斑蝥酸钠维生素B6注射液联合SOX方案对晚期胃癌患者miR-18a、miR-34a及免疫细胞计数的影响

甘云辉,李应军,李凤霞,温华生,王连涛,张建兴

胃癌是死亡率极高的肿瘤之一，中国胃癌发病人数和死亡人数约占全球总数的一半，随着医学的进步，胃癌的发病率虽呈下降趋势，但仍居肿瘤发病率的第5位和死亡率的第3位[1-2]。针对晚期胃癌患者，主要治疗方案为姑息性化疗，SOX方案是较为常用的化疗方案，由替吉奥与奥沙利铂组成，在控制肿瘤进展、改善患者生存质量方面具有良好效果[3]。但化疗不良反应多，且能引起免疫抑制，均不利于治疗进行及预后改善。相关研究指出，斑蝥酸钠维生素B6注射液具有良好抗肿瘤活性，且能改善患者免疫功能，不良反应小，目前已在多种恶性肿瘤治疗中得到应用，并取得良好的辅助治疗效果[4-5]。但其在晚期胃癌治疗方面的研究较少，且有报道指出微小RNA-18a(microRNA-18a, miR-18a)、miR-34a与胃癌的增殖、转移等恶性生物学行为密切相关，可作为胃癌治疗的靶指标[6-7]。基于此，本研究尝试探究斑蝥酸钠维生素B6注射液联合SOX方案对晚期胃癌患者miR-18a、miR-34a及免疫细胞计数的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

经我院伦理委员会审批通过，选取2019年1月至2020年8月我院68例晚期胃癌患者作为研究对象，开展前瞻性研究，依据治疗方案不同分为观察组和对照组，各34例。

观察组：①男22例，女12例；②年龄51～78岁，平均(62.34±5.66)岁；③病理类型[8]：1例印戒细胞癌，3例黏液癌，30例腺癌；④体质量指数(body mass index，BMI)18.3～26.34 kg/m2，平均(21.72±1.70)kg/m2；⑤临床分期[9]：20例Ⅲ期，14例Ⅳ期；⑥合并症：7例高血压，5例高脂血症，3例冠心病，4例糖尿病。

对照组：①男26例，女8例；②年龄49～75岁，平均(60.86±5.92)岁；③病理类型：2例印戒细胞癌，1例黏液癌，31例腺癌；④BMI：19.1～26.8 kg/m2，平均(22.18±1.53)kg/m2；⑤临床分期：23例Ⅲ期，11例Ⅳ期；⑥合并症：5例高血压，8例高脂血症，5例冠心病，1例糖尿病。

对比两组性别、年龄、病理类型、BMI、临床分期、合并症，均无显著差异(P>0.05)。

1.2 选例标准

纳入标准：①符合胃癌诊断标准[8]；②临床分期Ⅲ～Ⅳ期；③卡氏功能状态评分(Karnofsky Performance Status，KPS)[10]>60分；④对本研究药物无禁忌；⑤预估生存期>6个月；⑥至少有1个可测量病灶；⑦患者及家属知晓本研究，已签署同意书。

排除标准：①合并其他原发恶性肿瘤者；②肿瘤发生远处转移者；③伴有其他严重消化系统疾病者；④精神疾病或心理疾病患者；⑤血液系统疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病患者；⑥严重心脑血管疾病患者；⑦肺肝肾功能严重障碍者。

1.3 方法

对照组患者予以SOX方案治疗，具体治疗方法：第1～3天，130 mg/m2奥沙利铂(山东新时代药业有限公司，国药准字H20173095)与250 mL生理盐水充分混合后静脉滴注；第1～14天，口服替吉奥(福州海王福药制药有限公司，国药准字H20140020)，50 mg/次，早晚各1次，2次/d，第15～21天休息。每个化疗周期21 d，持续治疗2个化疗周期。

观察组患者予以斑蝥酸钠维生素B6注射液(贵州柏强制药有限公司，国药准字H20053863)联合SOX方案，SOX方案治疗方法同对照组，化疗第1～14天，静脉滴注40 mL斑蝥酸钠维生素B6注射液+250 mL生理盐水。持续治疗2个化疗周期。

1.4 观察指标

1.4.1 临床疗效 治疗结束后评估，患者临床疗效。完全缓解：肿瘤病灶全部消失，持续时间≥4周；部分缓解：肿瘤病灶最大直径之和减少≥30%，持续时间>4周；疾病进展：治疗病灶最大直径之和增加≥20%；稳定：介于部分缓解和进展之间[11]。疾病控制率=(完全缓解+部分缓解+稳定)/n×100%。

1.4.2 治疗期间毒副反应发生情况 包括白细胞减少、血红蛋白减少、恶心、呕吐、腹泻、肝功能异常，参照《WHO抗癌药物急性及亚急性毒性反应分级标准》[12]对不良反应进行分级，分为0～Ⅳ。

1.4.3 血清miR-18a、miR-34a、肿瘤标志物[癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、血管内皮生长因子-C(vascular epithelial growth factor-C，VEGF-C)、糖类抗原-199(carbohydrate antigen-199，CA-199)]、免疫细胞计数(血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)水平 治疗前后分别采集患者空腹静脉血5 mL，离心处理(半径10 cm，转速3 000 r/min，时间10 min)后取血清，置于-80 ℃冷藏室保存，由专业人员统一检测，采用实时荧光免疫PCR检测血清miR-18a、miR-34a水平，RNA提取试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司，逆转录试剂盒购自美国Promega公司，PCR试剂盒购自德国Qiagen公司；采用蛋白芯片-化学发光法检测血清CEA、CA-199水平，试剂盒购自上海裕隆生物科技有限公司；采用酶联免疫吸附法测定血清VEGF-C水平，试剂盒购自天津博奥赛斯生物科技有限公司；采用艾森生物(杭州)有限公司生产的NovoCyte D2061R型流式细胞仪及其配套试剂盒测定血清CD4+、CD8+水平，系统自动显示血清CD4+/CD8+水平。

1.4.4 生存质量评估 根据治疗前后KPS评分变化情况评估，评估标准：提高,KPS评分较治疗前增加≥10分；稳定,KPS评分较治疗前增加或降低<10分；下降,KPS评分较治疗前降低≥10分；改善有效率=(提高+稳定)/n×100%[13]。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 临床疗效比较

观察组疾病控制率为82.35%，高于对照组的55.88%，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组临床疗效对比 [n(%)]

2.2 毒副反应发生率比较

观察组白细胞减少，血红蛋白减少，恶心、呕吐，腹泻，肝功能异常发生率均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 两组毒副反应发生率对比 [n(%)]

2.3 miR-18a、miR-34a水平比较

治疗后，两组血清miR-18a、miR-34a水平均较治疗前明显改善，且观察组血清miR-18a水平下降幅度、血清miR-34a水平升高幅度均大于对照组，差异有统计学意义(P<0.05),见表3。

表3 两组血清miR-18a、miR-34a对比

2.4 肿瘤标志物水平比较

治疗后，两组血清CEA、VEGF-C、CA-199水平均较治疗前明显下降，且观察组下降幅度大于对照组，差异有统计学意义(P<0.05),见表4。

表4 两组血清肿瘤标志物对比

2.5 免疫细胞计数水平比较

治疗后，对照组血清CD4+、CD4+/CD8+水平均较治疗前明显下降，血清CD8+水平较治疗前明显升高(P<0.05)，观察组血清CD4+、CD4+/CD8+、CD8+水平与治疗前比较无明显差异(P>0.05)；且观察组治疗后血清CD4+、CD4+/CD8+水平较对照组高，血清CD8+水平较对照组低，差异有统计学意义(P<0.05),见表5。

表5 两组免疫细胞计数对比

2.6 生存质量改善情况

观察组生存质量改善有效率为70.59%，高于对照组的44.12%，差异有统计学意义(P<0.05),见表6。

表6 两组生存质量改善情况对比 [n(%)]

3 讨论

目前，根治胃癌最主要的方式仍然是外科切除术，但胃癌具有发病隐匿、生物学行为活跃的特点，约50%的患者就诊时已经处于晚期，无法行根治治疗[14-15]。

SOX方案由替吉奥与奥沙利铂组成，在晚期胃癌一线治疗中占据重要地位，其中替吉奥是一种氟尿嘧啶衍生物口服抗癌剂，口服后能在体内转化成5-氟尿嘧啶，5-氟尿嘧啶具有抑制肿瘤细胞DNA合成的作用，可发挥持续定点杀伤肿瘤细胞的效果；奥沙利铂属于铂类抗癌药，在破坏肿瘤细胞DNA方面具有良好效果，从而发挥抗肿瘤作用[16-17]。由本研究结果可知，SOX方案治疗晚期胃癌的疗效良好，与国内外相关研究[18-19]结果一致，但仍有部分患者病情未得到有效控制，且SOX方案不良反应较多，多数患者常难以耐受，不利于化疗的顺利开展，从而影响疗效及预后改善。

本研究在SOX方案治疗基础上联合应用斑蝥酸钠维生素B6注射液，持续治疗2个化疗周期后发现疾病控制率得到明显改善，且白细胞减少、血红蛋白减少、恶心、呕吐、腹泻、肝功能异常发生率均得到明显降低。提示斑蝥酸钠维生素B6注射液不仅能改善晚期胃癌治疗效果，同时能减少不良反应。斑蝥酸钠维生素B6注射液是一种复方制剂，组分为斑蝥酸钠和维生素B6，其中斑蝥酸钠是斑蝥素的衍生物，能直接抑制肿瘤细胞蛋白质及核酸的合成，影响肿瘤细胞的RNA和DNA合成，最终抑制癌细胞的生成和分裂，诱导细胞凋亡[20]。笔者认为，斑蝥酸钠与替吉奥、奥沙利铂可作用于肿瘤细胞生长代谢的不同环节，在抗癌、抑癌方面可发挥协同作用，因此斑蝥酸钠维生素B6注射液联合SOX方案能显著增强晚期胃癌治疗效果。此外，斑蝥酸钠刺激骨髓的造血功能，缩短白细胞的成熟和释放，具有增加白细胞的作用，从而减轻化疗对骨髓造血系统的毒性，改善化疗引起的各种临床症状[21]。且维生素B6可加速谷氨酸的脱羧过程，从而促进γ-氨基丁酸生成，γ-氨基丁酸增加能抑制中枢神经系统兴奋性，最终达到减轻消化道反应的效果[22]。因此联合应用斑蝥酸钠维生素B6注射液能有效减少化疗不良反应的发生。

本研究还发现，晚期胃癌患者采用SOX方案化疗后血清CD4+、CD4+/CD8+水平明显降低，血清CD8+水平明显升高，其原因在于化疗药物在杀伤肿瘤细胞的同时，会对机体免疫系统造成一定损害，而联合应用斑蝥酸钠维生素B6注射液则能有效抑制血清CD4+、CD4+/CD8+水平降低及血清CD8+水平升高，这与斑蝥酸钠的免疫调节作用密切相关，斑蝥酸钠可能通过调节白细胞介素-2的生成进而作用于免疫细胞，增强机体免疫功能间接杀死癌细胞[23]。提示斑蝥酸钠维生素B6注射液有助于改善晚期胃癌患者免疫功能，增强机体自身免疫对肿瘤细胞的杀伤作用，从而进一步下调血清肿瘤标志物CEA、VEGF-C、CA-199水平，改善抗肿瘤效果，有效提高患者生存质量。

近年来，微小RNA在恶性肿瘤诊断、治疗及预后评估方面的作用越来越受临床重视，相关研究指出，胃癌患者血清中miR-34a呈低表达，其表达水平与肿瘤分期、淋巴结转移、术后复发转移有关，是患者预后不良的独立危险因素[24]。miR-18a在胃癌患者血清中则呈高表达，参与胃癌的发生发展，其水平变化可作为肿瘤进展的观测指标，对胃癌的筛查、诊断、预后评估具有一定参考价值[25]。本研究发现斑蝥酸钠维生素B6注射液联合SOX方案能明显下调患者血清miR-18a水平，上调血清miR-34a水平，这与斑蝥酸钠维生素B6注射液能有效增强抗肿瘤效果密切相关，进一步证实其在晚期胃癌治疗方面具有重要作用。

综上所述，斑蝥酸钠维生素B6注射液联合SOX方案是治疗晚期胃癌的安全、可靠方法，具有较高的推广应用价值。但本研究存在样本量较少的不足，研究结果可能存在一定偏倚，仍需通过大样本研究进一步验证。