血清miR-155联合IL-6检测对肝细胞肝癌预后的评估价值

邹 灿，刘祖明，沈 丰，宋晓芳

(湖北医药学院附属东风医院, 湖北省十堰市442008)

在中国，年龄<60岁男性癌症患者的肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发病率位居首位[1]。由于HCC发病症状不明显，易错过最佳的治疗时间，其5年生存率大约为53.3%[2-3]。临床上HCC治疗方案正在不断完善，但HCC患者预后生存率并未得到较大改善，这可能与HCC早期诊断延误，病情发展较快有关。大量数据显示，早期诊断是提高HCC患者生存率的关键[4]。目前对于HCC患者预后判断主要参考HCC分化程度、肿瘤转移、TNM分期等病理因素，需要增加如分子标记物等更为准确的参数来对HCC患者预后进行预测。白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)是重要的细胞因子，属于致癌基因ras的下游效应物，在免疫防御、细胞分化、细胞增殖中具有重要作用。microRNA-155(miR-155)是多功能基因，下游基因可介导分化免疫造血细胞等，属于致癌或抑癌基因[5-6]。本研究主要探讨血清miR-155联合IL-6检测对HCC患者预后的评估价值，为临床HCC诊断及预后判断提供理论依据，现报道如下。

1 资料和方法

1.1 研究对象

选取本院2016年2月—2018年6月手术切除肝癌组织的HCC患者50例(HCC组)，男42例，女8例，年龄(43.80±4.21)岁(37～74岁)，体质量(44.17±3.12) kg (38～75 kg)；病理分级：Ⅰ级16例，Ⅱ级14例，Ⅲ级19例，Ⅳ级1例；肿瘤直径<5 cm 23例；≥5 cm 27例。另外选择同期50例体检健康者作为对照组，男28例，女22例，年龄(45.13±5.10)岁(32～75岁)，体质量(45.34±3.54) kg(41～78 kg)。两组性别、年龄、体质量等一般资料比较差异无显著性(P>0.05)，具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会批准，研究对象及家属知情同意。

HCC组纳入标准：①病理学确诊为HCC；②均未接受过化疗、放疗等相关治疗；③病程1年以上。

排除标准：①严重心、肝、肾等脏器功能障碍者；②肝外组织严重感染或恶性肿瘤者；③存在精神障碍和认知障碍者；④已发生远处转移；⑤患有HCC以外的恶性肿瘤；⑥资料不全者。

1.2 检测方法

采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6水平，荧光定量PCR法检测miR-155水平。比较两组miR-155、IL-6水平，ROC曲线分析IL-6联合miR-155水平与HCC患者预后的关系，比较其灵敏度、特异度及准确度，同时对HCC患者预后进行多元回归分析。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 两组血清IL-6、miR-155水平的比较

HCC组IL-6、miR-155水平明显高于对照组(P<0.05；表1)。

表1 两组血清IL-6、miR-155水平的比较

2.2 IL-6联合miR-155水平对HCC预后预测的ROC曲线

IL-6=9.7 μg/L和miR-155=2.5为截断点，IL-6联合miR-155测定对HCC患者预后的灵敏度、特异度及准确度均高于IL-6或miR-155单独测定(P<0.05；图1，表2)。

图1 IL-6、miR-155水平对HCC预后预测的ROC曲线

表2 IL-6、miR-155水平与HCC患者预后的相关性分析

2.3 影响HCC患者预后的单因素分析

TNM分期、肿瘤直径、病理分级、淋巴转移、门静脉侵犯、高水平miR-155、高水平IL-6是患者预后的危险因素(P<0.05；表3)。

表3 临床病理变量与血清IL-6、miR-155水平的关系

2.4 影响HCC患者预后的多因素分析

肿瘤大小、淋巴转移、门静脉侵犯、高水平miR-155及高水平IL-6是影响HCC患者预后的独立危险因素(P<0.05；表4)。

表4 影响HCC患者预后的多因素分析

3 讨 论

HCC属于侵袭性很高的恶性肿瘤，目前，临床上对HCC的治疗主要以肝移植及手术切除为主，而术后疗效和患者远期生存情况与术后肝癌复发具有较大联系[7]。因此，如何有效改善患者术后远期生存情况，预防肝癌复发是治疗的关键。本研究通过多因素Cox回归分析发现，肿瘤大小、淋巴转移、门静脉侵犯、高水平miR-155及高水平IL-6是影响HCC患者预后的独立危险因素。

miR-155是一种潜在的抑癌或致癌基因，属于典型的多功能基因，可通过异常表达抑制细胞周期，促进肿瘤蛋白表达减少，通过降低Caspase-3活性而达到抑制肿瘤细胞凋亡的目的，同时还可参与介导炎症相关的基因调节过程[8-10]。miR-155下游基因可介导心血管疾病、炎症、免疫造血细胞分化等较多病理生理过程[11]。有研究结果显示，正常乳腺组织与乳腺癌患者的miR-155水平具有较大差异[12]，这说明肿瘤的生物学及病理特征与miR-155水平具有一定联系。也有研究证实，在胰腺癌细胞株、胰腺癌组织中miR-155常表现为高水平，可作为诊断胰腺癌的重要标志物[13-14]。同时，在甲状腺癌组织、肾透明细胞癌组织中miR-155水平均高于正常组织[15]。这说明，miR-155可能在一定程度上促进肿瘤的发展。但目前临床缺乏关于HCC患者组织及预后与miR-155关系的相关研究。在本研究结果中，HCC组miR-155水平高于对照组，这说明肝癌组织miR-155水平高于正常肝组织，这可能与miR-155水平升高引发非小细胞肺腺癌H157细胞、肺腺癌A549细胞增殖加快有关。

IL-6是一种白细胞趋化因子，具有生物活性多肽物质中的多种功能，主要由内皮细胞、上皮细胞、成纤维细胞、T淋巴细胞、血管内皮细胞、多种肿瘤细胞及单核-巨噬细胞所分泌。IL-6可通过旁分泌及自分泌来抑制或刺激肿瘤细胞增殖[16-17]。关于IL-6抑制或刺激肿瘤细胞增殖的具体机制目前并不清楚，但有相关研究表明，IL-6与肿瘤的转移、增殖、细胞癌基因表达失控具有紧密联系，如骨髓瘤、肾癌等多种肿瘤细胞增殖均取决于IL-6的分泌能力[18]。在本研究中，HCC组IL-6水平高于对照组，这说明肝癌组织IL-6水平高于正常肝组织。导致肝癌组织IL-6水平升高的原因主要与癌组织浸润巨噬细胞，促使IL-6水平升高，肿瘤组织可自行分泌IL-6，细胞T细胞增殖反应与IL-6的级联影响等有关[19]。

本研究利用ROC曲线发现，IL-6水平在9.7 μg/L，miR-155水平在2.5时，预测价值对HCC患者来说最高，且IL-6水平低于9.7 μg/L，miR-155水平低于2.5时患者生存率明显高于IL-6水平大于9.7 μg/L，miR-155水平大于2.5的患者。通过多因素Cox回归分析得出，高水平miR-155及高水平IL-6是影响HCC患者预后的独立危险因素。同时，在本研究发现肿瘤大小、淋巴转移、门静脉侵犯均是影响HCC患者预后的独立危险因素。这些因素也很有可能与IL-6及miR-155具有一定联系，有待进一步研究。

综上，IL-6与miR-155的高表达可作为HCC诊断的指标之一，同时也可作为评估HCC患者预后的独立预测因子。但由于本研究存在样本量较少及观察时间较短的局限性，有待加大样本量，延长观察时间，进一步深入探讨。