糖熏色素的纯化工艺及稳定性研究

张剑波，刘奇菡,2，刘桐彤，刘登勇,2,

（1.渤海大学食品科学与工程学院, 生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心，辽宁锦州 121013；2.江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心，江苏南京 210095）

熏鸡作为我国著名的传统美食，因其独特的风味和色泽而广受欢迎，在我国比较著名的有沟帮子熏鸡、聊城熏鸡、卓资山熏鸡等[1]。传统的熏鸡制作往往是通过木材的不完全燃烧，将所产生烟气中的风味物质逐渐富集进鸡肉中，从而赋予熏鸡独一无二的风味和色泽。但是熏鸡在制作过程中由于木材的不完全燃烧会吸附和产生多种可导致肿瘤发生的多环芳烃类和亚硝胺类化合物，其中较为常见为苯并芘[2]。同时，熏鸡在后期运输、贮藏以及销售过程中会因光照和氧气使得表面色泽发生变化，使得产品品质下降，最终对熏鸡的货架期产生影响[3]。研究表明，糖熏这种新型烟熏方式与传统木熏相比，不仅产生的多环芳烃类物质较少，而且不产生苯并芘这种具有高致癌性的化合物[4]。同时，糖熏还能够赋予熏鸡独特的风味和色泽[5]。而目前对于糖熏熏鸡的研究主要集中在熏鸡的安全性[6]、熏鸡工艺配方的改善[7]以及产生的风味物质[8]等，对糖熏色素研究较少，有关其纯化工艺也鲜有报道。

目前，色素的纯化分离技术已经越来越丰富，国内外常用的分离纯化技术包括：大孔吸附树脂处理[9]、薄层色谱[10]、高速逆流色谱[11]、膜过滤[12]、离子交换色谱[13]等。相比于其他分离纯化方式，大孔吸附树脂因其极性广泛、选择性好、机械强度高、吸附速度快、成本低廉、易于使用和再生、适合于工业规模生产等优点近些年来被广泛使用。目前，大孔吸附树脂已成功应用于植物以及微生物中多种组分的分离纯化，如蓝莓花色苷[14]、植物多糖[15]以及菌产色素[16]等。然而，对于利用大孔吸附树脂分离纯化糖熏熏鸡中色素的研究还未见报道。

因此，本文选取7种不同极性和物理性能的大孔吸附树脂对糖熏色素的纯化工艺进行研究。通过对比吸附率和解吸率，筛选出最适大孔吸附树脂，并对其吸附与解吸工艺进行优化，最后对纯化后糖熏色素的稳定性进行分析。希望能够通过糖熏色素的提纯工艺以及稳定性研究，为后续糖熏色素的结构鉴定及上色机理的研究提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

新鲜鸡皮 锦州市万达广场万维超市；浓盐酸锦州古城化学试剂有限公司；氢氧化钠 国药集团化学试剂有限公司；无水乙醇 天津市大茂化学试剂厂；大孔吸附树脂（表1） 安徽三星树脂有限公司；所有试剂 均为国产分析纯。

Allgra 64R冷冻离心机 美国Beckman公司；UPG-753紫外-可见分光光度计 北京优谱通用科技有限公司；FE20 pH计 瑞士Mettler Toledo公司；QSJ-A03A1型切碎机 佛山市小熊电器有限公司；PL203电子天平 上海博特勒-托利多有限公司；RE-52A旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂；BT100数显恒流泵 上海青浦沪西仪器厂；THZ-100B恒温振荡器 上海一恒科学仪器有限公司；YXQT1/1型智能糖熏工艺平台 河北晓进机械制造股份有限公司。

表1 大孔吸附树脂的物理性能Table 1 Physical properties of macroporous resins

1.2 实验方法

1.2.1 糖熏色素样品的制备 参考王逍[5]的方法稍作修改：新鲜鸡皮→剔除脂肪及结缔组织→沸水煮制（10 min）→熏制（蔗糖/鸡皮：1:4，熏制温度330 ℃，熏制时间10 min）→绞碎→ 80%乙醇溶液提取（液料比：6:1）→10000 r/min离心过滤，取上清液（沉淀蛋白）→脱脂→旋转蒸发→真空冷冻干燥→备用。

1.2.2 糖熏色素紫外光谱分析 准确称取1 mg经真空冷冻干燥后的糖熏色素，溶于80%乙醇中，用紫外分光光度计于220～600 nm波长进行扫描，确定糖熏色素的最大吸收波长。

1.2.3 最适大孔吸附树脂的筛选 吸附过程：准确称取经活化处理后的7种不同型号大孔吸附树脂（X-5，AB-8，XAD-7，DA-201，D4020，D101，NKA-9）3.0 g，加30 mL吸光度为A0的糖熏色素溶液。置于温度设定为35 ℃、转速设定为150 r/min的恒温振荡箱中避光振荡12 h，每组做三次平行试验。吸附完成后取上清液，测定并记录其吸光度值A1，分别计算7种不同型号大孔吸附树脂对糖熏色素的吸附率。解吸过程：称取经吸附达到饱和的7种不同型号大孔吸附树脂3.0 g，加入30 mL 80%乙醇溶液。置于温度设定为35 ℃、转速设定为150 r/min的恒温振荡箱中避光振荡12 h后，再吸取上层清液，测定并记录其吸光度A2，每组做三次平行试验,分别计算7种不同型号大孔吸附树脂对糖熏色素的解吸率。

1.2.4 静态吸附工艺优化

1.2.4.1 糖熏色素粗体液浓度的选择 将糖熏色素配制成浓度为30、40、50、60、70、80、90 μg/mL的水溶液，各加入XAD-7型大孔吸附树脂10 g，置于温度设定为35 ℃，转速设定为150 r/min的恒温振荡箱中静态吸附12 h，每组做三次平行试验，根据吸附前后溶液吸光度值的变化计算吸附率。

1.2.4.2 吸附液pH的选择 将糖熏色素配制成浓度为30 μg/mL的原溶液，利用1 moL/L的盐酸和氢氧化钠溶液将糖熏色素的pH调节为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0，各加入XAD-7型大孔吸附树脂10 g，置于温度设定为35 ℃，转速设定为150 r/min的恒温振荡箱中静态吸附12 h，每组做三次平行试验，根据吸附前后溶液吸光度值的变化计算吸附率。

1.2.4.3 吸附温度的选择 将糖熏色素配制成浓度30 μg/mL、pH8.0的原溶液，各加入XAD-7型大孔吸附树脂10 g，置于温度设定为25、30、35、40、45、50 ℃ ，转速设定为150 r/min的恒温振荡箱中静态吸附12 h，每组做三次平行试验，根据吸附前后溶液吸光度值的变化计算吸附率。

1.2.5 静态解吸工艺优化

1.2.5.1 乙醇浓度的选择 将糖熏色素配制成浓度60 μg/mL、pH8.0的溶液，然后放入温度设定为35 ℃，转速设定为150 r/min的恒温振荡箱中静态吸附12 h后，分别加入浓度10%、20%、30%、40%、50%、60%的pH5.0乙醇溶液，置于温度设定为30 ℃，转速设定为150 r/min的恒温振荡箱解吸12 h。解吸完全后过滤，取滤液并测定其吸光度，每组做三次平行试验，根据解吸前后溶液吸光度值的变化计算解吸率。

1.2.5.2 解吸液pH的选择 将糖熏色素配制成浓度60 μg/mL、pH 8.0的溶液，然后放入温度设定为35 ℃，转速设定为150 r/min的恒温振荡箱中静态吸附12 h后，分别加入pH为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0，浓度为10%的乙醇溶液，置于温度设定为30 ℃，转速设定为150 r/min的恒温振荡箱解吸12 h。解吸完全后过滤，取滤液并测定其吸光度，每组做三次平行试验，根据解吸前后溶液吸光度值的变化计算解吸率。

1.2.5.3 解吸温度的选择 将糖熏色素配制成浓度60 μg/mL、pH8的溶液，然后放入温度设定为35 ℃，转速设定为150 r/min的恒温振荡箱中静态吸附12 h后，加入pH为5.0，浓度为10%的乙醇溶液，分别置于温度设定为30、35、40、45、50 ℃，转速设定为150 r/min的恒温振荡箱解吸12 h。解吸完全后过滤，取滤液并测定其吸光度，每组做三次平行试验，根据解吸前后溶液吸光度值的变化计算解吸率。

1.2.6 动态吸附工艺优化

1.2.6.1 径高比的选择 将处理活化后的XAD-7型树脂按照1:5、1:6、1:7、1:8、1:9的径高比进行装柱，配制浓度为200 μg/mL，溶液pH为8糖熏色素溶液，并测定其初始吸光度。按照1.0 mL/min的流速进行上样，每5 mL收集1管流出液，并测定其吸光度。当流出液的吸光度为上样液吸光度值的10%时，表明此时大孔树脂已吸附饱和，此时流出液的体积记录为泄漏点，吸附时间记录为泄露时间。

1.2.6.2 上样流速的选择 将处理活化后的XAD-7型树脂按照1:6的径高比进行装柱，配制浓度为200 μg/mL，溶液pH为8糖熏色素溶液，并测定其初始吸光度。分别按照0.5、1.0、1.5 、2.0、2.5 mL/min的流速进行上样，每5 mL收集1管流出液，并测定其吸光度。当流出液的吸光度为上样液吸光度值的10%时，记录流出液的体积（泄露点）以及泄露时间。

1.2.6.3 样液浓度的选择 将处理活化后的XAD-7型树脂按照1:6的径高比进行装柱，配制浓度为100、200、300、400、500 μg/mL，溶液pH为8糖熏色素溶液，并测定其初始吸光度。按照2.0 mL/min的流速进行上样，每5 mL收集1管流出液，并测定其吸光度。当流出液的吸光度为上样液吸光度值的10%时，记录流出液的体积（泄漏点）以及泄露时间。

1.2.7 动态解吸条件的优化

1.2.7.2 洗脱流速的选择 将充分活化后的XAD-7型树脂按照1.2.6确定的最佳动态吸附工艺吸附完成后以40%的乙醇浓度，分别按照0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL/min的流速进行动态解吸，每5 mL收集1管洗脱液，并测定其吸光度，当吸光度值等于零时表明洗脱结束。根据洗脱过程中最大吸光度值的不同，计算不同乙醇浓度对XAD-7型树脂动态解吸率的影响。

1.2.8 纯化效率的测定 按静态和动态最佳工艺收集糖熏色素溶液后冻干，分别配置未纯化、静态工艺纯化、动态工艺纯化三种糖熏色素溶液（50 μg/mL），并于280 nm下测定各组溶液的吸光度值，每组平行测的3次，纯化效率的测定方法如下：

1.2.9 稳定性研究

1.2.9.1 光照稳定性 将经XAD-7树脂纯化后的糖熏色素配制成50 μg/mL的溶液，并测定其初始吸光度（A3），然后将配制完成后的溶液分成两组，分别在避光、室内自然光的条件下放置，分别于1、4、8、12、24 h和2、3、4、5、6 d后测定溶液的吸光度值（A4），每组平行测定3次，降解率的计算公式如下：

1.2.9.2 热稳定性 将经XAD-7树脂纯化后的糖熏色素配制成50 μg/mL的溶液，并测定其初始吸光度，然后分别将色素溶液在4、20、30、40、50、60、70、80、90、100 ℃的条件下放置120 min后测定溶液的吸光度值，每组平行测定3次，降解率的计算公式同1.2.9.1。

1.3 数据处理

采用Excel 2013对数据进行数据统计分析，Origin 9.0绘制图形。

2 结果与分析

2.1 最大吸收波长的确定

由图1可知，糖熏色素溶液在220～600 nm的波长范围扫描时，于280 nm处有一个十分明显的吸收峰。因此对于后续糖熏色素的纯化工艺以及稳定性研究，可以把此波长作为测定时的特征波长。与此同时，糖熏色素的最大吸收峰与焦糖类色素的吸收峰完全一致，均在280 nm处有最大吸收峰，这说明糖熏色素可能为焦糖类色素[17-18]。目前焦糖类色素主要可以分为以下四类：普通焦糖（I）；亚硫酸盐焦糖（II）；氨法焦糖（III）；亚硫酸铵法焦糖（IV）。糖熏色素的最大吸收波长只有280 nm，因此可以推测糖熏色素中主要成分为普通焦糖（I），即I类焦糖色素，研究表明I类焦糖色素是一种安全无毒的食用色素，基本不含4-甲基咪唑等高致癌性物质[19-20]。因此糖熏色素具有较高的安全性。

抠像是后期剪辑中常用的一种技术手法，目前使用最为广泛就是色度键抠像，它是一种基于RGB模式的抠像技术，可以利用画面的色度差异，将素材中一种颜色或颜色范围去掉。实际操作时应该注意，前景物体中不能包含所采用的背景颜色[4]。

图1 糖熏色素的紫外-可见光谱图Fig.1 UV-visible spectra of the sugar-smoking pigment

2.2 最佳大孔吸附树脂的筛选

不同型号的大孔吸附树脂的孔径、极性和比表面积都各不相同（），所以对色素溶液的吸附和解吸能力也不同。从表2中可以看出，7种不同的大孔吸附树脂对糖熏色素溶液都具有不同程度的吸附纯化效果，但相比与其他6种树脂，XAD-7型树脂对糖熏色素展现出了最佳的吸附与解吸性能。这可能是因为XAD-7型树脂相比于其他6种树脂，具有更高的极性、表面积以及较小的粒径范围。大孔吸附树脂本身的极性与被吸附的色素分子的极性相近或比表面积较大时会产生较好的吸附效果[21]。因此选择XAD-7型大孔吸附树脂为纯化糖熏色素的最佳树脂。

2.3 静态吸附工艺研究

2.3.1 糖熏色素粗提液浓度的影响 从图2中可知，随着糖熏色素粗提液浓度的增加，XAD-7型大孔吸附树脂对糖熏色素的吸附能力显著增加（P＜0.05）。当糖熏色素浓度为60 μg/mL时，XAD-7型树脂吸附率达到最大值80.32%±0.03%，随后吸附率显著下降（P＜0.05）。这可能是由于当糖熏色素溶液浓度较低时，溶液中的糖熏色素分子能够与大孔吸附树脂充分接触，使分子能够快速扩散至树脂内部而被吸附。而当溶液浓度过大时，分子之间的竞争效应产生一定的排斥力，使得色素不能与树脂充分结合，进而导致吸附率降低[22]。故在进行糖熏色素静态吸附时，优选糖熏色素粗提液浓度为60 μg/mL。

2.3.2 糖熏色素粗提液pH的影响 XAD-7型大孔吸附树脂是含有聚烷酯的强酸性树脂，一般在所有pH范围内均能起交换作用[23]。由图3可以看出，当糖熏色素粗提液pH从5.0上升到8.0时，XAD-7型树脂对糖熏色素的吸附率显著增加（P＜0.05），在pH为8.0时其吸附率达到最大值65.29%±0.09%，而当样液pH从8.0增加到10.0时，XAD-7型树脂的吸附率逐步下降。原因可能是因为在强碱性环境下，XAD-7型树脂对糖熏色素的吸附亲和力降低，进而吸附量降低，且过碱性的溶液会减少XAD-7树脂的使用寿命[24-25]。故在进行糖熏色素静态吸附时，优选糖熏色素粗提液浓度的pH为8.0。

2.3.3 吸附温度的影响 从图4中可以看出，随着吸附温度的升高，XAD-7型树脂对糖熏色素的吸附率显著上升（P＜0.05），当吸附温度为35 ℃时其吸附率达到最大值67.11%±0.14%。温度在35～45 ℃范围内，吸附率随温度的升高而显著降低（P＜0.05）。这可能是因为由于温度逐渐升高，加剧了分子间自由运动，吸附自由能的绝对值减小，从而使得XAD-7型树脂与糖熏色素分子之间的吸附力减弱，整个体系的混乱度增加，进而使得吸附率显著降低[26]。因此选择35 ℃为糖熏色素的最佳静态吸附温度。

表2 不同类型大孔树脂吸附与解吸性能比较Table 2 Comparison of adsorption and desorption capacity between different macroporous resins

图2 样液浓度对XAD-7型大孔树脂静态吸附效果的影响Fig.2 Effect of sample concentration on the static adsorption capacity of XAD-7 resin

图3 样液pH对XAD-7型大孔树脂静态吸附效果的影响Fig.3 Effect of pH on the static adsorption capacity of XAD-7 resin

图4 温度对XAD-7型大孔树脂静态吸附效果的影响Fig.4 Effect of temperature on the static adsorption capacity of XAD-7 resin

2.4 静态解吸工艺研究

2.4.1 乙醇浓度的影响 由图5可知，随乙醇溶液浓度的增加，糖熏色素在乙醇溶液中的解吸率逐渐提高，当乙醇溶液浓度大于40%时，解吸效果并没有发生显著性的改变（P＞0.05）。这可能是由于随着乙醇溶液浓度的增加，大孔树脂与糖熏色素分子之间的相互作用力大于乙醇溶液与糖熏色素分子之间的相互作用力，使得糖熏色素不能够从树脂中脱离到乙醇溶液中[27]。因此从溶液效率方面考虑，优选浓度为40%的乙醇溶液作为糖熏色素的解吸液。

图5 乙醇浓度对XAD-7型大孔树脂静态解吸效果的影响Fig.5 Effect of ethanol concentration on the static desorption capacity of XAD-7 resin

2.4.2 解吸液pH的影响 由图6可知，随着解吸液pH的增加，XAD-7型树脂的解吸率逐渐增加，当pH为10.0时，其解吸率达到最大值85.82%±0.22%。随着pH的继续增大，其解吸率显著降低（P＜0.05）。原因可能是糖熏色素在碱性条件下溶解度降低而易被洗脱有关，而当碱性过强时，可能影响了糖熏色素分子结构导致解吸率降低[28]。因此选择解吸液的pH为10.0。

图6 解吸液pH对XAD-7型树脂静态解吸效果的影响Fig.6 Effect of pH value on the static desorption capacity of XAD-7 resin

2.4.3 解吸温度的影响 由图7可知，随着解吸温度的升高，XAD-7型树脂对糖熏色素的解吸率显著上升（P＜0.05），当解吸温度达到40 ℃时，其解吸率达到最高值87.82%±0.12%。当温度继续上升时，其解吸率显著下降（P＜0.05）。因此选择温度为40 ℃为最佳静态解吸温度。

2.5 动态吸附工艺研究

图7 温度对XAD-7型大孔树脂静态解吸效果的影响Fig.7 Effect of temperature on the static desorption capacity of XAD-7 resin

2.5.1 径高比的影响 由表3可知，不同的径高比对糖熏色素的动态吸附效果各不相同，相比于其它4种径高比，当径高比为1:6时，泄漏点出现最早，且泄露时间最短。吸附树脂装入玻璃柱中的高度和柱子的直径对吸附速度会产生影响，在一定范围内，装入柱子的吸附树脂的高度越低，吸附速度越快，单柱的吸附量降低。而玻璃柱的粗细对大孔吸附树脂的分离效果有所影响，如若柱子过细，在进行洗脱色素时，大孔吸附树脂容易出现结块的现象，玻璃柱的壁上会有较多气泡产生，使得流速渐渐降至零[29]。从实际生产效率考虑，优选柱径高比1:6。

表3 径高比对XAD-7型大孔树脂动态吸附效果的影响Table 3 Effect of different ratio of column diameter on dynamic adsorption of XAD-7 resin

2.5.2 上样流速的影响 由表4可看出，在流速为2.5 mL/min时，泄漏点出现过早，糖熏色素分子还未完全扩散进入XAD-7型大孔树脂内就被水流冲出，导致吸附效果差。而流速0.5、1.0、1.5 mL/min时，虽然泄露时间足够长，利于大孔树脂的吸附作用，但是耗时过长。其主要原因可能是由于糖熏色素分子在大孔树脂内部的扩散作用会随着流速的变化而发生变化。上样流速过快，色带容易拖长，在单位体积内的洗脱效果降低，乙醇溶液用量增加，导致成本增加；若上样时的流速过慢，则洗脱时间过长，从而使得生产效率变低，所以要选择适当的洗脱速度[30]。因此根据实际生产需要，选择2.0 mL/min的流速。

2.5.3 上样浓度的影响 从表5可以看出，随着上样浓度的增加，XAD-7型大孔树脂在吸附作用下泄漏点出现的时间越早。若上样浓度过大，树脂会在短时间达到吸附饱和，导致较早出现泄漏点。但上样浓度过小时，又会导致吸附时间过长，并且色素吸附能力差，对色素吸附的量少，效率低下[31]。综合考虑，选择浓度400 μg/mL为最优上样浓度。

表4 上样流速对XAD-7型大孔树脂动态吸附效果的影响Table 4 Effect of flow rate on dynamic adsorption of XAD-7 resin

表5 上样浓度对XAD-7型大孔树脂动态吸附效果的影响Table 5 Effect of sample concentration on dynamic adsorption of XAD-7 resin

2.6 动态解吸工艺研究

2.6.1 乙醇浓度的影响 由图8可知，乙醇浓度对XAD-7型树脂的动态解吸率随乙醇浓度的增大而逐渐增加，40%的乙醇浓度时其动态解吸率达到最大值93.02%±1.06%。当乙醇浓度增加到50%时，其解吸效率并未显著上升（P＞0.05）。综合生产效率与解吸率来看，选择40%乙醇为XAD-7型树脂动态解吸液。

图8 乙醇浓度对XAD-7型大孔树脂动态解吸效果的影响Fig.8 Effect of ethanol concentration on the dynamic desorption capacity of XAD-7 resin

2.6.2 洗脱流速的影响 由图9可知，随着洗脱流速的增大，XAD-型大孔树脂的动态解吸率逐渐上升，当洗脱流速为1.5 mL/min时，其解吸率达到最高值93.75%±0.6%。随着洗脱流速的继续增加，其动态解吸率显著下降（P＜0.05），其主要原因可能是因为当洗脱流速较快时，洗脱液来不及与大孔树脂充分接触，使得糖熏色素不能被完全洗脱，最终使得动态解吸率下降[32]。因此，综合考虑，选择1.5 mL/min的流速为最佳洗脱流速。

2.7 纯化效果评价

图9 洗脱流速对XAD-7型大孔树脂动态解吸效果的影响Fig.9 Effect of flow rate on the dynamic desorption capacity of XAD-7 resin

由图10（a）可知，在相同的质量浓度下，与未纯化的糖熏色素溶液相比，经静态以及动态工艺纯化后糖熏色素溶液的吸光度值均显著上升（P＜0.05），分别提高45.13%和36.55%。同时，由图10（b）可知，经两种工艺纯化后，糖熏色素溶液的色泽以及澄清度发生明显改变，纯化后的溶液澄清透明且呈现亮黄色。上述结果表明，两种纯化工艺对糖熏色素均匀较好的纯化效果。

图10 不同工艺纯化效果对比Fig.10 Comparison of purification effects of different processes

2.8 稳定性研究

2.8.1 光照稳定性 由图11可知，随着贮藏时间的延长，糖熏色素在自然光下的降解率显著增加（P＜0.05），第6 d时其降解率达到75.34%±0.43%，说明该色素对自然光的耐受性不强。而在避光保存的条件下，糖熏色素降解率显著降低（P＜0.05），第6 d时其降解率为52.12%±0.04%。说明光照可能会对糖熏色素的结构造成一定程度的破坏而使得其色价降低。因此，糖熏色素应尽量避光保存。

图11 光照对糖熏色素稳定性的影响Fig.11 Effect of light on the stability of sugar-smoking pigment

2.8.2 热稳定性 由图12可知，随着温度的升高，糖熏色素的降解率缓慢增加，温度上升到50 ℃时，其降解率发生显著改变（P＜0.05）。当处理温度达到100 ℃时,其降解率为6.04%±0.75%，此时的糖熏色素基本保持稳定。因此，高温环境并不易使糖熏色素的结构发生改变，说明糖熏色素具有较高的热稳定性。

图12 温度对糖熏色素稳定性的影响Fig.12 Effect of temperature on the stability of sugar-smoking pigment

3 结论

XAD-7型大孔吸附树脂在所选择的7种不同类型的树脂中综合效果最好,其对糖熏色素的吸附率和解吸率分别为62.33%和91.97%。利用XAD-7型树脂对糖熏色素进行纯化研究，得到最佳纯化工艺为：粗提液浓度60 μg/mL，吸附液pH8.0，吸附温度35 ℃，解吸液40%乙醇，解吸液pH10.0，解吸温度40℃为最佳静态纯化工艺；径高比1:6，上样流速2.0 mL/min，上样浓度400 μg/mL；洗脱液40%乙醇，洗脱流速1.5 mL/min为最佳动态纯化工艺。经纯化后的糖熏色素固体呈棕褐色，溶液澄清且呈现亮黄色，对光照敏感但具有较强的热稳定性。初步推测糖熏色素中主要成分为普通焦糖色素（I），即I类焦糖色素，是一种安全无毒的可食用色素。此研究可为后续糖熏色素具体结构鉴定及上色机理的探究提供理论依据。