抗精子抗体及抗子宫内膜抗体与反复种植失败相关性分析

李栗妍，于月新，张 宁，刘星池，闫 丽，王恺悦

北部战区总医院 生殖医学科，辽宁 沈阳 110000

近年来，不孕不育症的发病率呈现逐年上升趋势，在不孕症中，免疫性不孕约占10%[1]。随着生殖免疫学科的发展，免疫因素是不孕不育的重要因素已达成共识[2]。而且，生殖免疫学是具有独特反应系统的临床免疫学，任何环节发生异常，均有可能导致免疫病理反应，最终引起不孕、流产。在辅助生殖技术中，免疫性抗体所发挥的作用越来越受到临床学者的关注[3]。体外受精/卵胞浆内单精子显微注射的临床妊娠率已达到50%～60%，排除高龄、生殖系统畸形、遗传等因素后，仍有10%的女性经过多个周期治疗未能成功妊娠，通常归为反复种植失败(recurrent implantation failure，RIF)[4]。RIF的定义目前尚无统一的标准，2018年，我国《胚胎植入前遗传学诊断/筛查专家共识》将RIF定义为移植3次以上或移植高评分卵裂球期胚胎数4～6个或高评分囊胚数3个及以上均失败者[5]。目前，RIF的原因尚未完全明确，主要包括胚胎因素、子宫因素、免疫因素等[6]。本研究旨在探讨抗精子抗体、抗子宫内膜抗体与RIF的相关性，为RIF的临床治疗提供参考依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1—12月于北部战区总医院进行胚胎移植失败的218例患者为B组，年龄25～35岁，平均年龄(30±3)岁。排除标准：合并生殖道感染、染色体异常、生殖器官肿瘤；合并心血管、肝、肾疾病及全身造血系统等严重疾病；其他影响生育的疾病。另选取同期进行同种获卵方式、移植周期数≤2个周期、确定临床妊娠(移植后超声检查确定临床妊娠，并维持妊娠时间>13周)的321例孕妇作为A组，年龄25～35岁，平均年龄(30±3)岁。两组研究对象的年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准。所有研究对象均知情同意。

1.2 研究方法 抽取两组研究对象的外周静脉血3 ml，离心分离血清，应用全自动化学发光分析仪，采用化学发光测定方法检测抗精子抗体和抗子宫内膜抗体(试剂由北京源德生物医学工程有限公司提供)，将发光物质直接标记在抗原或抗体上，或使用酶作用于发光底物上，利用发光信号测量仪器测量出发光物质或酶反应底物上光子的数量，得到免疫反应时的被测物质浓度，进而判定被检测物质的阴阳性。实验结果判定标准：阴性对照品的平均相对发光单位(relative light unit，RLU)的2.1倍为Cut Off值；用每个样品的RLU与Cut Off的比值(S/CO)来判断该样本为阴性或阳性，其中，S/CO≤1.0为阴性，S/CO>1.0为阳性(各实验室根据自己实验室建立自己的Cut Off值)。本研究实验室拥有完整的质量控制体系，可保证实验结果的准确性。比较两组研究对象抗精子抗体、抗子宫内膜抗体的阳性率。

2 结果

B组抗精子抗体阳性者27例(12.39%)，抗子宫内膜抗体阳性者19例(8.72%)，两种抗体均为阳性者6例(2.75%)。A组抗精子抗体阳性者56例(17.45%)，抗子宫内膜抗体阳性者43例(13.40%)，两种抗体均为阳性者20例(6.23%)。两组抗精子抗体阳性率、抗子宫内膜抗体阳性率及两种抗体阳性率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

正常情况下，胚胎和精子对于母体来说是异己的，男性精液这一异物可引起生殖道局部免疫反应，精子抗原诱导免疫反应产生抗精子抗体[7]。抗精子抗体产生后会对精子的质膜颗粒流动能力造成影响，降低精子质量[8]。抗精子抗体可与精子表面抗原特异性结合。早期胚胎表达精子抗原，同时，抗精子抗体可识别并结合精子抗原，通过激活补体、巨噬细胞和杀伤细胞来杀伤受精卵和早期胚胎；还可通过抑制早期的胚胎卵裂，大大降低优质胚胎数量，进而影响胚胎的生长发育；同时阻碍胚胎的植入，进而导致胚胎的种植失败和早期流产[9-10]。

抗子宫内膜抗体主要存在于子宫内膜中，是一种特异性自身抗体[11]，主要与子宫内膜异位刺激及体内环境失调有关。该抗体对子宫内膜结构进行破坏，影响子宫内膜发育，使受精卵着床和胚胎发育不良，是导致孕妇流产的重要因素。大量研究报道，不孕不育患者抗子宫内膜抗体、抗精子抗体等检测水平明显高于正常孕妇，生殖免疫抗体阳性是育龄妇女不孕的主要原因之一[12-13]。

本研究结果发现，A、B两组研究对象的抗精子抗体阳性率、抗子宫内膜抗体阳性率及两种抗体阳性率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，提示抗精子抗体和抗子宫内膜抗体与RIF并无明显相关性，不具有临床特异性。抗精子抗体、抗子宫内膜抗体检测已经被临床广泛应用多年，目前常用的检测方法主要有化学发光法、酶联免疫吸附法、免疫荧光法等，但不同的检测方法及不同的试剂盒往往检测结果会出现一定的差异性，甚至出现假阳性的结果。因此，在检测这些抗体的过程中实验方法的选择和严格的质量控制至关重要[14]。且本实验室仅对IgG型进行检测分析，未对其他分型进行检测，而这两种抗体不同分型的阳性率结果是否对RIF的发生发展有着不同的临床意义，将是笔者今后工作中应该研究探索的内容。

综上所述，抗精子抗体和抗子宫内膜抗体检测在RIF患者中并无明显相关性及特异性。对抗精子抗体和抗子宫内膜抗体在RIF的发生发展中的作用还需要在今后的工作中进一步研究确证，以更好地为辅助生殖技术中免疫因素的诊治提供更多的理论依据。