一种改良的兔经胃给药方法*

李彦锦 蔡贤华 丰瑞兵 陈 芳

(1. 湖北中医药大学针灸骨伤学院，武汉 430065)(2. 中国人民解放军中部战区总医院，武汉 430070)(3. 武汉市中医医院，武汉 430014)

相对于小鼠、豚鼠等小型实验动物，兔在进行灌胃操作时难度较大。传统灌胃法虽然应用普遍[1]，但仍有诸多不足之处。例如，在使用张口器时，兔常剧烈反抗，造成嘴唇和牙龈受伤出血，甚至继发感染。插入橡皮导管也常误入气管，甚至在个别兔并未观察到管口兔毛摆动或气泡逸出现象，但灌入药液后仍诱发呛咳并死亡。此外，该方法操作复杂，常需2～3个实验员配合实施，整个操作需5～10 min，不利于大样本实验的批量操作。

作者在既往实验中曾总结出一种兔经胃给药方法[2]，能够简化操作流程、缩短操作时间，并显示了极高的安全性和稳定性。简述如下：助手将兔放入固定盒中固定并竖直抱起，实验者左手持20 cm止血钳维持兔嘴张开，右手经止血钳间隙将灌胃针头顺着舌面滑入咽后壁根部，出现自然吞咽动作后伴随吞咽动作将药液经注射器缓缓推入。该方法以固定盒代替手抓固定法，并利用止血钳与灌胃针代替张口器与橡胶软管，简化了操作流程，极大的降低了兔的不适感，但该方法在实际操作中存在诸多不足，如固定盒笨重、需双人配合，且操作过程中兔往往因重力下坠常造成颈部卡顿甚至窒息，不得不中断给药后重复操作。因此，作者在实验中进一步改进给药方法，总结出一种单人即可完成的经胃给药方法。

1 材料与方法

1.1 材料

16号灌胃针，10 mL注射器，生理盐水。

1.2 实验动物

成年兔，10～12月龄，质量3.2～3.8 kg，购自武汉万千佳兴生物科技有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK(鄂)2016-001。单笼饲养于中国人民解放军中部战区总医院医学实验动物中心，温度(22±1)℃、相对湿度45%、明暗交替12 h/12 h，适应性饲养2周后开始实验，期间自由采食。所有实验操作经中国人民解放军中部战区总医院实验伦理委员会批准。

1.3 操作方法

① 实验者将兔夹在两小腿之间，小腿肚固定兔髋部，膝部固定兔前肢腋下处，维持稳定，避免过度用力引起兔呼吸困难等不适。

② 左手拇指顶在兔颈后枕骨下，中指置于兔颈前，食指托抬下颌，固定兔头部并维持颈部后伸，使口、咽、食道大致位于一条直线(图1a)。

③ 右手持安装16号灌胃针的注射器(注射器规格可根据给药剂量调整)，灌胃针头自兔右侧嘴角齿根部进入(图1b)，轻压舌根后缓慢竖起注射器，保持与食道方向一致(图1c)，沿咽后壁缓慢下滑，下针过程中应顺畅无阻力，引起吞咽时停止进针，此时注射器根部距兔门齿约1 cm(图1d、图1e)。

④ 稍作停留确认兔无明显不适后缓慢推注药液，每次推注药液控制在0.5～1 mL，中间略有停顿，使药液伴随吞咽动作进入食道和胃中，此时左手中指能触及兔颈前明显的吞咽动作，如此反复直至完成全部给药。

图1 一种改良的兔经胃给药方法操作演示注：a.实验者小腿和左手固定兔；b.灌胃针从右侧嘴角进针；c.下针点操作图; d、e.下针深度正、侧位图Fig.1 Demonstration of a modified transgastric administration for rabbitNote: a.Stabilizing the rabbit with lower legs;b.Placing the lavage needle from the right corner of the rabbit’s mouth;c. Erecting and placing the lavage needle along the root of tongue;d and e.Demonstration of the depth of the lavage needle

2 讨论

2.1 改进之处

① 本方法单人即可完成操作。

② 操作效率明显提升：整个给药流程3～5 min即可完成。

③ 无需使用固定盒：本方法以双侧小腿和膝部固定兔髋部和腋下即可维持体位，前爪无需刻意固定，操作中兔少有剧烈反抗。

④ 无需止血钳和张口器：止血钳和张口器易引起兔反抗，损伤嘴唇和牙龈、甚至继发感染，干扰实验结果；本方法中实验者左手能够较好的固定头部，右手仅使用灌胃针进行给药，操作简单易掌握，过程稳定，极少造成额外损伤。

2.2 不足之处

① 本方法主要依靠兔的吞咽动作使药物进入食道和胃中，对于部分低溶解度药物，易造成药物在口咽部残留。因此，作者常规在给药完成后再灌入少量的清水或相关溶剂以利于药物进入胃中。值得注意的是，兔呕吐反射并不发达[3]，即使口咽部残存少量药物，后续仍可通过进食和饮水进入胃肠道吸收，对实验结果的干扰有限。

② 小腿夹持兔时，可因兔后肢蹬踏划伤实验者，因此推荐隔一层布单或厚的塑料膜以避免实验者受到意外伤害。

2.3 操作注意事项

① 左手食指托抬着力点在兔下颌骨正中偏左部位，中指位于颈前时应放松，避免用力压迫气道引起呼吸困难。

② 灌胃过程中应保持兔头部后仰，使口、咽、食道大致位于一条直线，便于准确进针、下针。

③ 从右侧嘴角进针后不要急于下针，应先顺着嘴角滑到右侧齿根部，轻压舌根后缓慢竖起注射器，保持与食道方向一致(优势手为左手者则改右手固定，从兔左侧嘴角进针)。

④ 下针时应顺畅无阻力，如有明显阻力或兔以舌头抵触干扰进针，则应退回后重新进针。待下针到足够深度后可感受到明显吞咽动作，确认后即可给药；若未感受到明显吞咽动作，可试探性的推入少量药液(0.1～0.2 mL)，中指感受到有吞咽且无咳呛后再继续推入药液。

⑤ 应注意控制推药速度，以每次推入0.5 mL较合适，期间应停顿，左手中指感受到吞咽动作后再进行下一次推药，切忌过快给药，造成兔吞咽不及，引起咳呛或药物溢出，影响实验准确性。

⑥ 操作过程中若遇到兔剧烈反抗，应停止操作或退出针头，稍作安抚后，再重新操作，切忌粗暴操作，造成兔惊吓或损伤。

综上所述，本方法是在课题组总结前期经验基础上，进一步改进，简化操作，提高效率，总结出的一种改良的兔经胃给药方法。该方案操作简单易行、学习时间短、对兔伤害小、效率高、可单人完成，符合实验动物“3R”原则[4-5]，有利于开展大样本的批量给药操作，是一种行之有效的兔实验给药方法。