贵阳市奶牛结核病感染情况调查与分析

徐春志 ，张 海 ，蔺俐仲 ，杨齐心 ，杨 源 ，刘 艳 ，邓珊珊 ，袁翠霞 ，景书灏 ，李照伟

（1.贵阳市动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550081；2.贵阳市草地站，贵州 贵阳 550081；3.贵州省畜禽遗传资源管理站，贵州 贵阳 550081；4.贵阳市清镇市农业农村局，贵州 贵阳 551400；5.贵州省动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550081）

牛结核病（Bovine tuberculosis）是由牛结核分枝杆菌引起的一种人畜共患慢性消耗性传染病，牛、羊、猪等多种动物易感，其中以奶牛最为易感。该病广泛分布于世界各地[1-2]。奶牛感染后可引起乳房炎、结核性胸膜炎等疾病，还可造成产乳率和乳品质下降[3]。该病的特征是在多种组织和器官内形成结节性肉芽肿，使机体呈现慢性消耗性病变[4]。世界动物卫生组织(OIE)将牛结核病列为B类动物疫病，我国农业农村部将其列为二类动物传染病[5-6]。牛结核病还是威胁人类健康的传染病，每年都有一定数量的人受到感染。1979年、1985年和1990年3次全国结核病流行病学调查结果显示，由牛型分枝杆菌导致的结核菌病所占比例分别为3.8%、4.2%和6.4%[7]。据世界卫生组织（WHO）估算，全球结核病潜伏感染人群约有17亿，占总人群的1/4左右。2018年，全球新发结核病患者约为1000万。

近年来，按照“奶瓶子”市长负责制的具体要求，贵阳市大力发展生态畜牧养殖业，从国内外引进大量奶牛，贵阳市奶牛养殖量占到贵州省总体养殖量的90%以上。为了解贵州省贵阳市2018～2020年奶牛结核病流行情况，本研究对全市7个奶牛养殖场的28781头奶牛进行了检测，以期为贵阳市奶牛场结核病的综合防控提供流行病学调查依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样本来源。2018～2020年，在贵阳市息烽县、观山湖区、清镇市、修文县和开阳县的7个规模化奶牛场，共计检测奶牛28781头。

1.1.2 检测试剂。提纯牛结核菌素购自哈药集团生物疫苗有限公司。

1.2 方法

1.2.1 检测方法。按照中华人民共和国国家标准《动物结核病诊断技术》（GB/T 18645-2002）中牛分枝结核杆菌PPD皮内变态反应试验要求进行检测，分别于注射前、注射后12 h、24 h和72 h测量皮肤厚度，并计算皮肤厚度差。

1.2.2 数据分析。根据不同年份和不同养殖场的检测结果，采用Excel软件进行统计分析。

2 结果

2.1 不同年份奶牛结核病检测结果

对贵阳市2018～2020年牛结核病感染情况采用牛分枝结核杆菌PPD皮内变态反应试验进行检测，对检测结果进行统计。统计结果见表1。统计结果显示，牛结核病个体阳性率为0.066%（19/28781），奶牛场群体阳性率为19.05%（4/21）；2018年的阳性率最低，为0.01%（1/10983），2019 年的阳性率为 0.02%（2/9817），2020年的阳性率最高，为0.20%（16/7981）。2020年的阳性率是2018年的20倍，是2019年的10倍。说明近3年来贵阳市奶牛牛结核病阳性率呈现上升趋势。

表1 不同年份奶牛结核病检测结果统计

2.2 不同奶牛场结核病检测结果

对贵阳市7个规模化奶牛场采用牛分枝结核杆菌PPD皮内变态反应试验进行检测，检测结果见表2。表2显示，3年内共计检测28781头奶牛，其中奶牛场A的阳性率最高，为0.20%（6/2974），奶牛场B的阳性率为0.14%（13/9109），其余奶牛场均未检测出阳性牛。

表2 不同奶牛场奶牛结核病检测结果

3 讨论

奶牛结核病多侵害肺、乳房、肠和淋巴结等器官和组织，以出现组织和器官的结核结节性肉芽肿和干酪样、钙化坏死病灶为特征，病程呈慢性经过，表现为进行性消瘦，咳嗽、呼吸困难等症状。调查结果显示，贵阳市存在奶牛结核病感染情况，但感染率较低，仍保持在国家控制标准以内。针对这一情况，今后宜实行检疫和扑杀相结合的防控策略。

从全国来看，罗鹏飞等[9]2015～2019年对新疆阿勒泰地区8个乡镇的64442头牛进行了结核病监测，发现平均阳性率为0.18%。赵燕娟等[10]2016～2017年分别从甘肃、青海、西藏、四川4省区随机采集牛血清1252头份，采用ELISA方法对其进行抗体检测，发现牛结核病总抗体阳性率达0.8%。张喜悦等[11]2018年对北方某地区33个奶牛场的990份全血进行牛结核病调查，采用γ-干扰素ELISA诊断试剂盒进行检测，结果显示个体阳性率为13.99%，群体阳性率为51.51%。李智勇[12]对内蒙古地区15个奶牛养殖场的2112份血清进行了奶牛结核病调查，结果显示平均阳性率为5.6%（0%～22.9%）。邴睿[13]在2011年10月至2012年6月间，对新疆、河北、宁夏等12个省区的29个县共97个场村的1187头奶牛进行了牛结核病检测，经采用γ-干扰素酶联免疫试验检测筛选，发现阳性率为24.1%。以上数据表明，牛结核病在大部分省区都有存在，因此在调运和引种时必须严把奶牛检疫关。

目前，常用的牛结核病诊断方法有牛结核菌素皮内变态反应、γ-干扰素 ELISA试验和 PCR （荧光PCR）方法。牛结核菌素皮内变态反应的优点是对操作人员的专业水平要求比较低，经简单培训后就能上手，所需的结核菌素抗原也比较便宜。该方法的缺点是操作步骤繁琐，耗时耗力，容易出现非特异性反应，重复性不好。γ-干扰素ELISA试验的优点是可以检测早期感染牛只，特异性较好，易于标准化。缺点是需要在采血后2 h内检测且试剂盒成本较高。PCR（荧光PCR）方法的优点是具有高敏感性和强特异性，可以检测临床症状不明显的隐性感染和初期感染，且重复性较好。缺点是对检测人员的专业素质要求高、检测仪器和检测试剂昂贵、对试验环境要求高，因此很难在基层推广。