Ash2L、抗内皮细胞抗体与川崎病患儿冠脉血管损伤的关系

冯迎军，王芳洁，吕爱婷，孙琪青

（郑州大学附属儿童医院 河南省儿童医院 郑州儿童医院，河南 郑州450018）

川崎病属于一类全身血管性炎症疾病,炎症反应的过度活化诱发血管基质代谢异常可造成冠状动脉损伤,因此冠状动脉损伤是川崎病发生率最高的并发症,但截至目前川崎病异常炎症反应的相关机制尚不明晰[1]。相关研究[2,3]结果显示内皮细胞的功能紊乱和损伤可能是川崎病并发血管类并发症的重要原因，但具体还需要进一步研究证实。

血管内皮细胞抗体（anti-endothelial cell antibody，AECA） 可在多种血管炎症免疫疾病中遇到，其属于血管内皮细胞表面的异质性抗体,系统性红斑狼疮等多种常见血管炎症疾病中均发现AECA不仅是炎症和血管损伤的标记,还可能参与疾病的发生、发展过程[4]。Ash2 样蛋白（Ash2-like protein，Ash2L）是重要的炎症介导蛋白，相关研究[5]已经证实其在白细胞分化阶段起重要作用。本研究探讨了Ash2L、AECA 与川崎病患儿冠脉血管损伤的关系,旨在为临床川崎病的治疗和预后提供更多的数据参考，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取 2017 年 1 月-2019 年 2 月在我院治疗的川崎病患儿87 例（观察组），其中伴有冠脉损伤患儿50 例，纳入标准：⑴川崎病诊断符合《小儿川崎病的临床诊断标准》中的标准[6]；⑵均为初治急性期患儿；⑶患儿监护人知情同意。排除标准：合并有恶性肿瘤、血液系统疾病、免疫系统疾病等。同时选取健康儿童80 例作为对照组（血常规、肝肾功等无异常），观察组和对照组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 观察组和对照组一般资料比较

1.2 实验方法 取所有患者空腹静脉血5ml，3000r/min 离心10min 后分离上清并分成两份，分别检测血清Ash2L 和AECA,酶联免疫法检测血清Ash2L和AECA 水平，酶标仪购于美国贝克曼公司，血清Ash2L 和AECA 试剂盒购于南京建成生物研究所；超声心动图检测观察组左冠状动脉内径（LCA）/主动脉瓣环内径（AAO）。

1.3 冠脉损伤标准 采用超声心动图进行判断[8]：⑴出现冠状动脉内膜回声增强； ⑵左冠状动脉内径超邻近节段内径的1.5 倍； ⑶左冠状动脉内径（LCA）/主动脉瓣环内径（AAO）＞0.2。

1.4 统计学处理 统计分析采用SPSS22.0 软件，计量资料采用（±s)表示，两组间比较使用t 检验，计数资料采用频数或百分比表示，两组间比较使用非参数χ2检验，相关性采用Pearson 相关分析。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 观察组和对照组血清Ash2L、AECA 水平比较观察组血清Ash2L 和AECA 明显高于对照组，差异比较有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 观察组和对照组血清Ash2L、AECA水平比较

2.2 观察组有无冠脉损伤患儿血清Ash2L、AECA及LCA/AAO 比较 有冠脉损伤患儿血清Ash2L、AECA 及LCA/AAO 明显高于无冠脉损伤患儿（P＜0.05）。见表3。

表3 观察组有无冠脉损伤患儿血清Ash2L、AECA及LCA/AAO比较

2.3 相关性分析 将观察组患儿血清Ash2L、AECA 与 LCA/AAO 进行相关分析，结果显示： 血清Ash2L、AECA 与 LCA/AAO 呈正相关 （r=0.825 和0.876，P＜0.05），见图1。

2.4 Ash2L、AECA 及 LCA/AAO 诊断价值 Ash2L、AECA 及LCA/AAO 诊断有冠脉损伤的ROC 曲线下面积分别为 0.736、0.734 和 0.755，P＜0.05, 截断值分别为 3.60pg/ml、920.50pg/ml 和 0.20，灵敏性分别为78.00%、77.50%和 80.00%, 特异性分别为66.00%、64.00%和67.80%，见图2。

3 讨论

图1 相关分析图

图2 ROC曲线图

川崎病属于临床儿科常见病,全身血管性炎症反应时本病的主要病理特征,可诱发炎症心血管病变，对儿童的身体健康产生严重威胁，而冠状动脉损伤是川崎病的最常见并发症之一[8,9]。大量文献[10-13]均提示内皮细胞功能障碍是造成川崎病患者冠状动脉损伤和血管炎症疾病的重要原因。AECA 属于B 淋巴细胞分泌的非特异性自身抗体,先前的研究[14]提示川崎病患儿治疗后AECA 显著下降并提示AECA 水平可能与KD 患儿疾病的活动性具有相关性。研究[15,16]发现 Ash2L 可催化 IFN-γ 基因组蛋白发生H3K4me3 甲基化，进而发挥介导炎症反应的T 细胞亚群的作用。本研究结果显示观察组血清Ash2L 和AECA 明显高于对照组,上述结果提示Ash2L 和AECA 可能是川崎病患儿发病过程中特有标志物, 具有成为诊断川崎病重要指标的潜力。AECA 结合内皮细胞后可通过多种途径介导血管内皮的功能障碍和内皮损伤[17,18]：⑴增加趋化因子、炎性细胞因子的合成，活化内皮细胞；⑵促进内皮细胞表面黏附分子表达,促进中性粒细胞和单核细胞的聚集和迁移;⑶通过抗体和补体细胞毒作用引起内皮细胞的溶解和损伤,这也间接提示检测AECA 水平对诊断和评估川崎病可能具有提示作用。

观察组有无冠脉损伤患儿血清Ash2L、AECA及LCA/AAO 比较结果显示有冠脉损伤患儿血清Ash2L、AECA 及 LCA/AAO 明显高于无冠脉损伤患儿。上述结果提示川崎病并发冠状动脉损伤患儿血清 Ash2L、AECA 及 LCA/AAO 明显升高。释放蛋白溶解酶、活性氧、细胞因子等毒性介质、诱导中性粒细胞的活化是AECA 的关键作用,进而损伤血管内皮细胞并造成机体局部血管功能障碍，参与川崎病并发冠状动脉的发生、发展过程。因此通过检测血清Ash2L、AECA 有助于判断川崎病并发冠状动脉的发生及所处于的发展阶段。

本研究进一步将观察组患儿血清Ash2L、AECA 与 LCA/AAO 进行相关分析，结果显示： 血清Ash2L、AECA 与 LCA/AAO 呈正相关。该结果提示川崎病患儿血清Ash2L、AECA 明显升高,与冠脉血管损伤存在一定相关性,血清Ash2L、AECA 水平越高，冠状动脉损害越严重。故而，笔者推测对外周血Ash2L、AECA 表达水平检测,有助于早期诊断川崎病合并冠状动脉损害及预后。

相关文献[19,20]提示T-bet 的高表达可能是川崎病患儿IFN-γ 基因H3K4me3 修饰异常的重要原因，IFN-1 可结合靶细胞表面受体结合, 促使STAT1 磷酸化，并诱导T-bet 的表达，因此基于本研究结果笔者推测在内、外源性配体及炎症因子的共同作用诱导TLR4 信号，T-bet 表达水平升高并促进IFN-γ 基因组蛋白甲基化酶Ash2L 结合，促进IFN-γ 基因组蛋白发生甲基化修饰及H3K4me3水平显著升高,进而导致IFN-γ 和Thl 细胞表达异常,进一步加重炎症反应和内皮细胞功能障碍。

综上所述,川崎病患儿血清Ash2L、AECA 明显升高，与冠脉血管损伤存在一定相关性，值得进一步研究。本研究对Ash2L、抗内皮细胞抗体与川崎病患儿冠脉血管损伤的关系进行了分析探讨并分析了可能存在的相关机制，实验结果更加全面，能够为临床川崎病的治疗和预后提供更多的数据参考，具有一定的临床意义。