基于QuEChERS 方法检测蔬菜和水果中农药残留的质量控制分析

2021-03-30丁宗博张兴龙

现代食品 2021年3期

◎ 丁宗博，李莉，张兴龙

（青岛市农产品质量安全中心，山东青岛 266000）

随着人们对食品质量安全的重视，食品检验检测对整体的质量控制有了更高的要求。质量控制措施如果不科学、不严谨，会影响检测结果的有效性，从而造成决策失误。做好蔬菜、水果中农药残留分析的质量控制是出具准确、可靠数据的前提和重要保障[1-2]。

相比传统的固相萃取前处理方法，QuEChERS 方法由于其快速、简单、廉价、有效、可靠及安全的特点，在食品安全检测中的应用越来越广泛。本文基于QuEChERS 前处理方法，对蔬菜和水果中农药残留检测过程中的关键控制点进行性析，并提出了质量控制措施。

1 样品采集的质量控制

样品采集主要包括产地和市场两个方面。产地采样时，应严格按照NY/T 789—2004[3]要求，确定抽样单元；市场采样时，同一摊位、同一品种、同一来源及同批销售的为1 个抽样单元。每个抽样单元内采集1 个代表性样本，保证被抽检的样品具有代表性和随机性。按照GB/T 8855—2008[4]规定，随机抽取该范围内的样本，每个样品的采样量应不少于3 kg，南瓜取5 个个体，花椰菜、大白菜、红甘蓝和莴苣等取10 个个体。

2 样品制备的质量控制

2.1 制样场所的要求

制样场所应洁净卫生，并具有满足样品制备相关要求的用水。如现场条件无法满足制样要求，则可就近选择合适场所进行样品制备。

2.2 制样器具的要求

应采用适合并有效的制样器具，制样器具不应对样品造成污染。每处理完一个样品后，都要对制样器具进行清洁，避免交叉污染。

2.3 制样

样品首先进行预处理，先去除杂物以及腐烂、枯萎或受病虫害侵蚀严重的个体。用于农药残留检测的样品，用干净纱布擦去附着在样品表面的泥土。如果样品附着太多泥土，可用湿毛巾擦洗或用软毛刷刷洗，并擦干。然后，按照GB 2763—2019[5]附录A 要求，确定样品的测定部位，经四分法缩分后制备样品。制样时，应采用破壁机，使样品粉碎程度尽量高，有助于克百威、涕灭威、氧乐果和吡虫啉等内吸传导性农药的提取检测。

2.4 样品分装

制备好的样品必须马上独立包装，避免相互污染，根据检测需要分装成若干份，加贴唯一性标签。不立即进行前处理的，可在-18 ～-20 ℃左右的冰柜中保存备用。测定时每份样品只解冻一次，切不可重复解冻。

3 样品运输的质量控制

样品应在24 h 内运送到实验室，否则应将样品制备冷冻后运输。样品运输过程中应采用适当措施保证样品不被污染，避免阳光直射。高温季节样品运输应选择保持低温的容器，低温包装时应使用适当的材料包裹样品，避免与冷冻剂接触造成冻伤，冷冻剂不可使用碎冰。

4 样品提取的质量控制

4.1 称样

样品制样结束后立即测定的，称样前可用称样匙先混匀，然后称量，尤其针对含水量大的样品；若样品已冷冻保存，可待其完全解冻后，在称样前用匀浆机高速匀浆混匀，然后称样。若解冻不完全就称量，容易造成乳化，也容易造成待测农药组分分布不均，检测结果不可靠。

4.2 提取

加入提取溶剂、萃取盐包涡旋振荡时振荡器力度要足够大，使其充分接触，确保提取效率。为防止加入盐包后放热反应产生结块，加入陶瓷均质子提取效果更加理想。

5 样品净化的质量控制

参照GB 23200.113—2018[6]，对于提取颜色较深的试样，需加入含有885 mg 硫酸镁、150 mg PSA 及15 mg GCB 的净化包，以去除色素。因GCB 对农药有不同程度的吸附性，要谨慎使用。对于颜色较浅的试样，使用内含900 mg 硫酸镁、150 mg PSA 的净化包即可。

6 样品浓缩、复溶的质量控制

净化离心好的上清液过0.22 μm 滤膜后可直接上LC-MS/MS 测定；上气相色谱-质谱联用仪之前，因提取溶剂为乙腈，为防止损坏色谱柱，需进行溶剂置换。此过程中氮吹仪的水浴温度设定在40 ℃左右，控制好氮气流速，以免有机相溅落容器内部或溅出，导致待测农药组分损失，影响测定结果。氮吹至近干后，加入乙酸乙酯复溶，上GC-MS/MS 测定。

7 仪器测定的质量控制

7.1 进样顺序

为防止污染，应遵循以下进样顺序：试剂空白→空白样品→质控样品→试剂空白→标准溶液→样品溶液→标准溶液→空白试剂。

需特别注意的是，对于液相色谱-串联质谱仪，流动相要现配现用，尤其是水相，时间过长容易滋生细菌，建议使用屈臣氏蒸馏水配制。

7.2 标准物质

目前，农药残留测定使用的标准品母液浓度多为1 000 mg·L-1，容量为1 mL。标准物质要密封、避光、低温保存，标签要完整，有效期要明确，并定期进行期间核查。按照GB/T 27404—2008[7]的规定，50 ～100 mg·L-1的标准储备液可-20 ℃保存，有效期为6 个月；5 ～10 mg·L-1的标准溶液-20 ℃保存，有效期为1 个月；测试用浓度可冷藏保存，有效期为1 周。过期标准溶液不可使用，需重新配制。此外，标准物质要有统一编号，保证可溯源，并填好配制记录、使用记录等。

7.3 试剂和耗材

每购入一批试剂和耗材，在使用前应按相应检验标准进行检测，对其进行杂质的检查，排除试剂、耗材中杂质对检测结果的干扰，如有必要应进行处理后再使用。一般试剂浓缩50 ～100 倍后测定，检查对被测组分是否有干扰；对新购入同一批次的耗材随机挑选一批按照检测标准方法进行回收率测定，经仪器确认回收率正常后方可使用。

7.4 质控样品

质控样品的基质，可根据检测批次的种类进行选择或选择特殊、复杂、难做的基质；质控的项目尽量要兼顾仪器、性质或者选择难做的项目；质控样品的数量要达到每20 个样品有一个质控样的要求；质控样品的回收率范围应在70%～120%，方可保证该批次检测结果的有效性。

7.5 校准

农药残留检测多采用单点校准。每进10 针样品后应进1 针标准，用前后标样来计算中间样品含量，消除仪器灵敏度变化的影响。此外，由于基质效应的影响，最好使用基质标进行校准，消除基质干扰。

对于阳性样品或检出值在限量值附近时，需进行复测。复测时需要做质控样，并使用空白基质配制标准溶液，标准溶液的浓度要接近样品的浓度；对于含量很高的样品，可选择稀释的方法上机测定。

7.6 仪器维护

与固相萃取前处理相比，QuEChERS 方法净化效果不是很理想，对仪器的污染程度更高，因此，对仪器的维护频率会更加频繁。对于液相色谱-串联质谱仪，样品测定完毕后，依次用90%水-甲醇、纯甲醇冲洗整个系统至少2 h，用无纺布沾取异丙醇-水溶液（体积比1 ∶1）擦洗锥孔及其周围，定期清洗泵头，2 ～3 个月清洗离子源等；而气相色谱-质谱联用仪要做好进样口的维护，定期更换衬管、隔垫，清洗进样针，根据出峰情况截取色谱柱柱头10 ～30 cm，调谐参数不佳时清洗离子源等，确保仪器处于最佳状态。