嗜酸乳杆菌对坏死性小肠结肠炎患儿免疫功能与肠道菌群的影响

陈强锋 杨均秀 黎子武

【摘要】 目的：探討嗜酸乳杆菌对坏死性小肠结肠炎患儿免疫功能与肠道菌群的影响。方法：选取2015年1月-2020年10月在本院诊治的坏死性小肠结肠炎患儿72例为研究对象，根据随机信封1∶1抽签原则将患儿分为研究组与对照组，各36例。对照组给予美沙拉嗪治疗，研究组在对照组的基础上给予嗜酸乳杆菌治疗，两组均治疗3个月，检测患儿免疫功能与肠道菌群的变化情况。结果：研究组总有效率为86.11%，虽高于对照组的72.22%，但差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，研究组双歧杆菌、乳杆菌含量均高于对照组（P<0.05），肠杆菌、肠球菌含量均低于对照组（P<0.05）。治疗后，两组血清白介素-6（IL-6）、IL-8含量均低于治疗前（P<0.05），且研究组治疗后IL-6、IL-8含量均低于对照组（P<0.05）。治疗后两组CD4+T淋巴细胞比例均高于治疗前（P<0.05），研究组治疗后CD4+T淋巴细胞比例高于对照组（P<0.05），治疗前后两组CD3+T淋巴细胞比例在组内与组间比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：嗜酸乳杆菌在坏死性小肠结肠炎患儿的应用中能改善免疫功能，有利于维持肠道菌群平衡，从而抑制炎症因子的表达，提高治疗效果。

【关键词】 嗜酸乳杆菌 坏死性小肠结肠炎 免疫功能 肠道菌群 美沙拉嗪 炎症因子

Effects of Lactobacillus Acidophilus on Immune Function and Intestinal Flora in Children with Necrotizing Enterocolitis/CHEN Qiangfeng， YANG Junxiu， LI Ziwu. //Medical Innovation of China， 2021， 18（33）： -122

[Abstract] Objective： To investigate the effects of Lactobacillus acidophilus on the immune function and intestinal flora of children with necrotizing enterocolitis. Method： A total of 72 cases with necrotizing enterocolitis who were diagnosed and treated in our hospital from January 2015 to October 2020 were selected as the research objects. All the children were divided into the study group and the control group with 36 children in each groups accorded to the random envelope 1∶1 lottery principle. The control group were treated with Mesalazine， and the study group were treated with Lactobacillus acidophilus on the basis of the control group. Both groups were treated for 3 months， the changes in the immune function and intestinal flora of the children were detected. Result： The total effective rates of the study group were 86.11%， which were higher than 72.22% of the control group， but the difference was not statistically significant （P>0.05）. After treatment， the contents of Bifidobacterium and Lactobacillus in the study group were higher than those in the control group （P<0.05）， and the contents of Enterobacter and Enterococcus were lower than those in the control group （P<0.05）. The levels of serum interleukin-6 （IL-6） and IL-8 after treatment in the two groups were lower than those before treatment （P<0.05）， and those in the study group were lower than those in the control group after treatment（P<0.05）. The ratio of CD4+T lymphocytes in the two groups after treatment were higher than those before treatment （P<0.05）， and that in the study group was higher than that in the control group （P<0.05）. The ratio of CD3+T lymphocytes in the two groups before and after treatment were compared within and between groups， the difference were not statistically significant （P>0.05）. Conclusion： The application of Lactobacillus acidophilus in children with necrotizing enterocolitis can improve immune function and maintain the balance of intestinal flora， thereby inhibiting the expression of inflammatory factors and improving the therapeutic effect.

[Key words] Lactobacillus acidophilus Necrotizing enterocolitis Immune function Intestinal flora Mesalazine Inflammatory factors

First-author’s address： Foshan Fosun Chancheng Hospital Co.， Ltd， Foshan 528000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.33.029

坏死性小肠结肠炎在临床上比较常见，也是较为严重的胃肠道急症之一，多发病于小儿[1-2]。随着人们饮食结构的改变和生活水平的提高，坏死性小肠结肠炎的发病人数呈上升趋势，且该病易反复发作，对患儿身心健康造成严重负面影响[3]。该病在临床上主要表现为血便、腹胀、呕吐、腹泻等症状，若未及时给予对症治疗，容易导致患儿出现呼吸衰竭、休克症状。糖皮质激素、免疫抑制剂、水杨酸等为坏死性小肠结肠炎的主要治疗药物，但是长期应用西药治疗存在不良反应，且部分患儿不耐受，不适用于坏死性小肠结肠炎的长期治疗[4-5]。研究认为，肠道是机体最重要的防御屏障，也是机体最重要的消化吸收器官，正常肠道还具有维持机体内环境稳态、防止致病性抗原侵袭等作用，肠道内的细菌包括益生菌、致病菌等[6]。肠道微生态系统与机体保持着平衡状态，若平衡关系被打破，损伤超过机体的自我修复水平，可诱发坏死性小肠结肠炎[7-8]。嗜酸乳杆菌分布于粪便、口腔、肠道等环境中，也是众多乳酸菌中极其重要的益生菌之一，具有调节机体免疫功能、增强肠道屏障、抑制致病菌黏附等作用，也可保护结肠黏膜的完整性，改善肠道组织学损伤，并降低炎症因子的表达[9]。本研究探讨嗜酸乳杆菌对坏死性小肠结肠炎患儿免疫功能与肠道菌群的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年1月-2020年10月在本院诊治的坏死性小肠结肠炎患儿72例为研究对象。纳入标准：符合坏死性小肠结肠炎的诊断标准;2个月～6岁，具有本研究使用药物指征;意识及精神状态均正常;临床资料完整。排除标准：合并恶性肿瘤者;合并严重心、脑、肝及肾等器官疾病者;患儿家长不配合本研究者。根据随机信封1︰1抽签原则将患儿分为研究组与对照组，各36例。本研究经本院伦理委员会批准，且患儿家属签署知情同意书。

1.2 方法 对照组给予美沙拉嗪治疗，口服美沙拉嗪（生产厂家：黑龙江省葵花药业有限公司，批准文号：国药准字H20067505，规格：0.25 g/片）0.25 g，2次/d，治疗3个月。研究组在对照组基础上给予嗜酸乳杆菌治疗，口服嗜酸乳杆菌（生产厂家：通化金马药业集团股份有限公司，批准文号：国药准字H10940114，规格：0.25 g/包）0.25 g，

3次/d，治疗3个月。所有患儿均给予心理辅导、对症治疗、营养支持等常规治疗。

1.3 观察指标及判定标准 （1）疗效标准，治愈：便隐血试验显示阴性，临床症状消失;显效：便隐血试验显示阴性，临床症状有所消失;无效：便隐血试验显示阳性，临床症状无好转甚至恶化。总有效=治愈+显效。（2）治疗后收集患儿的新鲜粪便，稀释后进行需氧培养2 h，然后进行42～48 h的厌氧培养，检测肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌、乳杆菌含量。（3）治疗前后抽取患儿的清晨空腹静脉血2～3 mL，离心分离血清，采用酶联免疫吸附试验法检测血清白介素-6（Interleukin-6，IL-6）、IL-8含量，检测试剂盒均购自北京索莱宝科技有限公司。（4）取上述血液样本，分离全血组织样本，采用流式细胞仪检测CD3+T与CD4+T淋巴细胞比例。

1.4 统计学处理 采用SPSS 24.00软件对所得数据进行统计分析，计量资料以（x±s）表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料对比 两组性别、年龄、病程、身高及体重对比，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性，见表1。

2.2 两组治疗效果对比 研究组总有效率为86.11%，虽高于对照组的72.22%，但差异无统计学意义（字2=2.105，P=0.147），见表2。

2.3 两组治疗前后肠道菌群情况对比 治疗前，两组肠道菌群水平对比，差异均无统计学意义（P>0.05）;治疗后，研究组的双歧杆菌、乳杆菌含量均高于对照组（P<0.05），肠杆菌、肠球菌含量均低于对照组（P<0.05）。见表3。

2.4 两组治疗前后血清炎症因子变化对比 治疗前，两组血清IL-6、IL-8含量比较，差异均无统计学意义（P>0.05）;治疗后，两组血清IL-6、IL-8含量均低于治疗前（P<0.05），且研究组治疗后血清IL-6、IL-8含量均低于对照组（P<0.05）。见表4。

2.5 两组治疗前后CD3+T、CD4+T淋巴细胞比例变化对比 治疗前，两组CD3+T、CD4+T淋巴细胞比例比较，差异均无统计学意义（P>0.05）;治疗后，两组CD4+T淋巴细胞比例均高于治疗前（P<0.05），研究组治疗后CD4+T淋巴细胞比例高于对照组（P<0.05），两组治疗前后CD3+T淋巴细胞比例在组内与组间对比，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表5。

3 讨论

坏死性小肠结肠炎是一种常见于小儿的消化系统疾病，该疾病具有诱发病因不确切、病情发展迅速等特点[10]。早期在临床上主要表现为腹胀、呕吐、便血等，随着病情的进展，可严重影响患儿正常生理功能，部分患儿还会伴发肠穿孔、不完全肠梗阻、排便异常等并发症，严重情况下可导致患儿死亡[11]。目前临床上多采用氨基水杨酸类治疗坏死性小肠结肠炎，能够有效缓解患儿的临床症状，但长时间用药会增加患儿的依赖性，且不良反应较多，停药后患儿容易复发。IL-6、IL-8作为多功能的关键细胞因子，能刺激B细胞分化，诱导免疫球蛋白分泌，随着患儿的病情加重而逐渐增加[12]。本研究结果显示，研究组总有效率为86.11%，虽高于对照组的72.22%，但差异无统计学意义（P>0.05），可能与本研究选择病例数较少有关;两组治疗后血清IL-6、IL-8含量均低于治疗前（P<0.05），且研究組治疗后血清IL-6、IL-8含量均低于对照组（P<0.05），表明嗜酸乳杆菌在坏死性小肠结肠炎患儿的应用中能抑制炎症因子的表达，提高治疗效果。嗜酸乳杆菌为一种微生态制剂，能够抑制病菌的繁殖，增加肠道通透性，从而加速损伤上皮的修复，有效清除体内毒素，促进肠道内细菌平衡状态的恢复[13]。且嗜酸乳杆菌可增强机体清除氧自由基能力，抑制花生四烯酸的代谢途径，从而减少炎性介质的合成[14]。

由于小儿胃液和胰液分泌能力相对较低，胃肠道功能尚未完全发育成熟，更容易使细菌在肠道内生长和发育，并出现细菌移位形成炎症，最终诱发坏死性小肠结肠炎[15]。婴幼儿的坏死性小肠结肠炎发病率较高，黏膜受损、肠道喂养以及肠道内细菌等均是诱发坏死性小肠结肠炎的重要因素[16]。美沙拉嗪在处于pH≥6的环境中聚甲基丙酸或乙基纤维素外层才会溶解，有利于在小肠末端及结肠处释放从而发挥抗炎作用，促进肠道菌群平衡。本研究结果显示，治疗后研究组双歧杆菌、乳杆菌含量均高于对照组（P<0.05），肠杆菌、肠球菌含量均低于对照组（P<0.05）。分析原因为，嗜酸乳杆菌可通过直接补充正常生理菌丛抑制致病菌，促进营养物质的消化、吸收，改善肠道微生态环境，阻止致病菌的定植和入侵，抑制肠源性毒素的产生和吸收，进而保持肠道正常状态，使其内部的细菌趋于平衡[17]。

嗜酸乳杆菌等肠道内优势菌群，与人体营养吸收、生物拮抗及免疫等生理功能密切相关。嗜酸乳杆菌可激活过氧化物酶体增殖物激活受体-γ，从而发挥抗炎作用，还可通过改善肠道微生态平衡加速损伤上皮修复[18]。本研究结果显示，两组治疗后CD4+T淋巴细胞比例均高于治疗前（P<0.05），研究组治疗后CD4+T淋巴细胞比例高于对照组（P<0.05），两组治疗前后CD3+T淋巴细胞比例在组内与组间对比，差异均无统计学意义（P>0.05），表明嗜酸乳杆菌在坏死性小肠结肠炎患儿的应用中能改善免疫功能。

综上所述，嗜酸乳杆菌在坏死性小肠结肠炎患儿的应用中能改善免疫功能，有利于维持肠道菌群平衡，从而抑制炎症因子的表达，提高治疗效果。本研究也存在一定的不足，如未进行长时间的随访分析，将在后续研究中进行探讨。

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（收稿日期：2021-04-02） （本文编辑：占汇娟）