床对于微生态制剂在过敏性疾病中的应用越发重视[6-7]。本研究討论了微生态制剂对过敏性紫癜患儿肠道菌群状态的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年6月至2019年6月我院收治的80例过敏性紫癜患儿，随机数表法分为试验组和对照组，每组各40例。两组患儿的性别、年龄、发病病程、临床症状比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。见表1。

1.2 纳入、排除标准

纳入标准：①符合《诸福棠实用儿科学》中过敏性紫癜的诊断标准[9];②年龄3～14岁;③肾功能正常;④研究方案报送医院伦理委员会批准，每例患者均征求家长知情同意。排除标准：①合并肾病综合征者;②合并心、脑血管、肝、肾、消化道及造血系统等严重原发性疾病;③已使用微生态制剂、抗生素的治疗;④合并原发性免疫缺陷疾病及精神病者;⑤中途退出治疗者。

1.3 治疗方法

对照组：采用常规方式治疗，嘱咐患儿卧床休息，避免剧烈运动，严格控制患儿饮食，同时给予相应的抗血小板聚集、抗过敏及补液等常规治疗，合并感染的患儿给予敏感抗生素使用，伴有严重关节肿痛和胃肠道出血的患儿给予静脉滴注甲基强的松龙（天津药业焦作有限公司，国药准字H20040845）10～80 mg/次，1次/d，治疗3 d后改为醋酸泼尼松（天津力生制药股份有限公司，国药准字H12020123）口服20 mg/次，2次/d，症状减轻后逐渐减量，连续治疗2周。试验组：在同对照组的常规治疗基础上，加用口服酪酸梭菌活菌散（日本米雅利桑制药株式会社，国药准字S2012 0077），1.0 g/次，2次/d，早晚口服，连续治疗2周。

1.4 观察指标及评价标准

①两组临床疗效[8]。治疗结束后，对两组患儿治疗效果进行评估，治愈：腹部或关节疼痛消失，皮损消失、几乎不见色素沉着，无新皮损出现。显效：腹部或关节疼痛明显减轻，70%以上的皮损消失，无或有少量新皮损出现。有效：腹部或关节疼痛有一定减轻，30%以上皮损消失，出现新皮损。无效腹部或关节疼痛无减轻甚至加重，皮损反复出现。治疗有效率=（治愈+有效+显效）/总例数×100%;②两组治疗前后免疫学指标比较。血清球蛋白A（IgA）、补体C3、尿白蛋白（Alb）和β2-微球蛋白（β2-MG）。治疗前后抽取空腹患儿静脉血5 mL，3000 r/min离心15 min，取上层清液，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测IgA、C3水平，采取上海晶抗生物工程有限公司生产试剂盒;收集患儿尿液样品，检测其中Alb、β2-MG水平;③两组治疗前后肠道菌群水平比较。治疗前后，收集两组患儿粪便样品，采用16SrDNA荧光定量PCR技术测定粪便样品中大肠杆菌、双歧杆菌水平，计算两者比值B/E，双歧杆菌引物：上游 5-GAT TCT GGC TCA GGA TGA ACGC -3，下游5-CTG ATA GGA CGC GAC CCA T-3，扩增片段为230 bp;大肠杆菌引物：上游5-CAT GCC GCG TGT ATG AAG AA-3;下游5-CGG GTA ACG TCA ATG AGC AAA-3，扩增片段为95 bp;荧光染料由东洋坊上海生物科技有限公司提供;④两组复发情况比较。采用门诊和电话的方式对患儿随访6个月，每个统计周期均为1个月，患儿出院后 3 个月内再次出现过敏性紫癜的特征性皮疹，或伴随相关消化道、关节、肾脏症状等，视为复发，1个统计周期内多次复发视为1例。

1.5 统计学处理

采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析，计数资料用率表示，采用χ2检验，计量资料采用（x±s）表示，采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组临床疗效比较

治疗结束后，试验组治疗有效率为95.00%，高于对照组的77.50%，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.2 两组治疗前后免疫学及尿蛋白指标比较

两组治疗后血清IgA、C3和尿液Alb 、β2-MG水平均低于治疗前（P<0.05）;治疗后，试验组血清IgA、C3和尿液Alb、β2-MG水平均低于对照组（P<0.05）。见表3。

2.3 两组治疗前后肠道菌群水平比较

两组治疗后大肠杆菌水平低于治疗前，双歧杆菌和B/E值高于治疗前（P<0.05）;治疗后，试验组的大肠杆菌水平均低于对照组，双歧杆菌和B/E值高于对照组（P<0.05）。见表4。

2.4 两组复发情况比较

对两组患儿随访6个月，试验组复发率为10.00%，低于对照组的27.50%（P<0.05）。见表5。

表5   两组复发情况比较

3 讨论

过敏性紫癜的病因暂未明确，对其发病机制的研究集中于免疫学、凝血机制和遗传因素三个方面，近年来由于免疫技术的发展，证实了肠道菌群与免疫之间存在密切联系，即肠道细菌能通过黏膜屏障与免疫细胞接触[10]。过敏性疾病患者由于肠黏膜屏障功能受损诱发胃肠道反应，肠道菌群失调会影响其发病和转归，如过敏性紫癜患儿的乳酸杆菌、双歧杆菌含量明显低于健康儿童，伴有消化道症状的过敏性紫癜患儿阳性率更高[11]。陈鹏德等[12]通过高通量测序技术对过敏性紫癜患儿肠道粪便和黏膜菌群结构及多样性进行研究，发现过敏性紫癜患儿粪便菌群病原菌增多而有益菌较少，且粪便菌群和结肠黏膜菌群结构和多样性存在差异。因此，本研究中加用微生态制剂治疗过敏性紫癜患儿，研究其对肠道菌群的影响。

本研究中，试验组治疗有效率高达95.00%，高于对照组，说明与常规治疗相比，联用酪酸梭菌活菌散治疗过敏性紫癜患儿可提高治疗有效率，推测是酪酸梭菌活菌散可以定植于肠道黏膜并进行繁殖，直接提升肠道双歧杆菌数量，抵抗致病菌的入侵，加快肠道内益生菌的繁殖，改善肠道微环境，恢复肠道微生态的平衡，让整体的治疗效果得到提升。同时，经16SrDNA荧光定量PCR技术测定，治疗后试验组患儿粪便中的大肠杆菌水平均低于对照组，双歧杆菌和B/E值高于对照组，证明了酪酸梭菌活菌散对增加肠道双歧杆菌数量、改善肠道微环境的作用。与张静等[13]研究结果相似。

在许多感染疾病中均有lgA和补体C3的参与，两者形成的抗原抗体复合物会增加毛细血管的通透性，由此激活免疫系统，以致大量炎性因子和过敏介质释放，从而产生变态反应并累及皮肤、肾脏、关节和消化道等器官，甚至内脏出血[14-19]。刘娜娜等[20]研究提示过敏性紫癜患儿的总IgE、IgA和补体C3对疾病的预后具有预测价值。除此之外，尿液中的Alb、β2-MG指标可以直观的反映肾小球基底膜通透性的变化以及肾小管功能的异常，因此对用药时间具有一定的指导性[21]。本研究中，治疗后试验组血清IgA、C3和尿液Alb、β2-MG水平均低于对照组（P<0.05），提示加用酪酸梭菌活菌散治疗可以改善过敏性紫癜患儿血清免疫学及尿蛋白指标。推测与酪酸梭菌活菌散加快肠道内益生菌的繁殖，改善肠道微环境，恢复肠道微生态的平衡作用有关。对两组患儿随访6个月，试验组复发率为10.00%，低于对照组的27.50%，提示联合酪酸梭菌活菌散治疗对改善过敏性紫癜患儿的预后有一定疗效，推测酪酸梭菌活菌散与其减轻肠黏膜损伤，保护肠黏膜屏障功能的作用有关。不过，本研究纳入样本较少，随访时间较短，不能完全掌握不同程度过敏性紫癜患儿的生存预后情况，有待进一步扩大样本和随访时间。

综上所述，酪酸梭菌活菌散可改善过敏性紫癜患儿肠道菌群失调状态，降低血清IgA、C3和尿液Alb、β2-MG水平，减少复发率，治疗有效率显著提高。

[参考文献]

[1] Liu SX，Li YH，Dai WK，et al. Fecal microbiota transplantation induces remission of infantile allergic colitis through gut microbiota re-establishment[J]. World Journal of Gastroenterology，2017，23（48）：8570-8581.

[2] 邱碧波，黄彩芝，莫丽亚.过敏性紫癜患儿血清25羟维生素D水平变化及临床意义[J].实用预防医学，2019， 26（12）：1528-1530.

[3] 林林东，王晓冬，龚娅.过敏性紫癜患儿免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群水平与疾病严重程度的相关性研究[J].国际检验医学杂志，2018，39（13）：1651-1653.

[4] Smith TDH，Watt H，Gunn L，et al. Recommending oral probiotics to reduce winter antibiotic prescriptions in people with asthma：A pragmatic randomized controlled trial[J]. The Annals of Family Medicine，2016，14（5）：422-430.

[5] 宋玉美.皮質类固醇激素及免疫抑制剂对过敏性紫癜肾炎患儿的影响[J].实用临床医药杂志，2018，22（5）：87-90.

[6] 柳园，王亚娟，石磊，等.生命早期肠道菌群失调与后期过敏性疾病发病风险的研究[J].中国抗生素杂志，2018， 43（6）：743-749.

[7] Oh S，Yap GC，Hong PY，et al. Immune-modulatory genomic properties differentiate gut microbiota of infants with and without eczema[J]. PLoS ONE，2017，12（10）：e0184955.

[8] 田颖，王予川. 孟鲁司特钠联合丹参酮治疗过敏性紫癜的疗效分析[J]. 中国现代医学杂志，2014，24（13）：70-72.

[9] 吴瑞萍，胡亚美，江载芳.诸福棠实用儿科学[M].6版.北京：人民卫生出版社，1996：674-679.

[10] 饶洪江.复方甘草酸苷联合西咪替丁对过敏性紫癜患儿体征改善及血清T细胞亚群、IL-1β水平变化的影响[J].中国血液流变学杂志，2017，27（1）：86-88.

[11] 权春梅，任宗明，王能勇，等.过敏性紫癜患儿血清IgA1 异常糖基化水平及其与氧化应激指标的相关性研究[J].医学临床研究，2019，36（10）：1918-1919，1922.

[12] 陈鹏德，林燕，杨洁，等.过敏性紫癜患儿肠道菌群结构及多样性研究[J].中国妇幼健康研究，2017，28（7）：747-752，757.

[13] 张静，闻钰.微生态制剂对小儿血液肿瘤化疗后肠道菌群失调的影响[J].浙江临床医学，2018，20（11）：1818-1819.

[14] 桑苗，刘亚盼.双歧杆菌四联活菌联合孟鲁司特钠对过敏性紫癜患儿炎性因子和免疫功能的影响[J].儿科药学杂志，2019，25（4）：27-31.

[15] 李爱国，刘之彝，龙晓东，等.颅内动脉瘤介入栓塞术和颅内夹闭术治疗高分级动脉瘤性蛛网膜下腔出血的临床疗效观察[J].临床外科杂志，2018，26（7）：497-500.

[16] 杨焕丹，张锐锋，彭倩倩，等. 过敏性紫癜合并链球菌感染的临床特点及血清免疫球蛋白和补体的变化[J]. 安徽医药，2019，23（3）：483-486.

[17] 张婷，武坤毅，王娜，等. 补体C5a受体1拮抗剂对小鼠上行性泌尿道感染的保护作用[J]. 中华肾脏病杂志，2018，34（6）：439-445.

[18] 王爽，邹飞，吴思，等.人巨细胞病毒感染新生儿血清和脑脊液细胞因子的变化[J]. 中华实用儿科临床杂志，2019， 34（11）：823-826.

[19] 李博，郑欢伟，赵召霞，等.干扰素α-1b序贯拉米夫定联合治疗对慢性乙型肝炎患儿T淋巴细胞亚群、补体水平及肝功能的影响[J].中国医药导报，2019，16（14）：148-151.

[20] 刘娜娜，丁周志，陈琼，等.过敏性紫癜患儿总IgE、IgA及补体C3水平对疾病预后的预测价值[J].中华全科医学，2019，17（9）：1463-1466.

[21] 吴云刚，何方.过敏性紫癜患儿发生肾脏损害危险因素的Logistic回归分析[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志，2019，18（5）：397-400.

（收稿日期：2020-11-12）