AFP及PIVKA-Ⅱ在HBV相关肝细胞癌中的临床价值研究

高小坚，秦雪

（1.广西医科大学第一临床医学院，广西 南宁 530000；2.广西中医药大学附属瑞康医院检验科，广西 南宁 530000）

0 引言

肝细胞癌 (hepatocellular carcinoma, HCC) 是原发性肝癌的主要病理类型, 是我国最常见的恶性肿瘤之一，在广西地区乙型肝炎病毒感染是肝细胞癌发生的高危因素[1,2]。筛查肝细胞癌一般依靠影像学和病理学，但因影像学检查敏感性低，病理活检难度大有创伤性，增加了肝细胞癌早期筛查的困难。目前临床上常用甲胎蛋白(AFP)和维生素K缺乏或拮抗剂诱导蛋白(PIVKA-Ⅱ)作为早期肝细胞癌的血清学生物筛查指标，但在乙型病毒感染相关的肝细胞癌中诊断价值研究较少，因此本研究旨在分析HBV相关肝病患者血清中甲胎蛋白(AFP)和维生素K缺乏或拮抗剂诱导蛋白(PIVKA-Ⅱ)的含量， 绘制单独检测的ROC曲线 ,再通过建立Logistic回归模型并绘制ROC曲线评价联合检测AFP及PIVKA-Ⅱ的诊断价值。

1 材料与方法

1.1 入组资料

选择2019年8月至2020年7月在广西中医药大学附属瑞康医院确诊为HBV相关肝病患者作为研究对象,入组标准如下: (1)入院后进行肝功能、乙肝肝炎病毒五项等实验室检查及B超、CT、MRI等影像学检查,且病历资料完整; (2)HBsAg阳性; (3)诊断依据《慢性乙型肝炎防治指南》（2019年版）[3]、《原发性肝癌诊疗规范》（2019年版）[4]等国家卫计委、国家中医药局发布或相关专业学会和临床标准组织制定的最新诊疗指南; (4)排除胆汁性肝硬化和严重黄疸患者以及维生素K缺乏接受华法林治疗的患者。共有165例患者入组并按HBV相关肝细胞癌组、HBV相关肝硬化组和慢性乙型肝炎组进行分组。该研究经广西中医药大学附属瑞康医院伦理委员会批准。

1.2 方法

采集入组患者清晨空腹状态下外周静脉血3～4mL于干燥管内，常温保存，2小时内送检，由经过专业培训的技术人员严格按照仪器操作说明书和试剂盒说明书进行操作和检测。采用μTASWako i30 全自动电泳荧光免疫分析仪和AFP、PIVKA-Ⅱ检测试剂盒（日本富士胶片和光纯药株式会社）进行检测。

1.3 统计学处理

采用SPSS 26.0软件进行统计分析。采用χ2检验比较三组患者性别和年龄的关系。PIVKA-Ⅱ、AFP用中位数/四分位数[M(P25～P75)]表示，多组之间比较采用 Kruskal-Wallis H 检验，两两比较用Mann-Whitney U检验。将PIVKA-Ⅱ、AFP作为自变量建立肝细胞癌诊断的 Logistic回归模型。绘制单独检测和联合检测的ROC曲线，计算曲线下面积，分析诊断的敏感性和特异性。所有分析采用双侧检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料比较

HBV相关肝细胞癌组、HBV相关肝硬化组和慢性乙型肝炎组在年龄和性别的差异无统计学意义。( 见表1)

2.2 三组受检者的血浆PIVKA、AFP检测结果比较

HBV相关肝细胞癌组患者在血清PIVKA-Ⅱ和AFP的表达水平上显著高于HBV相关肝硬化组及慢性乙型肝炎组，差异具有统计学意义(P＜0.05)，但HBV相关肝硬化组与慢性乙型肝炎组患者在PIVKA-Ⅱ和AFP水平上差异无统计学意义（P＞0.05），具体见表2。

表1 三组患者的基本资料

表2 三组PIVKA-Ⅱ、AFP的浓度比较

2.3 血清AFP和PIVKA-Ⅱ单独及联合检测在HBV相关肝细胞癌中诊断性能的评价

使用SPSS绘制血清AFP和PIVKA-Ⅱ含量诊断HBV相关肝细胞癌的ROC曲线，单独检测时PIVKA-Ⅱ的曲线下面积（AUC）较大为0.974( 95%CI 0.949-1.000)，敏感度和特异度为94.7%和91.7%，AFP的AUC、敏感度、特异度分别为0.913(95%CI 0.861-0.964)、84.2%、90.7%。以是否为HBV相关肝细胞癌为因变量，PIVKA-Ⅱ、AFP检测结果为自变量，建立Logistic回归模型，绘制联合诊断HBV相关肝细胞癌的ROC曲线，AUC为0.983(95%CI 0.962-1.000)，敏感度和特异度为93%和96.3%，优于血清AFP和PIVKA-Ⅱ单独检测模型，是诊断HBV相关肝细胞癌的最佳诊断模型。（见图1和表3）

表3 PIVKA-Ⅱ、AFP及两者联合检测对诊断HBV相关肝细胞癌的敏感度和特异度

图1 PIVKA-Ⅱ、AFP及两者联合检测对诊断HBV相关肝细胞癌的ROC曲线

3 讨论

肝细胞癌，是原发于肝脏的上皮性恶性肿瘤，占原发性肝癌的90%以上，是目前我国最常见的肿瘤之一。在我国肝癌新发病例中，男性的比例是72.8%，这与本研究中男性患病比率高相同，男女性别在肝癌发病率中的差异原因考虑与男女体内激素与生活习惯的不同有关[5]。异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)是一种在肝细胞合成过程中缺乏维生素K而导致合成缺陷的凝血酶原, 无凝血功能。肝细胞癌时,由于癌细胞对凝血酶原前体的合成发生异常，凝血酶原前体羧化不足, 生成大量的PIVKA-Ⅱ[6]，因此PIVKA-Ⅱ可作为辅助诊断肝细胞癌的肿瘤标志物,其与AFP的联合检测目前已广泛应用于临床。

在本研究中，HBV相关肝细胞癌、肝硬化组和慢性乙型肝炎组之间的男女比例和年龄构成无统计学差异，研究的各项指标具有可比性。本研究显示，血清PIVKA-Ⅱ、AFP含量在肝细胞癌组明显高于肝硬化组和慢性肝炎组，但在HBV相关肝硬化组和慢性乙型肝炎组之间没有明显差异，表明PIVKA-Ⅱ、AFP在HBV相关肝细胞癌中均有较高的诊断价值。根据ROC曲线分析，PIVKA-Ⅱ、AFP取截断值34 mAU /mL和29.84 ng/mL时，AFP诊断HBV相关肝细胞癌的敏感度和特异度分别为84.2%、90.7%，PIVKA-Ⅱ的敏感度和特异度为94.7%和91.7%，联合检测的敏感度和特异度为93%和96.3%，单独检测时，PIVKA-Ⅱ的诊断性能优于AFP，联合检测可以提高特异度，这与Li[7]等的研究一致，而Wu[8]的研究也显示PIVKA-II在诊断早期HCC方面比AFP更有效。分析单独和联合检测的曲线下面积AUC ：PIVKA-Ⅱ+AFP ＞PIVKA-Ⅱ＞AFP，联合检 测PIVKA-Ⅱ和AFP对HBV相关肝细胞癌的总体诊断性能最佳，而Yang[9]的研究也表明，与单独使用AFP或PIVKA-II相比，PIVKA-II和AFP的组合在将HBV相关肝细胞癌患者与慢性乙型肝炎或HBV相关肝硬化患者区分开时显示出更高的诊断准确性。

综上所述，PIVKA和AFP在区分HBV相关肝细胞癌和HBV相关非肝细胞癌之间有重大意义，单独检测时，PIVKA在诊断HBV相关肝细胞癌上优于AFP，联合检测可提高诊断特异性且总体诊断性能最佳。因本实验纳入的研究对象较少，且有转移和复发病例，今后还需扩大实验例数，结合临床特征

以进一步探讨，为HCC的早期发现提供更可靠的依据。