巴拉圭茶对高脂血症小鼠氧化还原状态的影响

◎ 李翔辉，刘瑞霞

（漯河食品职业学院，河南 漯河 462300）

随着经济的发展，人们的膳食结构也在发生变化，主要体现在高盐、高脂、高糖饮食习惯的增加，这对人们的身体健康具有不利影响[1]。已有研究表明，长期高脂膳食会造成机体氧化还原状态失衡，进而引起各类慢性疾病，危害人们的健康[2]。寻找天然的抗氧化剂具有非常意义，巴拉圭茶（Ilex Paraguariensis）原产于南美，具有多酚、黄酮等活性成分，具有抗氧化、减肥等作用[3-4]。本文拟通过建立高脂血症小鼠模型，探讨巴拉圭茶对高脂血症小鼠氧化应激的调节作用，为进一步研究巴拉圭茶抗氧化活性提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 设备与材料

UV2600 紫外可见分光光度计（岛津公司）、BSA124S 电子分析天平（赛多利斯公司）、CenLee 18K 离心机（湖南湘立科学仪器有限公司）。

巴拉圭茶茶（阿根廷进口）；活性氧自由基（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及丙二醛（MDA）测定试剂盒，由南京建成生物工程研究所有限公司提供。

高脂饲料配方：78.8%基础饲料添加1%胆固醇、10%猪油、10%蛋黄粉和0.2%猪胆盐。

1.2 实验方法

1.2.1 小鼠高脂模型建立

48 只雄性C57 小鼠，预养一周后，12 只小鼠给予普通饲料，另外36 只小鼠给予高脂饲料，高脂血症模型造模4 周后，禁食12 h 眼眶静脉丛采血，测定胆固醇、甘油三酯等血脂指标，以确定模型是否成功。

1.2.2 实验动物分组

造模成功后，36 只高脂饲料小鼠随机分为模型组、巴拉圭茶低剂量组、巴拉圭茶高剂量组，每组12 只。对照组继续进食基础饲料，其余3 组继续进食高脂饲料，高脂+巴拉圭茶低剂量组灌胃1 g·kg-1剂量巴拉圭茶，高脂+巴拉圭茶高剂量组灌胃2 g·kg-1剂量巴拉圭茶，灌胃容量为20 mL·kg-1，连续灌胃4 周。

1.2.3 组织样品采集

小鼠禁食12 h，取肝脏组织，在预冷的生理盐水中冲洗干净后，按照比例称取肝脏组织和生理盐水（w ∶v=1 ∶9）混合匀浆，低温离心，取上清液，置于-20 ℃环境中备用。

1.2.4 氧化还原指标测定

严格按照试剂盒说明测定肝脏中活性氧自由基（ROS）水平、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）的含量。

1.3 数据处理

使用SPSS 软件对数据进行处理分析，结果以“平均值±标准差”表示，显著水平为p ＜0.05，极显著水平为p ＜0.01。

2 结果与分析

2.1 巴拉圭茶对小鼠肝脏中活性氧自由基水平的影响

脂类代谢过程会有自由基的产生，长期高脂膳食会导致过量的自由基无法及时得到清除，造成机体氧化还原状态失衡。ROS 是反应机体氧化还原状态的一个重要指标，如图1 所示，与对照组相比，高脂日粮可显著提高小鼠肝脏中ROS 水平（p ＜0.05），与模型组相比，低剂量巴拉圭茶和高剂量巴拉圭茶均可显著降低小鼠肝脏中ROS 水平（p ＜0.05），巴拉圭茶低剂量组和巴拉圭茶高剂量组小鼠肝脏中ROS 水平差异显著，说明巴拉圭茶对降低高脂血症小鼠肝脏中ROS 水平具有一定的作用。

图1 巴拉圭茶对小鼠肝脏中活性氧自由基水平的影响图

2.2 巴拉圭茶对小鼠肝脏中丙二醛含量的影响

MDA 的含量可以间接反应组织细胞受自由基攻击的程度，如图2 所示，与对照组相比，高脂日粮可显著提高小鼠肝脏中丙二醛含量（p ＜0.05），与模型组相比，高剂量巴拉圭茶可显著降低小鼠肝脏中丙二醛含量（p ＜0.05），巴拉圭茶低剂量组可降低小鼠肝脏中丙二醛含量，但差异不显著，说明高剂量巴拉圭茶对降低小鼠肝脏中丙二醛含量具有一定的作用。

2.3 巴拉圭茶对小鼠肝脏中过氧化氢酶活性的影响

过氧化氢酶是抗氧化体系中一个重要的酶，具有重要作用，如图3 所示，与对照组相比，高脂日粮可显著降低小鼠肝脏中过氧化氢酶活性（p＜0.05），与模型组相比，低剂量巴拉圭茶和高剂量巴拉圭茶均可显著提高小鼠肝脏中过氧化氢酶活性（p＜0.05），巴拉圭茶高剂量组和对照组小鼠肝脏中过氧化氢酶活性差异不显著，说明巴拉圭茶对提高小鼠肝脏中过氧化氢酶活性具有一定的作用。

图2 巴拉圭茶对小鼠肝脏中丙二醛含量的影响图

2.4 巴拉圭茶对小鼠肝脏中超氧化物歧化酶活性的影响

图3 巴拉圭茶对小鼠肝脏中过氧化氢酶活性的影响图

超氧化物歧化酶可以协助清除过剩的自由基，对于清除体内ROS 具有关键作用，如图4 所示，与对照组相比，高脂日粮可显著降低小鼠肝脏中超氧化物歧化酶活性（p＜0.05），与模型组相比，低剂量巴拉圭茶和高剂量巴拉圭茶均可显著提高小鼠肝脏中超氧化物歧化酶活性（p＜0.05），对照组和巴拉圭茶高剂量组小鼠肝脏中超氧化物歧化酶活性差异不显著，说明巴拉圭茶对提高小鼠肝脏中超氧化物歧化酶活性具有一定的作用。

图4 巴拉圭茶对小鼠肝脏中超氧化物歧化酶活性的影响图

3 结论

随着社会的发展，有更多的人们开始关注饮食健康，而膳食结构的变化对人们的健康具有重要的影响，因此有关膳食结构与健康的课题非常值得关注。本实验通过研究巴拉圭茶对高脂血症小鼠氧化还原状态的影响，发现巴拉圭茶能够显著降低高脂血症小鼠肝脏中ROS 水平和MDA 含量，提高CAT 和SOD 活性，说明巴拉圭茶对改善高脂血症小鼠氧化还原状态具有一定的作用，已有研究表明巴拉圭茶对改善小鼠氧化还原状态，保持机体健康具有重要意义[4-6]，抗氧化活性往往与机体健康具有密切关系，接下来还需进一步研究巴拉圭茶对机体氧化还原状态的影响与机体健康之间的关系。