七氟醚对子痫前期母体炎性因子及SENG蛋白表达影响

韩宝义 张 悦 胡祖荣 贾 杰

子痫前期主要是指特发于妊娠期女性的一种产科并发症，主要的临床特征是妊娠20周之后发生高血压和蛋白尿，亦是导致孕妇和胎儿，以及新生儿死亡的一个重要因素［1］。特别是对于处于重度子痫前期的孕妇，除了上述主要表现特征外，往往合并多器官功能性的障碍，这也预示着子痫前期的患者若孕周为32～34周，则需要终止妊娠［2］。迄今为止，关于子痫前期的具体病因以及发病机制尚未彻底阐明，目前主要认为血管重塑被破坏和全身抗血管生成反应或许是诱发此病的一个重要机制［3］。有报道表明，血液内血管生成因子主要成分的变化与血管重塑的障碍紧密相关，而此类血管生成因子主要包含促血管类（PIGF），以及抗血管类（SENG）和可溶性血管内皮生长因子1（sFLtl）等，两者平衡的协调在子痫前期的疾病发展中至关重要［4］。其中SENG来源于胎盘，通过阻碍TGF-β和其受体的结合，阻碍血管的发育及重塑，且SENG可在子痫前期患者机体的血清内表达上调，并在分娩之后下降，同症状的严重程度呈现出正相关联系［5］。七氟醚属于常用的一类产科吸入麻醉药，存在血气分配的系数小，以及快速诱导及加速苏醒等优势。本文通过研究七氟醚对子痫前期母体炎性因子及SENG表达的作用影响，以期为关于子痫前期的治疗和常规麻醉方案的拟定提供较新的思路支持，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 一般资料

从2019年1月—2020年8月，于医院接受剖宫产的子痫前期孕妇80例纳入研究。将其根据随机数字表法分作观察组及对照组，每组各40例。观察组年龄最小22岁，最大38岁，平均（31.32±5.22）岁；孕周30～36周，平均（33.22±0.35）周；体质量指数（BMI）19～28 kg/m2，平均（22.62±1.83）kg/m2；子痫前期严重程度：轻度17例，中度11例，重度12例；剖宫产原因：疤痕子宫29例，产妇主观因素9例，其他2例。对照组年龄最小21岁，最大39岁，平均（31.39±5.25）岁；孕周30～36周，平均（33.28±0.37）周；体质量指数（BMI）19～28 kg/m2，平均（22.74±1.85）kg/m2；子痫前期严重程度：轻度18例，中度11例，重度11例；剖宫产原因：疤痕子宫28例，产妇主观因素9例，其他3例。两组一般资料差异不明显（P＞0.05），均衡可比。入选标准：①所有受试者均符合《妇产科学（第八版）》［6］中所制定的子痫前期相关诊断标准；②年龄≥20岁；③均行剖宫产；④孕周30～36周；⑤均为单胎妊娠。剔除标准：①心、肝、肺等重要脏器发生严重病变者；②合并糖尿病、高血压、类风湿等自身免疫性疾病者；③神志异常或合并神经系统疾病者；④研究过程中因各种原因退出者；⑤存在胎膜早破、早产以及感染征象者。研究对象已在相关知情同意书签字，且已获医院的伦理委员会审批。

1.2 研究方法

①麻醉方式：所有受试者术前均予以禁食8 h，禁饮4 h处理，入室后常规进行心电图和血氧饱和度的监测。选择桡动脉置管连续监测动脉压以及血液采样，均于L2～3间隙进行硬膜外神经组织麻醉，试验剂量为2%利多卡因3 mL，硬膜外麻醉药物为0.75%罗哌卡因15～20 mL，随后予以面罩吸入纯氧处理。观察组则于上述操作的基础上予以6%七氟醚吸入，并在呼吸末七氟醚浓度维持在3%时开始手术，准备切割子宫时维持呼气末七氟醚浓度＜1%。②标本采集：①外周静脉血及脐血：研究对象均于进手术室后抽取2 ml孕母外周静脉血放置试管。在胎盘娩出后立即抽取2ml脐静脉血放置试管。标本于采集后30分钟内在常温下离心2 000转/min，取上清液，并将上清液标本保存于-20℃冰箱，一月后置于-80℃冰箱保存待用。②胎盘处理与蛋白提取：术者取出胎盘之后放于无菌盘内，常规无菌剪取其体积为1 cm3的胎盘组织，同时清除胎膜和血管等有关结缔组织，避开钙化灶和出血/梗死区域。将胎盘组织通过0.9%的生理盐水进行冲洗，再通过无菌纱布将水分吸干，放置在4%的多聚甲醛液内固定约24 h，并将标本放在-80℃的冰箱内待测。③炎性因子检测：检测标本包括母体血清、脐血以及胎盘组织，检测指标包含白细胞介素 -5（IL-5）和 IL-6，及肿瘤坏死因子 -α（TNF-α），以及TNF-α受体Ⅱ（TNFRⅡ）。检测方式选用酶免法，试剂盒购自深圳的晶美生物公司。④SENG蛋白表达检测：检测标本包括母体血清和脐血，以及相关胎盘组织，测定方式是酶免法，试剂盒购自武汉的博士德生物公司。⑤应激指标水平检测：主要检测指标包括血浆皮质醇（Cor）以及肾上腺素（NE），前者采用放射免疫法进行检测，相关试剂购自北京北方生物技术研究所；后者采用高效液相-电化学法检测，试剂购自北京科美生物技术有限公司。

1.3 观察指标

对比两组母体血清、脐血以及胎盘组织中的炎性因子及SENG蛋白表达情况，血流动力学指标，新生儿Apgar评分以及脐动脉pH值，手术前后应激指标水平等方面的差异。其中血流动力学指标包括平均动脉压（MAP）以及心率（HR），检测时间为麻醉前（T1）、椎管内诱导完毕后10 min（T2）、手术开始前即刻（T3）、胎儿娩出即刻（T4）。

1.4 统计学处理

数据分析选择SPSS 22.0，其中计数资料用（n，%）表示，行χ2检验。计量资料用（±s）表示，行t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组炎性因子水平评价

观察组母体血清、脐血以及胎盘组织中的IL-5、IL-6、TNF-α、TNFRⅡ水平均低于对照组（均 P＜0.05），见表1。

表1 两组炎性因子水平评价（pg/ml，±s）

表1 两组炎性因子水平评价（pg/ml，±s）

注：与对照组相比，1）P＜0.05

指标 标本类型 观察组（n=40）对照组（n=40） t值 P值母体血清 7.21±1.301）10.04±2.15 7.124 0.000 IL-5 脐血 11.39±2.091） 21.01±3.27 15.678 0.000胎盘组织 30.76±4.561） 45.27±6.91 11.085 0.000母体血清 14.22±3.221） 18.95±3.57 6.222 0.000 IL-6 脐血 23.10±4.291） 30.05±5.11 6.588 0.000胎盘组织 52.04±10.301）122.83±14.29 25.416 0.000母体血清 5.13±1.041） 7.38±1.23 8.835 0.000 TNF-α 脐血 6.04±1.151） 8.92±1.45 9.842 0.000胎盘组织 18.49±2.951） 32.78±3.19 20.801 0.000母体血清 3.82±0.131） 5.11±0.25 28.954 0.000 TNFRⅡ 脐血 5.87±0.361） 7.25±0.49 14.354 0.000胎盘组织 14.98±1.521）26.72±2.34 26.610 0.000

2.2 两组SENG蛋白表达水平评价

观察组母体血清、脐血以及胎盘组织中的SENG蛋白表达水平均低于对照组（均P＜0.05），见表2。

表2 两组SENG蛋白表达水平评价（±s）

表2 两组SENG蛋白表达水平评价（±s）

注：与对照组相比，1）P＜0.05

组别 例数 母体血清 脐血 胎盘组织观察组 40 0.17±0.041） 0.38±0.111） 1.44±0.511）对照组 40 0.25±0.06 0.51±0.15 1.87±0.52 t- 7.016 4.420 3.734 P - 0.000 0.000 0.000

2.3 两组血流动力学指标评价

观察组及对照组各时间点的MAP以及HR对比均不明显（均P＞0.05），见表3。

表3 两组血流动力学指标评价（±s）

表3 两组血流动力学指标评价（±s）

指标 时间 观察组（n=40） 对照组（n=40）t P MAP（mmHg）T1 120.04±8.34 120.15±8.15 0.060 0.953 T2 96.13±7.15 97.12±7.93 0.586 0.559 T3 96.04±8.24 97.94±8.01 1.046 0.299 T4 97.45±7.39 98.22±8.19 0.441 0.660 HR（次/min） T1 80.41±7.66 81.02±7.34 0.364 0.717 T2 81.23±9.11 80.45±9.02 0.385 0.701 T3 84.87±8.12 85.06±8.15 0.104 0.917 T4 81.34±8.23 82.34±8.01 0.551 0.583

2.4 两组新生儿Apgar评分以及脐动脉pH值评价

观察组及对照组新生儿Apgar评分以及脐动脉pH值对比均不明显（均P＞0.05），见表4。

表4 两组新生儿Apgar评分以及脐动脉pH值评价（±s）

表4 两组新生儿Apgar评分以及脐动脉pH值评价（±s）

组别 例数 1 min Apgar评分5 min Apgar评分10 min Apgar评分脐动脉pH值观察组40 7.20±0.71 7.80±1.13 9.02±0.34 7.22±0.35对照组 40 7.14±0.72 7.85±1.09 9.08±0.35 7.28±0.31 t- 0.375 0.201 0.778 0.812 P值- 0.709 0.841 0.439 0.420

2.5 手术前后两组血浆Cor以及NE水平评价

手术后观察组血浆Cor以及NE水平均低于对照组（均 P＜0.05），见表5。

表5 手术前后两组血浆Cor以及NE水平评价（±s）

表5 手术前后两组血浆Cor以及NE水平评价（±s）

组别 例数Cor（nmol/L）术前 术后NE（pg/ml ）术前 术后观察组 40 301.22±25.29 374.83±27.39 418.39±38.29 502.38±41.39对照组 40 302.05±26.11 391.74±32.05 420.03±38.15 533.82±41.57 t- 0.144 2.537 0.192 3.390 P - 0.886 0.013 0.848 0.001

3 讨论

子痫前期的病因以及病理机制一直以来都是妇产医学研究的热点，因其涉及母体、胎盘以及胎儿等多方面的因素，迄今为止尚无单一机制可完全解释其发病原因。然而，随着近年来相关研究的日益深入，越来越多的学者认为滋养细胞侵袭异常、免疫功能异常、内皮细胞损伤以及遗传因素等均可能在子痫前期的发生、发展过程中起着至关重要的作用［8-12］。既往研究报道证实［13-14］，T淋巴细胞分娩的炎性细胞因子诱导的辅助性T细胞平衡失调以及胎盘缺血缺氧导致的凋亡均参与了子痫前期的发生、发展过程。故此，寻找一种积极有效的调节子痫前期产妇外周血以及胎盘组织中炎性细胞因子的方案显得尤为重要。七氟醚属于挥发性吸入麻醉药物之一，血/起分配系数较低，诱导和苏醒迅速且平稳，是目前产科临床应用较为广泛的麻醉药物，且合理的吸入浓度对产妇以及胎儿均是安全的，可安全用于子痫前期产妇的全身麻醉［15-16］。相关研究报道显示，子痫前期出现临床症状之前，胎盘形态和功能的改变就已经发生［17］。本研究分析吸入七氟醚后对子痫前期患者相关胎盘SENG蛋白表达的作用，为子痫前期产妇的全身麻醉提供一种行之有效的方案。

IL-5主要是由抗原活化的CD4+T细胞合成、分泌而来，可刺激嗜酸性粒细胞增殖、分化以及活化，在机体出现损伤、炎症时迅速升高，是临床上用以反映机体损伤或（和）炎症程度的有效指标之一。IL-6作为一类应激病理或生理反应进程当中的介质，既可介导机体的免疫及防御，又可在急性期反应以及造血反应上发挥着至关重要的作用。TNF-α属于炎症反应早期敏感性细胞因子之一，在机体出现感染或（和）炎症时，其水平迅速升高，并在90～120 min达至峰值。TNFRⅡ属于TNF-α特异性受体之一，两者结合后可发挥一定的促炎作用。本研究发现，七氟醚可明显降低子痫前期母体IL-5、IL-6、TNF-α、TNFRⅡ水平。这提示了七氟醚可明显降低子痫前期母体炎性因子水平。考虑原因可能在于：七氟醚可有效抑制炎症反应的发生或传导过程，同时参与了促炎性细胞因子的生成、转导或释放过程，进一步起到抑制炎症反应的作用，最终促使上述各项炎性因子水平降低。此外，七氟醚的应用可在一定程度上降低产妇的应激反应，继而促使胎盘滋养层细胞凋亡减少，发挥了抑制细胞炎性反应的作用，从而降低了炎性因子水平［18-19］。本研究发现，七氟醚可明显降低子痫前期母体SENG蛋白表达。分析原因，可能是因为七氟醚能直接地作用在滋养细胞，同时下调Eng基因的表达，致使血清Eng水平下降，继而间接地降低sEng蛋白的表达。由此，作者推测七氟醚对子痫前期母体有器官保护作用，其机制是可能上调促炎症因子，下调sEng蛋白表达，但其具体作用机制有待进一步研究揭示。本研究发现，七氟醚的应用不会对产妇血流动力学以及新生儿结局产生严重影响。这在贾杰等人的研究报道中得以佐证［20-21］：七氟醚应用于剖宫产子痫前期产妇中是安全的，不会影响产妇的循环和新生儿结局。本研究还发现了，手术后观察组血浆Cor以及NE水平均低于对照组。考虑原因可能是七氟醚可发挥明显的镇痛作用，且有效控制患者的身心状态，进一步减轻应激反应。

综上所述，七氟醚可明显降低子痫前期母体炎性因子及SENG蛋白表达，其主要机制可能和抑制产妇全身炎症反应密切相关。