番荔枝果皮中的3个生物碱类成分

2021-03-05高艳云袁安琪陈亚运

现代盐化工 2021年5期

高艳云，袁安琪，陈亚运

（1.江苏省中医院，江苏南京 210029；2.泰州职业技术学院，江苏泰州 225300）

著名热带水果番荔枝（Annona squamosaLinn.）为番荔枝科番荔枝属植物，又名洋波罗、释迦果，原产于拉丁美洲，现在全球热带地区均有分布，我国南方的台湾、海南等地也有分布。前期研究发现，番荔枝果实外壳具有明显的抗肿瘤活性[1-2]，且活性成分集中在小极性部位[3-5]。基于此，本实验对番荔枝果皮小极性成分继续进行研究。

1 仪器和耗材

电热套（Z N H W-10 0 0，南京文科仪器科技有限公司），旋转蒸发仪（RE-52A，上海亚荣生化仪器厂），快速中压制备系统[EZ Purifer，利穗科技（苏州）有限公司]，三用紫外分析仪（ZF-1，上海安亭科学仪器厂），核磁共振仪（AⅤ-400 MHz，Bruker公司），分析天平（BP211D，赛多利斯公司）。

色谱分离硅胶（100～200目，200～300目，400目，青岛海洋化工有限公司），硅胶板（G，青岛裕宝精细化工有限公司）。石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇（分析纯，广东光华科技股份有限公司）。

番荔枝果实于2016年10月购自云南省临沧市秀川生物科技有限公司，经鉴定为番荔枝科番荔枝属植物番荔枝的成熟果实。果皮经人工剥离风干后备用（留样编号No.20161025zh）。

2 提取与分离

将番荔枝果皮（8 kg）粉碎后转移至渗漉筒中，采用95%乙醇（80 L）于室温下渗漉提取3次。提取液经合并后于旋转蒸发器中浓缩为稀醇溶液，以400 g硅胶（100～200目）拌样并干燥，2 kg硅胶（200～300目）湿法装柱。上样后，以石油醚∶乙酸乙酯（1∶0，50∶1，25∶1，10∶1，5∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶5，0∶1）、乙酸乙酯∶甲醇（100∶1，50∶1，10∶1，0∶1）梯度洗脱，每1 000 mL作为一个流分，薄层分析展板检测合并相同流分，得到15个部位段。其中，F10段采用硅胶柱色谱分离，乙酸乙酯∶甲醇（100∶1～10∶1）梯度洗脱，薄层分析展板检测合并相同流分，共分为5个段，其中，F10-2经硅胶柱分离，二氯甲烷∶甲醇=2∶1等度洗脱，得化合物1（12.80 mg），F10-4经硅胶柱分离（400目硅胶），二氯甲烷∶甲醇（2∶1～1∶2）梯度洗脱，得化合物2（10.53 mg）和3（5.17 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：黄色粉末，易溶于甲醇，微溶于二氯甲烷。1H NMR（400 MHz，DMSO-D6）数据归属如下：6.47（2H，s，OCH2O），7.49（1H，s，H-3），7.62（1H，t，J=8.0 Hz，H-9），7.84（1H，m，H-10），7.98（1H，d，J=4.0 Hz，H-4），8.32（1H，d，J=8.0 Hz，H-8），8.54（1H，d，J=8.3 Hz，H-11），8.78（1H，d，J=4.0 Hz，H-5）。13C NMR（101 MHz，DMSO-D6）谱中存在多个重合碳，数据归属如下：103.34（OCH2O），103.34（C-3），106.17（C-11b），122.65（C-11c），124.62（C-4），127.02（C-11），127.84（C-8），128.56（C-9），130.80（C-7a），132.54（C-11a），134.19（C-10），135.43（C-6a），144.47（C-5），144.47（C-3a），148.57（C-1），151.72（C-2），181.08（C-7），检索文献[6]可知该化合物数据与鹅掌揪碱一致，因此，将化合物1鉴定为鹅掌揪碱。

化合物2：白色粉末，可溶于二氯甲烷。1H N M R （400 MHz，CDCl3）数据归属如下：8.71（1H，s，1-OH），7.10（1H，m，H-8），6.89（1H，m，H-9），6.70（1H，s，H-3），3.92（6H，brs，2-OCH3，10-OCH3），3.75（3H，s，11-OCH3），2.52（3H，s，NCH3）。13C NMR（101 MHz，CDCl3）谱中存在重合碳，数据归属如下：29.17（C-4），35.61（C-7），44.16（NCH3），52.85（C-5），56.03（2-OCH3），56.03（10-OCH3），62.06（11-OCH3），62.83（C-6a），110.77（C-9），111.26（C-3），119.25（C-11a），124.05（C-8），124.36（C-6b），126.53（C-11b），128.26（C-7a），130.91（C-3a），142.21（C-1），143.77（C-11），149.11 （C-10），151.81（C-2），以上数据与文献[7]中的紫堇定一致，因此，将化合物2鉴定为紫堇定。

化合物3：白色粉末，可溶于二氯甲烷。1H N M R （400 MHz，CDCl3）数据归属如下：8.72（1H，s，11-OH），6.86（1H，m，H-8），6.85（1H，m，H-9），6.72（1H，s，H-3），3.91（6H，brs，2-OCH3，10-OCH3），3.70（3H，s，1-OCH3），3.05（3H，s，NCH3）。13C NMR（101 MHz，CDCl3）数据归属如下：26.21（C-4），33.23（C-7），42.31（NCH3），52.42（C-5），56.03（2-OCH3），56.15（10-OCH3），62.34 （1-OCH3），62.98（C-6a），111.02（C-9），111.49（C-3），119.34（C-11a），119.69（C-8），122.04（C-6b），126.16（C-11b），126.47（C-3a），127.06（C-7a），143.09（C-1），144.15（C-11），150.18（C-10），153.00（C-2），以上数据与文献[8]中的异紫堇定一致，因此，将该化合物3鉴定为异紫堇定。