5 种银杏速溶茶饮料中茶多酚和黄酮类 化合物含量的测定

◎ 孙 巍，方 辉

（南通大学生命科学学院（海洋学院），江苏 南通 226001）

银杏为银杏科银杏属[1]，是一种药食同源的植物。银杏黄酮可以清除自由基，对癌细胞的生长进行抑制，还能改善人体心脑器官循环，保卫人体心脑器官安全。茶多酚是茶叶中酚类化合物及其衍生物的总称，茶多酚的应用广泛，例如，将其作为保鲜剂，可以替换人工合成的抗氧化剂用来保鲜肉制品。银杏茶饮料中起降脂作用的药效活性成分为银杏黄酮和茶多酚。儿茶素是茶多酚的重要成分，占茶多酚总元素的20%[2]，本文选取泰州市售5 款不同品牌银杏速溶茶产品，对其儿茶素、黄酮类物质进行检测。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

无水乙醇，冰乙酸、甲醇、乙腈、儿茶素标准品（南京森贝伽生物科技有限公司）、芦丁对照品（上海哈灵生物科技有限公司）、5% NaNO2、5% Al（NO3）3、4% NaOH 及纯水。

泰州市售5 款银杏速溶茶饮料标签如表1 所示。

表1 5 款银杏速溶茶饮料的配料表及产品质量标准表

1.2 仪器与设备

数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、Waters600 型高效液相色谱仪（杭州瑞析科技有限公司）、控制器、氦气脱气系统、UV-9000S 紫外可见分光光度计（广州瑞丰实验设备有限公司）及721 可见分光光度计（上海光学仪器厂）。

1.3 方法

1.3.1 儿茶素含量的测定

（1）样品预处理。参照GB 5009.3—2016 测得含水率。准确称取银杏速溶茶预混粉包的粉末3 g 于100 mL 锥形瓶，加60 mL 无水乙醇，置于75 ℃水温的超声波仪器中，250 W 超声浸提20 min，趁热抽滤，冷却后定容。

（2）标准溶液的配制。分别准确称取表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素没食子酸酯及儿茶素标准品，配制成100 mg·L-1的标准母液。用HPLC外标法定量。

（3）HPLC 色谱条件。A 相为0.2%乙酸水溶液，B相为乙腈，流速为1.0 mL·min-1，柱温25 ℃；梯度洗脱：A 相 梯 度 变 化 为0 ～5 min，93%；5 ～33 min，

93%→70%；33 ～38 min，70%→71%；38 ～46 min，71% →24%；46 ～51 min，24%；51 ～52 min，24%→93%；52 ～60 min，93%。进样量为5 μL，检测波长280 nm，根据色谱峰的保留时间定性，辅以外标法峰面积定量。

1.3.2 黄酮类物质含量的测定

（1）绘制标准曲线的方法。取用适量的样品液，在5% NaNO2碱性条件中，经Al（NO3）3水解显色，以该溶液为参比溶液。取标准液于比色管，用水稀释，以试剂为参比，在400 ～680 nm 测吸光度，发现510 nm波长吸收最大，故选510 nm 做检测波长。

分别量取芦丁（0.25 mg·mL-1）进行对照0 mL、2 mL、4 mL、6 mL、8 mL、10 mL 和12 mL，将量取溶液放入50 mL 容量瓶内[3]，勾兑蒸馏水到18 mL，加入5% NaNO21 mL，静置5 min，加5% Al(NO3)31 mL，静置5 min，加4% NaOH 8 mL，用蒸馏水补足到刻度，静置。在510 nm 波长处测吸光度。

（2）测定黄酮类物质含量的方法。取茶粉末3 g于烧瓶中，加30 倍量的乙醇（70%），80 ℃水浴回流，冷却[4]。用乙醇补足消减的重量，过滤后转移。取样品液1 mL 放入50 mL 容量瓶[5]，加入蒸馏水稀释至12 mL。加5% NaNO21 mL，静置5 min，加Al(NO3)31 mL，静置5 min，加4% NaOH 8 mL，蒸馏水稀释至刻度，静置，510 nm 波长处测定。

2 结果与分析

2.1 儿茶素含量的测定结果

2.1.1 高效液相色谱的定量标准方程儿茶素的标准曲线方程见表2。

2.1.2 银杏茶饮料中儿茶素含量

高效液相色谱对5 种银杏速溶茶进行儿茶素含量测定，见图1。

计算儿茶素类浓度和不同银杏茶中儿茶素的绝对总量，详见表3。

表2 儿茶素的标准曲线方程表

图1 高效液相色谱叠加图

表3 5 款速溶银杏茶饮料中儿茶素含量表

2.2 黄酮类物质含量的测定结果

2.2.1 标准曲线

以芦丁质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，所得线性回归方程为y=0.859 3x-0.016 8，相关系数r=0.999 5。测定结果见表4。

表4 芦丁对照品测定结果表

2.2.2 黄酮类物质含量

黄酮含量的计算结果详见表5。

表5 银杏速溶茶饮料的黄酮类含量测定结果表

2.3 讨论

5 种样品的茶多酚和总黄酮含量如表6 所示，变异系数如表7 所示。

表6 5 款银杏速溶茶中茶多酚和总黄酮含量表

表7 5 款银杏速溶茶中茶多酚和总黄酮含量分析结果表

茶多酚含量平均值为2 697 mg·kg-1，变异系数为40.59%，数据之间离散程度高，表明不同品牌银杏速溶茶饮料之间茶多酚含量差异明显，茶饮料茶多酚含量差异会对茶饮料质量特性产生影响。国家市场监督管理总局要求茶多酚含量不得低于200 mg·kg-1，5 种银杏速溶茶中茶多酚含量为1 420 ～4 250 mg·kg-1，测定结果表明，泰州市售5 款银杏速溶茶中茶多酚的含量均能达到国标要求。经实验测定，含水率、总黄酮含量的平均值分别为8.68%、6.428%，变异系数均小于5%，说明在该5 种银杏速溶茶中含水率、总黄酮含量差异不明显。实验结果表明，5 款银杏速溶茶饮料的质量指标均符合相关标准，品牌5 的茶多酚含量最高，品牌3 的茶多酚含量最低，综上所述，笔者认为品牌5 为5 种品牌中的高品质银杏茶饮料。

3 结论

有医学研究表明，当人体一次摄入茶多酚的剂量达到160 mg 时，茶多酚可有效抑制亚硝化反应，产生保健效果，一次摄入480 mg 时起到最大抑制作用。按照建议冲泡量，饮用一杯品牌5 银杏速溶茶饮料所摄入的茶多酚含量可达到有效量。银杏黄酮对人体肝脏损伤具有较好的生理修复作用，由于人体不能直接合成黄酮类化合物，因此银杏速溶茶作为人体从外界获取黄酮类化合物的途径显得十分重要。银杏茶样品中总黄酮的含量最高为品牌5 的6.47%，本文5 种样品中的品牌5 为5 种品牌中的高品质银杏茶保健饮料。