血清神经元特异性烯醇化酶、血浆神经肽Y及振幅整合脑电图动态变化早期预测窒息新生儿缺血缺氧性脑病的意义

梁大康 李雪萍 陈洁静

广东省四会市人民医院，广东四会 526200

新生儿缺血缺氧性脑病（HIE）是足月新生儿 窒息后引发的严重且常见并发症，致死致残率较高，近年来新生儿脑损伤诊断广泛采用振幅整合脑电图（aEEG），其能连续动态监测，具图像直观、操作方便等优点[1]。但研究发现新生儿娩出后24 h内迅速确切的早期预测其脑部疾病的指标，能避免其脑损伤进一步加重[2]。因此寻求窒息新生儿HIE的早期生化指标、检测方法等具有显著的临床意义。多项研究发现新生儿HIE早期相关生化指标水平存在异常，如血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、血浆神经肽Y（NPY）等[3]。因此本研究通过aEEG动态监测及血清NSE、血浆NPY检查，早期预测窒息新生儿HIE，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2018年6月至2020年6月于我院NICU治疗足月窒息新生儿116例，为研究组，同期收集新生儿病房中无脑损伤足月新生儿58例，为对照组，且研究组据《新生儿窒息分度及诊断标准》[4]均分研究A组（轻度窒息）与研究B组（重度窒息），每组各58例。对照组中男32例，女26例，胎龄38～41周，平均（39.2±1.6）周，出生体重2668～3986 g，平均（3326.5±146.1）g，分娩方式：剖宫产18例、阴道助娩8例、自然分娩32例；研究A组中男30例，女28例，胎龄38～41周，平均（39.6±1.3）周，出生体重2713～3972g，平均（3342.5±157.3）g，分娩方式：剖宫产16例、阴道助娩9例、自然分娩33例；研究B组中男33例、女25例，胎龄38～41周，平均（39.4±1.5）周，出生体重2655～4000 g，平均（3327.8±151.7） g，分娩方式：剖宫产20例、阴道助娩8例、自然分娩30例。三组新生儿胎龄、性别、出生体重等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

纳入标准：三组新生儿胎龄均为38～41周；研究组均符合新生儿HIE的相关诊断标准；窒息新生儿均接受颅脑核磁共振成像（MRI）检查；三组新生儿体重范围2.5～4.0 kg；三组新生儿娩出后日龄≤7 d；家属均自愿参与，且签署知情书。排除标准：其他致新生儿Apgar评分低的疾病；伴有先天性心脏病等严重脏器类疾病；无法行aEEG、颅脑MRI图像分析。本研究经医院医学伦理委员会审核后通过。

1.2 方法

1.2.1 血清NSE、血浆NPY检查 均在娩出24 h、3 d及7 d时间点抽取静脉血5 ml，分两管，其中一管离心机离心后，获上层清液待检，另一管置于含抑肽酶、10%EDTA-Na2的试管，待混匀后于4℃下离心机离心，获血浆待检[5]。血清NSE采用全自动化学发光免疫分析仪[欧蒙医学诊断（中国）有限公司，型号：RAAnalyzer15]及其配套试剂盒诊断；血浆NPY采用放射免疫分析法及其配套试剂盒（北京科美东雅生物技术有限公司）诊断。

1.2.2 aEEG动态监测 在新生儿娩出6 h、3 d及7 d三个时间点采用aEEG监护仪（美国尼高力公司，型号：Nicolet EEG）分别动态监测其脑功能，时间均为3 h。aEEG电极位置使用国际通用10-20标准的8导联法，将电极头放置时需避开新生儿的前囟、颅缝及血肿等，且相邻的aEEG电极间距需＞75 mm。监测期间不可将阻抗超过20 kΩ。监测后记录数据，以半对数形式，且新生儿脑电活动的记录速度为6 cm/h，显像为振幅形式的波谱[6]。aEEG动态监测结果以背景活动评价。

1.3 观察指标

①三组新生儿不同时间点血清NSE、血浆NPY水平比较；②不同时间点背景活动与窒息程度的相关性。评价标准：正常：脑电图上出现连续性活动，且aEEG的上边界＞10 μV、aEEG的下边界＞5 μV；轻度异常：脑电图上出现不连续性活动，且aEEG的下边界呈可变性，且＜5 μV，但其上边界＞10 μV；重度异常：脑电图上出现连续性极低振幅活动，aEEG上下边界＜5 μV或上下浮动[7-8]。③窒息新生儿HIE的早期预测价值。计算公式为：敏感度=真阳性/（真阳性+假阴性）×100%；特异度=真阴性/（真阴性+假阳性）×100%；阳性预测值=真阳性/（真阳性＋假阳性）×100%；阴性预测值=真阴性/（假阴性＋真阴性）×100%；诊断符合率=（真阳性＋真阴性）/（真阳性＋假阳性＋假阴性＋真阴性）×100%。娩出第7天行颅脑MRI诊断，使用1.5TMRI（飞利浦医疗科技，型号：Achieva）成像系统扫描检查。诊断标准参照世界卫生组织公布的颅脑MRI诊断标准。

1.4 统计学方法

数据采用统计学软件SPSS 22.0处理，计量资料以（）表示，行Dunnett-t检验或Friedman（F）检验，计数资料以[n（%）]表示，行χ2检验，相关性采用Pearson分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组新生儿不同时间点血清NSE水平比较

研究B组娩出24 h、3 d、7 d的血清NSE水平、血浆NPY水平均高于对照组、研究A组（P＜0.05）；研究A组娩出24 h、3 d的血清NSE水平、血浆NPY水平均高于对照组（P＜0.05）；且娩出第7天对照组、研究A组血清NSE水平接近参考正常值上限16.3μg/L。见表1。

2.2 不同时间点aEEG背景活动与窒息程度的相关性

新生儿娩出后6 h、3 d及7 d时间点aEEG背景活动异常比例与其窒息程度存在正性相关（r=0.733、0.825，P＜0.05），且aEEG背景活动异常比例伴随新生儿窒息程度的增加而逐渐加重；新生儿娩出7 d时研究A组、研究B组中仍存在15例、31例aEEG背景活动异常。见表2。

2.3 窒息新生儿HIE的早期预测价值

研究A组窒息新生儿HIE早期预测的敏感度为87.2%、特异度为90.5%、预测符合率为91.4%；研究B组窒息新生儿HIE早期预测的敏感度为97.4%、特异度为84.2%、预测符合率为93.1%。见表3。

3 讨论

aEEG动态监测以其操作简单、便于新生儿床旁脑电监测等优势被高度关注及使用，因睡眠周期，足月正常新生儿的aEEG波谱表现为宽窄相间，且窄波谱带与动态睡眠、觉醒相关，宽波谱带与安静睡眠相关。而与常规脑电监测相比较，aEEG监测时使用的电极少，操作方便，对安静环境的要求相对低，脑电波谱图形直观，易于分析，且能长时间内连续记录，适合窒息新生儿脑功能的动态监测[9-10]。而近年来发现血清NSE及血浆NPY检查在窒息新生儿HIE的疾病诊断中具有密切相关性。因此本研究通过振幅整合脑电图动态监测及血清NSE、血浆NPY检查，早期预测窒息新生儿HIE。

表1 三组新生儿不同时间点血清NSE水平比较（x ± s，μg/L）

表2 不同时间点aEEG背景活动与窒息程度的相关性[n（%）]

表3 窒息新生儿HIE的早期预测价值

临床研究发现新生儿HIE是由多种因素诱导的缺氧、脑血流量减少，从而致脑组织损伤，但研究认为其是由多种因素介导、参与的[11-12]。经新生儿血清NSE及血浆NPY检测，分析不同娩出时间点新生儿血清NSE及血浆NPY水平，结果显示，研究B组娩出24 h、3 d、7 d的血清NSE水平均高于对照组、研究A组，上述结果与黄家琴等[13]研究结果近似，提示伴随日龄的增加，新生儿的血清NSE水平明显下降，其中轻度窒息新生儿在娩出7 d时血清NSE水平趋于正常参考值的上限，但重度窒息新生儿在娩出7 d时血清NSE仍处于较高水平。血清NSE主要存在于神经纤维、神经元及神经的内分泌细胞，占在脑内全部可溶性蛋白中的占比为1.5%，其是大脑神经元受损的敏感性、特异性标志，研究报道围生期新生儿在窒息后期血清NSE水平升高是可诊断严重缺氧缺血性脑损伤的重要的指标[14-15]。NSE为糖酵解酶，参与新生儿脑组织糖酵解过程，且血清NSE水平的高低能直观反映脑神经元的损伤严重程度及损伤范围的大小，而当窒息后新生儿脑组织损伤越严重，其NSE合成释放的越多[16]。因此认为围生期窒息新生儿检测其血清NSE水平最佳准确时间点为娩出24 h，该时间点预测诊断价值最大。不同时间点血清NPY检查结果提示重度窒息新生儿的血浆水平在娩出24 h、3 d、7 d的三个时间点高于轻度窒息新生儿，且在娩出24 h时浓度最高。NPY为神经调节因子，广泛存在于交感神经末梢与中枢神经系统的神经递质中，是一种能强收缩血管的因子，可调节脑内抑制-兴奋平衡及行为，且能直接对血管平滑肌产生作用，抑制舒血管因子及增强其他缩血管因子的作用，从而影响脑组织发育[17]。相关文献报道，血浆NPY水平与新生儿HIE的脑损伤存在密切相关性。HIE会致使以神经核损伤为主的脑组织损伤，且当机体处于应激状态时，反射兴奋新生儿的交感-儿茶酚胺系统，从而导致血浆NPY水平释放量增加[18]。因此窒息新生儿HIE早期预测，通过检查娩出24 h时间点的血浆NPY水平能有效早期预测疾病。

文献报道aEEG动态监测在新生儿HIE的早期预测中具有显著意义[19]。通过aEEG动态监测窒息新生儿，研究发现新生儿娩出后6 h、3 d及7 d时间点aEEG背景活动异常比例与其窒息程度存在正性相关，且aEEG背景活动异常比例伴随新生儿窒息程度的增加而逐渐加重，证实使用aEEG能早期发现窒息后患儿HIE，且能预测不同窒息程度新生儿HIE病情。本研究经过监测发现新生儿娩出7 d时研究A组、研究B组中仍存在15例、31例aEEG背景活动异常，表明患儿在娩出后7 d的aEEG图像存在异常，代表其神经系统功能性恢复不好，因此使用aEEG可早期诊断窒息新生儿的脑组织损伤，评估其脑功能状态。因此通过aEEG动态监测窒息新生儿的脑电信号，分析新生儿娩出后6 h的aEEG背景活动，可早期预测其脑损伤程度，早期预测HIE。经过诊断研究A组窒息新生儿HIE早期预测符合率为91.4%；研究B组预测符合率为93.1%，表明血生化指标联合aEEG动态监测，能加强对新生儿HIE的预测诊断，避免因aEEG独立诊断病情增加误判率。

综上所述，aEEG动态监测以及血清NSE、血浆NPY检查早期预测窒息新生儿HIE，具有显著应用价值，预测符合率较高，值得推广。