XPG rs873601位点多态对肺癌铂类药物化疗疗效影响的研究

邝仕成, 王苏丹, 朱瑞楠, 吕鹏飞,肖 莎

肺癌发病数和死亡数逐年上升，严重威胁中国人民健康。肺癌包括非小细胞肺癌(non small cell lung cancer, NSCLC) 和小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)。NSCLC占肺癌总数的85% 以上，其治疗主要依赖于化疗和生物靶向治疗。SCLC占肺癌总数的12%～15%，对化放疗敏感，手术治疗仅对部分早期患者有益。第3代化疗药物(如长春瑞滨、吉西他滨、紫杉醇、多西紫杉醇等)与铂类药物的联合用药是目前临床上用于NSCLC一线标准化疗方案，可有效延长患者的生存期，但5年生存率仍较低。

XPG基因(xeroderma pigmentosum group G，XPG) 是核苷酸切除修复(nucleotide excision repair, NER) 系统中重要的一员。其在TCR途径中，优先清除活跃基因的DNA转录断链的DNA损伤；在GGR途径中，则清除全基因组损伤。然而在肿瘤铂类药物化疗中，又可成为影响铂类药物化疗敏感性的因素之一。该研究以中国海南肺癌人群为研究对象，提取120例肺癌患者血液样品中的DNA，采用质谱法检测XPG rs873601位点多态，比较不同基因型与肺癌铂类药物化疗疗效及预后的关系，为肺癌患者的精准治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 病例资料

该研究收集了2014年1—12月来自海南医学院附属海南医院和海南医学院第一附属医院肺癌患者120例。患者的入选标准如下所述：① 经组织学病理确诊；② 均签署知情同意书；③ 患者均接受以铂类药物为主的化疗，3周为一个周期，2～3个周期化疗后按照世界卫生组织(WHO)的标准进行疗效评价。该研究通过医学伦理委员会批准(HYLL-2019-034号)。

1.2 流行病学调查

获得患者知情同意之后，对患者进行问卷调查，内容包括基本人口信息(姓名、性别、年龄、籍贯、民族等)、吸烟情况、饮酒情况、家族肿瘤史、铂类药物化疗情况(化疗周期、化疗方案及化疗效果等)、通过电话回访患者的生存期情况。吸烟者：以往吸烟超过半年、平均每天吸烟大于1支；饮酒者：以往饮酒超过半年、平均每天饮酒大于50 ml。

1.3 DNA提取及其多态性分析

采集患者2～3 ml的外周静脉血于枸橼酸钠抗凝方式的真空采血管中，在4 ℃的冰箱保存。提取DNA的方法按照TaKaRa全血DNA试剂盒操作步骤进行，采用质谱法分析XPG基因的rs873601位点的基因多态性，委托上海生工生物工程股份有限公司检测。

1.4 统计学处理

Epidata软件录入流行病学调查数据信息，导出整理为Excel数据表，应用SPSS 20.0统计软件进行数据分析。以

χ

检验或Fisher′s确切概率法(当出现期望值<5时)检验不同XPG基因型之间化疗疗效的差异。为了控制潜在的混杂因素如性别、年龄、吸烟、饮酒等因素，采用多因素Logistic回归分析得到校正后的

P

值、

OR

值及其95%

CI

。用Kaplan-Meier法计算总生存期(OS)，Logrank检验比较不同基因型的生存率差异，Cox比例风险模型评估混杂因素对实验结果的影响，并计算

OR

及95%

CI

。采用双侧检验，检验水准为

α

=0.05。

2 结果

2.1 研究对象基本情况

120例肺癌患者中男女比例为64.2%、35.8% ，平均年龄为61.21岁，其中吸烟、饮酒的患者占比分别为21.7%、51.7%。见表1。

表1 120例肺癌患者的基本情况

2.2 不同病理类型肺癌与化疗疗效的关系

在120例肺癌患者中，只有70例明确了病例类型，结果显示，两种病理类型的肺癌化疗有效率差异无统计学意义(

χ

=0.428，

P

=0.531)，见表2。

表2 不同病理类型肺癌与化疗疗效关系[n(%)]

2.3 研究对象XPG基因rs873601位点基因型分

布情况

120例肺癌患者中，XPG基因rs873601位点基因型包括：野生型(AA)、杂合型(AG)、突变纯合型(GG)。三种基因型频率分别为53例(44.2%)、61例(50.8%)、6例(5%)，符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(

χ

=4.81，

P

>0.05)。

2.4 XPG rs873601位点多态与肺癌铂类药物化疗疗效的关系

120例患者经2个周期的铂类药物化疗后，根据WHO的评价标准评价疗效，6例达到完全缓解(CR)、33例达到部分缓解(PR)、56例达到稳定(SD)、25例疾病进展(PD)，4组患者间疗效差异有统计学意义(

χ

=7.747，

P

=0.046)。经Logistic回归分析，病人的性别、年龄、是否吸烟、是否饮酒等因素均与患者的铂类药物化疗疗效之间差异无统计学意义，校正后仅XPG基因型与化疗疗效明显相关。见表3、4。

表3 XPG rs873601位点多态与肺癌铂类药物化疗疗效的关系[n(%)]

表4 校正后XPG rs873601位点多态与肺癌铂类药物化疗疗效的关系[n(%)]

2.5 XPG rs873601位点多态与OS的关系

120例肺癌患者各基因型OS曲线。见图1。其中AA基因型生存率最低，各组间生存率差异无统计学意义(

χ

=3.300,

P

=0.348)。见表5。Cox比例风险模型用于控制性别、年龄、是否饮酒、是否吸烟等混杂因素后，对不同基因型患者生存率无影响。见表6。

表5 XPG rs873601位点不同基因型与肺癌生存率的关系

表6 校正混杂因素后XPG rs873601位点不同基因型与肺癌生存率的关系

图1 XPG rs873601位点不同基因型的肺癌生存率

3 讨论

铂类药物是目前临床上用于治疗恶性肿瘤最普遍的化疗药物之一，主要用于肺癌、宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、睾丸癌、大肠癌等的治疗。以铂类药物为基础的联合化疗方案是NSCLC一线化疗方案。但其有效率仅25%～30%，5年生存率不到15%。耐药问题是目前治疗面临的一大难题，任何干扰细胞凋亡、影响铂类药物与细胞核内DNA结合的因素均可导致其耐药性的发生。

肺癌发生发展是遗传和环境因素共同作用的结果，在肺癌发生过程中，人类的防御机制起着重要保护作用。多种基因多态可用来预测肺癌化疗疗效或预后，如XPG、ERCC1、XPD、XRCC1等基因SNP，均参与DNA损伤修复过程。徐向勇 等研究表明ERCC1基因C8092A位点CC、CA+AA基因型的中位无进展生存时间分别为4.9月和4.3月，差异有统计学意义(

P

<0.05)；ERCC1表达阴性患者中TP疗效总有效率显著高于阳性患者，差异有统计学意义(

P

<0.05)，表明ERCC1 SNP与肺癌化疗疗效及预后间相关联。滕雪 等Meta分析中显示以铂类药物为基础治疗的肺癌患者中，XPD Lys751Gln位点携带Lys/Gln+Gln/Gln基因型患者的PFS明显低于携带Lys/Lys基因型患者；XPDAsp312Asn位点携带Asp/Asn+Asn/Asn基因型患者的化疗有效性显著低于携带Asp/Asp基因型患者，因此，XPD 751位点 SNP与患者预后相关，312位点多态与化疗有效性相关。

XPG基因在NER系统中作为结构特异的核酸内切酶，同时参与TCR和GGR途径，对形成稳定DNA结构起重要作用。有研究表明XPG基因多态与大肠癌的化疗敏感性相关，其与上皮性卵巢癌等肿瘤的化疗预后相关联。滕雪 等的Meta分析结果显示晚期NSCLC患者携带XPG His46His基因中突变型TT化疗敏感性明显低于野生型CC，差异有统计学意义。贾晓锋 等研究表明携带XPG His46His CC与CT+TT基因型的患者治疗有效率之间差异有统计学意义；CC与CT+TT基因型中位TTP之间差异有统计学意义。该研究表明70例明确病理类型的肺癌患者中，NSCLC化疗有效率为22.6%，SCLC化疗有效率为12.5%，两组间疗效差异无统计学意义，与封婷 等研究结果相似。另外，XPG AA基因型化疗有效率最高，GG基因型最低，且不同基因型患者间疗效差异有统计学意义。说明XPG rs873601位点多态与肺癌患者化疗疗效相关，可作为检测指标用来预测铂类药物的化疗疗效，指导肺癌患者铂类药物治疗的个体化应用，提高其化疗有效性。XPG rs873601位点多态与肺癌患者生存率的关联分析中，AG+GG基因型生存率最高，AA基因型生存率最低，但不同基因型患者的生存率差异无统计学意义，COX风险回归结果同样表明XPG rs873601位点多态与肺癌生存率之间无相关性。由于该研究纳入的样本量有限，且仅为海南人口，故研究的适用性存在一定局限性；其次，环境因素、肿瘤类型、病理类型、多基因作用等都可能影响研究结果，因此该研究所得结论尚需通过大样本进一步验证。