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蒙药材香青兰规范化种植技术研究

2021-03-07邢界红赵爱国鲍福贵刘庆玲

北方药学 2021年8期
关键词:药材图谱指纹

邢界红,赵爱国,鲍福贵,刘庆玲

(内蒙古蒙药股份有限公司,内蒙古 通辽 028007)

香青兰,蒙古语名为“昂凯鲁莫勒·毕日阳古”,维吾尔语名为“Badranjibuya qini”,也叫“Badranjibuya (巴德然吉布牙)”;“Huxbuymerzenjux(霍西布依买尔赞主西)”,为唇形科植物Dracocephalum moldavical L.的干燥地上部分。系蒙古族和维吾尔族习用药材。

香青兰广泛用于复方成药中,如蒙药调元大补二十五味汤散、清肝七味散、牛黄十三味丸、哈敦海鲁木勒九味丸、利肝和胃丸、寒水石二十一味散等,同时也是蒙医院制剂常用药材。其蒙药功效为“泻肝火,清胃热,止血,愈伤,燥‘协日乌素’。用于肝、胃热,食物中毒,胃出血,游痛症,‘巴木’病”。

香青兰的药源提供完全靠野生资源,生药来源的无序与混杂,难以保障中药材质量的稳定性与有效性。随着香青兰的化学成分和药理活性研究的深入,香青兰药用潜力大大提升,对国民健康建设、老年病的预防与治疗、中药现代化的发展有着重要作用。香青兰使用量的不断增长,导致野生香青兰资源逐渐枯竭,另外长期的采挖也对环境造成了破坏,香青兰的人工抚育栽培迫在眉睫。

本研究是研究香青兰的规范化种植技术。

1 实施方法

本研究参考成功的引种驯化、野生变家种的药用植物例子,经查阅大量文献,结合本地的实际情况和资源,对通辽市库伦旗三家子镇境内生长的道地野生香青兰进行了引种驯化工作。

1.1 人工栽培技术研究

香青兰人工栽培采用有性繁殖,即种子繁殖方法。

1.1.1种子处理

筛选:先用筛子筛除草籽草棍等杂质,再用簸箕簸除不成熟的种子。

晒种:将筛选好的种子摊在塑料布上,在日光下晒1~2天。

浸种:将日晒后的种子浸入40℃清水中,浸10小时后将种子捞出沥水。如浸种量大,可将捞出的种子倒入布袋中,将袋嘴扎紧,在滚筒洗衣机内将水甩干,再将种子倒在尼龙网上,在日光下晾晒至表皮干爽时即可播种。浸种对香青兰种子发芽和出苗时间都有明显影响。春播时,我们在2块小区内分别进行浸种与未浸种的种植试验,结果见表1。

表1 浸种对香青兰出苗的影响

由表1可以看出,浸种对香青兰出苗率影响不是很明显,但对出苗时间影响较大。所以,播前浸种是有必要的。

1.1.2整地

选择土层深厚、排水良好的沙质壤土地块,将土地翻耕耙细。有机质含量过低的沙土地亩可施入2000~3000公斤农家肥,用悬耕机将粪肥拌入沙土中。

1.1.3播种

按行距45~60cm开沟,用手撒或用点葫芦将种子均匀播入沟内。复土不能超过1cm,用石磙轻轻镇压,随后浇水。播种量亩0.5~1kg。

气温和复土厚度是影响香青兰出苗时间的两个重要因素。我们于6月28日播种,复土不超过0.5cm,到7月13日已陆续出苗,历时15天。到7月19日已基本出全苗,历时约21天。出苗较快的原因,一是当时的气温较高,日平均气温在21~26℃左右;二是复土不超过0.5cm,且大风季节已过,未形成风淤沙掩苗的情况。

1.1.4田间管理

香青兰在春播和出苗时各浇一次水,此后视降雨情况适当浇水即可。但在追施氮肥、现蕾、盛花期、入冬前和初春苗返青时要适当浇水。

定苗:苗高5cm左右时定苗,株距25cm。缺苗处要及时补苗、浇水。

追肥:苗高20cm左右时追施一次氮肥,亩施肥量10~15kg。2020年我们选择2块人工栽培田和1块自然落籽并半野生管理的香青兰地块进行试验,结果表明,追肥对香青兰产量有较明显的影响。见表2。

表2 追施氮肥对香青兰产量的影响

采收:当种子大部分成熟时即可收割,及时采收种子并将药材晾干。

1.2 病虫害防治

尚未发现香青兰有明显的病虫害。如地块积水,易造成香青兰烂根死亡。春季浇返青水要等到地化通之后再浇。

2 结果

2.1 香青兰野生与栽培植株指纹图谱对比

采用反相高效液相色谱法,梯度洗脱,对采自内蒙古、吉林、黑龙江的5批野生香青兰药材与本企业人工栽培香青兰药材进行了指纹图谱对比分析,结果本企业人工栽培香青兰药材指指纹图谱与5批野生香青兰药材建立的标准指纹图谱进行相似度比较,相似度在90%以上,符合指纹图谱要求,说明本企业人工栽培香青兰药材与野生香青兰药材黄酮类成分上无显著差异。

2.1.1仪器、试剂和样品

岛津 LC-10AT高效液相色谱仪,组件:LC-10ATvp双泵,带梯度混合器,检测器:SPD-10Avp,柱温箱:CTO-2A,自动进样器:SIL-HTA。水为高纯水,乙腈为色谱纯,盐酸、甲醇为分析纯。试验用药材:5批野生香青兰药材和1批本企业人工栽培香青兰药材(见表3),将6批香青兰分别取阴干的地上部分,粉碎,过2号筛,备用。

表3 香青兰药材样品的来源

2.1.2实验方法与结果

2.1.2.1色谱条件

色谱柱:Diamonsil(钻石)C18(250×4.6mm,5μm);流动相:A为水,B为90%乙腈,进行梯度洗脱;流速为每分钟1.0mL;检测波长:360nm;柱温:30℃;记录时间:70分钟。理论板数按指纹图谱中44.2min峰计算,应不低于200000。

2.1.2.2供试品溶液的制备

取本品,粉碎,取约1.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入2.5mol/L盐酸甲醇溶液25mL,密塞,称定重量,加热回流30min,放冷,再称定重量,用2.5mol/L盐酸甲醇溶液补足减失的重量,摇匀,0.45μm滤膜过滤,即得。

2.1.2.3测定方法

精密吸取供试品溶液10μL,注入液相色谱仪,测定,即得。供试品色谱指纹图谱与标准对照色谱指纹图谱比较,并经计算机模拟相似度计算软件计算,相似度应为0.90~1.00之间。

2.1.2.45批野生香青兰药材和本企业1批人工栽培香青兰药材指纹图谱的测定、相似度比较

分别取表1所列5批野生香青兰药材和本企业1批人工栽培香青兰药材,按2.2项下方法制备供试品溶液,进行色谱指纹图谱的测定,以序号为1野生香青兰药材图谱作为参照模板,以9.2、13.3、15.9、17.4、18.7、22.1、24.9、29.2、30.9、31.8、34.2、44.2min左右的峰作为多点校正峰,时间窗0.50,中位数法,自动匹配后,生成标准对照色谱指纹图谱(见附图),并计算相似度,从表4可见,5批野生香青兰药材色谱指纹图谱与本企业1批人工栽培香青兰药材的指纹图谱相似度均在0.90~1.00之间,符合指纹图谱要求。

图1 5批野生香青兰药材(S1~S5)、人工栽培香青兰药材(S6)和对照(R)指纹图谱

表4 野生香青兰与栽培香青兰指纹图谱相似度表

2.2 人工栽培香青兰与原产地野生香青兰性状对比

我公司在奈曼旗治安镇腰营子村栽培的香青兰与原产地库伦旗野生香青兰在植物形态形状上无根本差异,但在植株高度、茎直径、叶长、叶宽、种子千粒重等方面存在差别。见表5。

表5 人工栽培、人工栽培田自然落籽半野生管理与原产地野生品种性状对比 单位:mm

从表5可以看出,人工栽培香青兰在株高、茎基直径、叶长、叶宽、种子千粒重等方面均优于野生香青兰。人工栽培田自然落籽并在半野生状态下生产的香青兰的几个性状均低于原产地野生香青兰,更低于人工栽培的香青兰。

3 结论

本研究将采集的野生香青兰种子进行人工栽培试验,经过1个生产周期的研究,已成功收获香青兰干品药材。经公司化验室对基地收割的香青兰干品药材质量检测证实,药材符合质量标准要求,香青兰野生变家种试验是成功的。

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