4 413例包头地区女性高危宫颈人乳头瘤状病毒(hrHPV)基因型的流行病学研究

王兴宇，胡 海，张 晶

(1.内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院，内蒙古 包头 014040；2.包头市中心医院)

宫颈癌在低收入国家中是第二常见的诊断性癌症，同时也是引起女性死亡的三大癌症之一[1]。高危人乳头状瘤病毒(hrHPV)的持续感染是高级宫颈上皮内瘤变(CIN2/3)和浸润性宫颈癌(ICC)发展的必要因素[2]。迄今为止，超过170种基因型可感染肛门上皮细胞，其中有12个基因型因其致癌潜力高而被列为是“高危型”[3]。HPV16和HPV18是众所周知的致癌基因型，另外HPV31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68型也与宫颈癌的发生有密切关系[3-4]。

目前，hrHPV测试法被作为检查未知意义的非典型鳞状细胞(ASCUS)结果或与临床实践的宫颈细胞学联合的一种额外方法[5-6]。最近，美国食品和药物管理局(FDA)批准将hrHPV测试作为初步筛查的方法，这些检测使用HPV16和HPV18基因分型以及其他12种hrHPV基因型组成的混合型[7]。除HPV筛查方案外，HPV疫苗接种也已被证明是一种针对HPV感染的有效方案，近期已在大多数国家实行。然而在内蒙古包头地区尚未进行该疫苗接种的计划。

高危HPV基因型在世界范围内非常普遍，HPV基因型因地理区域而异，性传播HPV可能导致宫颈癌的发生[8]。本研究可为包头地区的HPV筛查奠定基础。

1 对象与方法

1.1研究人群 2015年4月至2017年7月，共有4 413名女性到包头市中心医院进行HPV检测，年龄16～91岁，平均年龄43.1岁。根据美国癌症协会的宫颈癌筛查指南，将研究人群分为11组。本研究得到本院医学伦理审查委员会批准。参与者均签订了知情同意书。在本院完成的数据收集过程中保证了保密性。本研究匿名分析数据。

1.2样本采集 采用亚能生物技术(深圳)有限公司生产的宫颈脱落细胞采集器(宫颈刷)进行采样。由妇科医生对标本进行采集，取出宫颈刷置于宫颈口，单方向旋转4～5周以获得足量的上皮细胞标本，然后将宫颈刷头部放入细胞保存液管中，沿刷柄折痕处将宫颈刷柄折断，旋紧管盖，做好标本标识，登记编号后送检。标本一经采集，当日送检；标本室温保存<12 h，2～8 ℃保存<7 d，-20 ℃以下保存<3个月。避免反复冻融。

1.3仪器与试剂 仪器选用BD公司Step One Plus Real-Time PCR仪进行基因分型，所用试剂为上海之江生物医药科技有限公司生产的人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒。

1.4统计数据处理 所有统计学分析使用SPSS 13.0进行。计数资料以率(%)表示，各组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1HPV感染的总流行率 包头女性人群HPV感染率为15.6 %(690/4 413)。在所有HPV阳性的女性中，单基因感染率为76.7 %(529/690)，混合基因感染率为23.3 %(161/690),以单一性感染为主，进一步用2检验分析结果显示，单一感染和混合感染的构成比差异具有统计学意义(χ2=66.773，P=0.000)。在多发HPV感染的女性中，81.4 %(131/161)的患者感染了2种基因型，最常见的组合是16+58(14例)、39+68(9例)、52+58(8例)；另外，有11.8 %(19/161)患者感染3种基因型，最常见的为16+31+39型；最后，分别有5.0 %(8/161)和1.9 %(3/161)的患者感染了4种和4种以上的基因型。

我们回顾调查了3年期间的HPV流行率，以便更详细地评估与HPV感染相关的年龄趋势。基于年龄分布将患者分为11组，统计不同年龄组患者的HPV感染率，并进行对比分析，结果显示不同年龄组之间患者的感染率差异有统计学意义(χ2=63.116，P=0.000)。HPV感染的年龄分布在整体HPV流行率中显示出双峰曲线，分别为16-20岁(47.2 %)年龄组和56-60岁(25.5 %)年龄组，见图1。

图1 2015-2017年HPV在女性中的流行率

2.2HPV基因型分布特征 总体看来，在感染HPV的女性中，HPV16无论是以单基因型或混合基因型出现均是感染概率最高的基因型(43.2 %)，其次是HPV58(17.2 %)、HPV18(9.4 %)。见表1。

表1 HPV基因型流行率(n=690)

根据年龄确定HPV基因型的分布见表2。对于不同年龄组感染率可看出，HPV16基因型的阳性率最高。对于不同年龄组的患者，年轻女性患者患病率均高于年龄较大的女性患者。

表2 HPV在不同年龄阶层感染流行性的分布情况

3 讨论

目前大量的研究与实践结果表明，严重危害女性健康的宫颈癌是唯一一种可经过医学干预降低发病率和死亡率的人类恶性肿瘤。根据宫颈癌的危险性差异，分为高危型HPV和低危型HPV两大类。研究证实，高危型HPV的持续感染是宫颈癌发生的前提条件。

不同地区之间HPV流行情况存在着较大的差异。本研究发现的hrHPV阳性率(15.6 %)低于海口(31.9 %)[9]、广东(20.0 %)[10]、重庆(27.3 %)[11]、济南(25.7 %)[12]和上海(22.6 %)[13]，但与杭州(19.9 %)[14]和南昌(18.4 %)[15]的比例相似。与中国人口调查数据相一致，HPV16、52和58基因型是主要的hrHPV类型，但与全球范围内结果存在差异(HPV16,18和45，HPV16,18和33以及HPV16,18和58是最常见的基因型),在研究人群中，HPV16和58占感染的50.2 %，代表亚洲人群中的常见类型，这一比例明显高于全球平均感染率(14.0 %)[8]。

年龄特异性分布呈现双峰曲线，第一个峰值出现在16～20岁年龄组，中年患病率较低，这反映了HPV感染的自然病史。女性中检测HPV通常在15岁以上，在发生性行为后即应开始。现发现在年轻女性中患病率高达80 %，主要是短暂性感染，在1年或2年内可清除。在研究人群中，我们观察到在56～60岁(28.5 %)年龄较大的女性中出现了的第二个高峰，这与中美洲、东南亚和西非地区观察到的趋势相似[16-17]。56～60岁年龄组的女性HPV感染率略有增加可能反映了绝经期HPV的持续性或潜在的HPV再激活，可能与激素和HPV活动周期的相互作用以及宿主的易感性相关。

由于经济条件、文化存在多样性、遗传变异、HPV疫苗接种意识和生活方式存在差异，HPV的流行率具有地区差异，北京为9.9 %，海口为31.9 %，西方国家感染率为67.1 %～71.3 %[8]，值得注意的是，中国HPV疫苗接种率仅为16.0 %。免疫实践咨询委员会(ACIP)建议二价HPV疫苗、四价HPV疫苗和九价HPV疫苗(9vHPV)进行常规疫苗接种。在中国，最迫切的公共卫生问题是增加HPV疫苗接种覆盖率，并提高疫苗接种效果。

HPV类型的HPV流行率和分布在不同的女性年龄组之间差异很大。这项研究的数据可能对包头地区HPV的宫颈癌筛查工作很有价值，并可帮助包头地区未来的HPV疫苗接种，疾病的筛查、诊断和治疗。