马尾松松针化学成分分析

孟亚会，闵建华，尚 强

(1.珠海圣美生物诊断技术有限公司，广东 珠海 519000；2.丽珠医药集团股份有限公司，广东 珠海 519000)

马尾松(PinusmassonianaLamb.)为松科(Pinaceae)松属(PinusLinn.)常绿乔木，广泛分布于江苏、安徽、河南及长江中下游各省区，资源丰富。马尾松具有祛风湿止痒的功效，可用于治疗风湿萎痹、跌打损伤、失眠、浮肿、湿疮及疥癣，并能治疗流脑、流感、钩虫病等病症。近年来，松针广泛用于治疗风湿病、心脑血管疾病、糖尿病、肥胖病、肝病、胃病、淋病、肿瘤等[1-2]，其临床价值日益受到重视。为探讨松针的药效物质基础，我们对马尾松松针进行了一系列化学成分分析。

关于马尾松的化学成分，国内外研究较多，报道其成分主要为木脂素、黄酮和挥发油等。已经从马尾松松针中分离并鉴定的木脂素主要有：苯并四氢呋喃新木脂素类，包括2, 3-二氢-2-(4′-羟基-3′-甲氧基苯基)-7-甲氧基-3-羟甲基-苯并呋喃丙醇、3-O-a-L-鼠李糖苷等；苯代四氢萘木脂素类，包括异落叶松脂素、异落叶松脂素-9′-O-a-L-阿拉伯糖苷等；苯氧醚木脂素类，包括1-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-[4-(3-羟丙基)-2-羟基苯氧基]-1, 3-丙二醇、β-D-葡萄糖苷等；简单木脂素类，8-8′位相连的有2, 3-二(4′-羟基-3′-甲氧基苯甲基)-1, 4-丁二醇等，7-7′位相连的包括开环异落叶松脂素、开环异落叶松脂素-9-O-β-D-葡萄糖苷等，双环氧木酯素有(+)-松脂素，(+)-松脂素-4′-O-β-D-葡萄糖苷；毕跃峰等[6]还分离出了一种木脂内酯：3-羟基-3, 4-二(4′-羟基-3′-甲氧基苯甲基)-2(3H)-呋喃酮，以及一种苯并二氧六环木酯素：2, 3-二氢-2-(4′-羟基-3′-甲氧基苯基)-3-羟甲基-6-(3″-O-a-L-鼠李糖基-羟丙基)-苯并二氧六环。Shen Zhaobang等[7]从马尾松松针中分离出7种黄酮苷：花旗松素(taxifolin)，花旗松素-3′-O-β -D-葡萄糖苷(taxifolin-3′-O-β-D-glucopyranoside)，儿茶素[(+)-catechin]，柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(naringenin-7-O-β-D-glucopyranoside)，6-C-甲基香树素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6-C-methylaromadendrin-7-O-β-D-glucopyranoside)，花旗松素-3′-O-β-D-(6″-O-苯乙肽基)-葡萄糖苷(taxifolin-3′-O-β-D-(6″-O-phenylacethyl)-glucopyranoside)，圣草酚-3′-O-β-D-葡萄糖苷(eriodictyol-3′-O-β-D-glucopyranoside)。秦玉琴等[8]从马尾松花粉中分离并鉴定了10个化合物：柚皮素，花旗松素，山奈酚，山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，α-D-呋喃果糖，对羟基苯甲酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，胆甾醇，豆甾醇，β-谷甾醇和β-胡萝卜苷。李丽等[9]从马尾松花粉中分离并鉴定了11个化合物：β-谷甾醇，单硬脂酸甘油酯，1-正十六烷酸甘油酯，对羟基苯甲醛，3-羟基-4-甲氧基苯甲酸，3, 3′, 5 , 5′, 7-五羟基二氢黄酮醇，双氢山柰素，对羟基苯甲酸，3 , 4-二羟基苯甲酸，山柰酚，丁二酸。胡文杰等[10]采用水蒸气蒸馏法提取马尾松松针挥发油，利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)对挥发油进行化学成分分析，共鉴定出了34种化合物，其相对质量分数占挥发油总量的95.76%，主要化合物为石竹烯(15.85%)、α-杜松醇(12.12%)、大根香叶烯B(10.81%)、3-古巴烯(7.94%)、4-杜松二烯(6.65%)、γ-依兰油烯(6.01%)、蛇麻烯(5.82%)、β-瑟林烯(3.63%)等[3-5]。

本研究对马尾松松针甲醇提取物的正丁醇萃取部分进行了化学成分研究，从中分离得到6个化合物，鉴定了其中2个化合物，为2个木脂素苷，经波谱、质谱数据分析，分别鉴定为：(7S, 8R)-4′, 7-epoxy-3-methoxy-3′, 4′, 4, 9, 9′-lignanepentol-4′-O-β-D-glucopyranoside(1),(7R, 8S)-4′, 7-epoxy-3-methoxy-3′, 4′, 4, 9, 9′-lignanepentol-4′-O-β-D-glucopyranoside(2)。其中化合物1、2为首次从马尾松中分离得到。现将实验过程报道如下。

1 仪器与材料

旋光经SEPA-300仪测定；红外光谱(IR)采用(KBr)压片，由Bio-Rad FTS-135型红外光谱仪测定；紫外光谱由Shimadzu 2410PC光谱仪测定；质谱(EI-MS，FAB-MS和HR-FAB-MS)用VG Autospec-3000型质谱仪测定，其中EI-MS在70ev 下测定；核磁共振谱用Bruker AM-400和DRX-500超导核磁共振仪测定，TMS为内标；薄层层析板和柱色谱硅胶由青岛海洋化工厂生产；D101大孔树脂由天津农化公司生产；Sephadex LH-20由德国默克公司生产；反相填充材料Lichroprep RP-18 gel(40-63 μm)为德国默克公司产品；HPLC为美国安捷伦公司产品。

植物样品于2018年7月采于云南省昆明市西山，由中国中药工程技术研究中心曹晖研究员鉴定为马尾松(PinusmassonianaLamb.)。

2 提取与分离

将马尾松甲醇提取物的正丁醇萃取部分，拌样上硅胶柱，用氯仿-甲醇(20∶1 ～ 1∶1)进行粗分，分为7个部分，然后将成点较好的部分再经Sephadex LH-20凝胶柱以甲醇粗分，再反复用硅胶柱细分，最后经反相柱和半制备柱纯化得到化合物1(6.5 mg)、2(3.5 mg)。其结构式，见图1。

图1 首次从马尾松松针中分离得到的化合物结构式

3 结构鉴定

化合物1：无色油状物，FAB--MS显示其准分子离子峰为m/z(%) 508[M]-，[α]：-48.8°。1H-NMR(CD3OD, 400MHz) δ： 7.06(1H, d, J=1.8 Hz, H-2), 7.13(1H, d, J=8.4 Hz, H-5), 6.95(1H, dd, J=8.4 Hz, 1.8 Hz, H-9), 5.54(1H, d, J=5.7 Hz, H-7), 3.47(1H, m, H-8), 6.59(1H, s, H-2′), 6.57(1H, s, H-6′), 2.57(2H, t, J=7.5 Hz, H-7′), 1.78(2H, m, H-8′), 3.55(2H, t, J=6.5 Hz, H-9′), 3.83(3H, s, 3-OMe)。13C-NMR(CD3OD, 100 MHz) δ： 138.6(s, C-1), 111.0(d, C-2), 150.8(s, C-3), 147.4(s, C-4), 117.9(d, C-5), 119.3(d, C-6), 88.2(d, C-7), 56.0(d, C-8), 65.2(t, C-9), 136.9(s, C-1′), 117.1(d, C-2′), 141.9(s, C-3′), 146.4(s, C-4′), 129.4(s, C-5′), 116.7(d, C-6′), 32.7(t, C-7′), 35.8(t, C-8′), 62.4(t, C-9′), 102.7(d, C-1″), 74.9(d, C-2″), 78.1(d, C-3″), 71.3(d, C-4″), 77.8(d, C-5″), 62.3(t,C-6″), 56.6(q, 3-OMe)。以上数据与文献[8]报道一致，鉴定为(7S, 8R)-4′, 7-epoxy-3-methoxy-3′, 4′, 4, 9, 9′ -Lignanepentol-4′-O-β-D-glucopyranoside。

化合物2：无色油状物，FAB--MS显示其准分子离子峰为m/z(%) 507[M-H]-。[α]：-25.5°。1H-NMR(CD3OD, 500 MHz) δ： 7.14(1H, d, J=8.4 Hz, H-5), 7.06(1H, d, J=1.9 Hz, H-2), 6.95(1H, dd, J=8.4 Hz, 1.8 Hz, H-9), 6.58(1H, s, H-2′), 6.56(1H, s, H-6′), 5.54(1H, d, J=5.7 Hz, H-7), 3.83(3H, s, 3-OMe), 3.55(2H, t, J=6.5 Hz, H-9′), 3.45(1H, m, H-8), 2.55(2H, t, J=7.3 Hz, H-7′), 1.78(2H, m, H-8′)。13C-NMR(CD3OD, 125 MHz) δ： 138.6(s, C-1), 111.0(d, C-2), 150.8(s, C-3), 147.4(s, C-4), 117.9(d, C-5), 119.3(d, C-6), 88.1(d, C-7), 56.0(d, C-8), 65.2(t, C-9), 136.9(s, C-1′), 117.0(d, C-2′), 141.9(s, C-3′), 146.4(s, C-4′), 129.4(s, C-5′), 116.7(d, C-6′), 32.7(t, C-7′), 35.8(t, C-8′), 62.4(t, C-9′), 102.7(d, C-1″), 74.9(d, C-2″), 78.2(d, C-3″), 71.3(d, C-4″), 77.8(d, C-5″), 62.3(t, C-6″), 56.6(q, 3-OMe)。以上数据与文献[11]报道一致，鉴定为(7R,8S)-4′, 7-epoxy-3-methoxy-3′, 4′, 4, 9, 9′-lignanepentol-4′-O-β-D-glucopyranoside。