QuEChERS法测定动物源性食品中氟虫腈及其代谢物的残留量

2021-03-29

新疆农垦科技 2021年1期

（新疆农垦科学院分析测试中心，新疆石河子 832000）

氟虫腈是一种高效的苯吡唑类杀虫剂，且与现有的农药没有交叉抗性[1]。因此，广泛应用于水稻[2]、蔬菜[3]、棉花[4]等作物的各种害虫防治。虽然氟虫腈能有效地控制害虫，但它在环境中存在毒性和缓慢的代谢[5]。近期发现很多养殖户在畜禽饲养时使用氟虫腈作为杀虫剂，但对其并没有进行相应的处理，导致畜禽产品中检出一定量的氟虫腈及其代谢物。

关于氟虫腈及其代谢物的检测主要集中在蜂蜜、土壤、环境用水等基质中。其检测方法主要有电化学方法、气相色谱（GC）、气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）、高效液相色谱（HPLC）、液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）、液相色谱-串联离子阱等分析技术。近年来，氟虫腈在防治家禽虫害时的用量有所增加，因此建立一种快速且可靠的测定方法，具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 实验材料与试剂

乙腈、乙酸铵、甲酸、乙酸乙酯、甲醇（色谱级，德国CNW 公司）；无水硫酸镁、氯化钠（优级纯，广州化学试剂）；十八烷基键合硅胶（C18）、N-丙基乙二胺（PSA）（上海安谱实验科技公司）；超纯水（18.2 MΩ·cm）。氟虫腈、氟甲腈、氟虫腈砜及氟虫腈亚砜标准品浓度均为1 mg/mL（天津环境中心）。

1.2 仪器与设备

Waters液质联用仪（美国Waters 公司）；漩涡混合器；水浴氮吹仪；高速冷冻离心机；KQ-600DE数控超声仪；超纯水仪。

1.3 仪器参数

1.3.1 色谱条件

BEH C18 色谱柱（2.1×100.0 mm，1.7 μm），进样体积5 μL，柱温30 ℃，流动相为水-乙腈（梯度洗脱），流速为0.40 mL/min。

1.3.2 质谱条件

电喷雾负离子源，离子源温度150 ℃，脱溶剂气800 L/h，干燥气温度400 ℃，锥孔气50 L/h，以1 个母离子和2个子离子信息比较进行定性分析；对响应值最高的子离子进行定量分析。

1.4 样品处理

准确称取5.00 g 样品于50 mL 塑料离心管中，加入20 mL乙腈，10 000 r/min 高速离心5 min；吸取上清液4.0 mL置于10 mL离心管，加入200 mg C18粉末，3 000 r/min涡旋离心5 min，准确吸取2.0 mL上清液至另一10 mL氮吹管中，40 ℃下氮吹至净干，用乙腈水溶液定容至2 mL，过0.22 μm滤膜，待测。

1.5 标准曲线及检出限

采用外标法定量，在上述仪器条件下进行测定，以MS/MS 定量离子色谱峰面积（y）对浓度（x）绘制标准曲线，并求出相应的线性回归方程及相关系数。

1.6 方法回收率及精密度实验

采用对阴性样品（牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉、鸡蛋）进行加标回收试验来考察方法的准确度和精密度，计算样品加标回收率。每个添加水平连续重复进样6次，计算其相对标准偏差（RSD）。

表1 氟虫腈及其代谢物添加回收率的实验结果

2 结果与讨论

2.1 色谱-质谱分析

2.1.1 质谱参数的优化

配制10 ng/mL的4种氟虫腈及其代谢物的标准溶液，持续进样注入质谱，调节锥孔电压和碰撞能量确定氟虫腈及代谢物的质谱参数。通过优化锥孔电压，得到母离子响应值最大且稳定；优化碰撞能量，得到响应值高且出峰稳定的几个碎片离子作为子离子。

2.1.2 分离条件的选择

结合氟虫腈与其代谢物的化学结构极为接近且极性均偏弱的特点，选择BEH C18 作为分离色谱柱。本实验比较了乙腈-水，乙腈-0.1%甲酸水溶液，乙腈-5 mmol/L乙酸铵水溶液，乙腈-5 mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸），甲醇-水，甲醇-5 mmol/L乙酸铵水溶液，甲醇-0.1%甲酸水溶液，甲醇-5 mmol/L 乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）等不同流动相体系对4种化合物的相应影响。最终结果表明，流动相为乙腈-5 mmol/L 乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）的体系时，4种化合物的响应较高。

2.2 提取条件优化

选取乙腈和乙酸乙酯作为提取溶剂，并对其提取效率进行了评价。结果表明，乙腈作为提取溶剂时，提取效率高于乙酸乙酯，同时乙腈作为提取溶剂能更好地去除基质的蛋白质，有利于后续的离心和净化。

2.3 净化条件优化

本文采用QuEChERS 技术对试样净化，比较了C18 和PSA 两种不同吸附剂添加量对动物源性基质的净化效果。结果表明，C18 吸附剂比PSA 吸附剂净化效果好，4 种氟虫腈及其代谢物的回收率均在80%以上；同时当C18吸附剂用量为200 mg时，4种氟虫腈及其代谢物的回收最好。因此本实验选用200 mg C18吸附剂作为净化条件。