血清NGAL水平预测急性缺血性脑卒中的临床价值*

马利明,刘运双△，唐宇凤，罗立梅，张 彬，石 睿，吴泳桦

四川省绵阳市中心医院:1.检验科;2.神经内科,四川绵阳 621000

脑卒中是全球范围内致死和残疾的第二大原因[1]。急性缺血性脑卒中占我国脑卒中的69.6%～70.8%[2]。目前，指南建议从急诊就诊到开始溶栓应争取在1 h内完成[3]。急性缺血性脑卒中的病理学机制主要表现为动脉狭窄性闭塞和动脉栓塞，两者都主要与动脉粥样硬化的形成和发展密切相关。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是心血管疾病的一个危险因素[4]。NGAL在人类动脉粥样硬化组织中的表达与有症状的颈动脉粥样硬化相关[5]。血液中NGAL可以作为颈动脉粥样硬化患者斑块易损性的生物标志物[6]。本文主要探讨血清NGAL水平对急性缺血性脑卒中的预测价值,现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 从2019年1—12月本院收治的急性缺血性脑卒中患者中选取222例作为观察组，其中男性148例，女性74例。纳入标准：急性缺血性脑卒中符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》[3]的诊断标准。排除标准：急性肾损伤、慢性肾病和恶性肿瘤。根据改善全球肾脏病预后组织(KDIGO)的定义排除急性肾损伤。使用KDIGO推荐的成人基于胱抑素C(CysC)的公式计算出估算肾小球滤过率(eGFR)，使用KDIGO的标准[eGFR>60 mL/(min·1.73 m2)]排除慢性肾病。在同期来本院进行健康体检者中选取156例心脏、肺、肝脏、肾脏等器官影像学、血液及尿液检查结果正常者作为健康对照组，其中男性90例，女性66例。两组性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2仪器与试剂 仪器：罗氏 C8000生化分析仪。试剂：德国罗氏公司超敏C反应蛋白(hsCRP)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、同型半胱氨酸(Hcy)、肌酐(Cr)和CysC检测试剂、校准物和Hcy质控物。四川迈克生物科技有限公司NGAL检测试剂、校准物和质控物。美国伯乐公司液体多项常规化学质控物和液体多项免疫质控物。

1.3方法 使用美国BD公司生产的含有分离胶和促凝剂的真空采血管(SSTTM Ⅱ Advance)采集血液，按照要求分离血清用于检测。免疫透射比浊法检测NGAL、hsCRP和CysC水平，酶法检测TC、TG和Cr水平，循环酶法检测Hcy水平，直接法检测HDL-C和LDL-C水平。

1.4统计学处理 使用SPSS19.0和MedCalc12.7软件进行统计学分析。采用Kolmogorov-Smirnov法进行正态性检验，非正态分布计量资料以M(P25,P75)表示,非双变量正态分布的比较采用非参数独立样本Mann-Whitney检验。计数资料以率表示，率的比较使用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。非双变量正态分布相关性采用Spearman相关分析。采用二元Logistic回归进行因素分析。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)的曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值、阳性似然比和阴性似然比表示诊断效能，以最佳约登指数获取最佳临界值。

2 结 果

2.1观察组和健康对照组血清相关指标比较 观察组患者血清NGAL、hsCRP、TC、LDL-C和Hcy水平高于健康对照组，HDL-C水平低于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；TG水平在观察组与健康对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 观察组和健康对照组血清相关指标比较

2.2相关性分析 急性缺血性脑卒中患者血清 NGAL水平与hsCRP、TC、LDL-C、Hcy水平呈正相关(r=0.356，P<0.001；r=0.169，P=0.012；r=0.239，P<0.001；r=0.220,P<0.001)，与TG和HDL-C水平无相关性(r=-0.120,P=0.074；r=-0.086，P=0.199)。

2.3因素分析 二元Logistic回归分析结果显示，NGAL、hsCRP、 TC、TG、 LDL-C、和 Hcy是影响急性缺血性脑卒中发生的风险因素(P<0.05)。性别、年龄和HDL-C与急性缺血性脑卒中的关系不明显。见表2。

表2 急性缺血性脑卒中患者的二元Logistic回归分析结果

2.4ROC曲线分析结果 以141.0 mg/L为最佳临界值，血清NGAL预测急性缺血性脑卒中的灵敏度和特异度分别为63.1%和85.9%，AUC为0.81。对预测急性缺血性脑卒中，血清NGAL的诊断效能与hsCRP相似，但优于TC、LDL-C和Hcy。见表3。

表3 ROC曲线分析结果

3 讨 论

动物实验结果表明，短暂性大脑中动脉闭塞后，急性诱导NGAL，血清中NGAL最早在1 h出现，23 h达到峰值，48～72 h降低[7]。临床试验结果显示，急性缺血性脑卒中患者血液NGAL水平在发病后24～72 h升高[8]。本研究结果表明，由于在入院时即采集血液测定NGAL水平，发生急性缺血性脑卒中后，患者血清NGAL水平明显升高。

体外试验发现，在人类巨噬细胞、内皮细胞和平滑肌细胞内，NGAL上调白细胞介素6、白细胞介素8和单核细胞趋化蛋白-1的释放。作为人类动脉粥样硬化组织中炎症环境的一个直接启动因子，NGAL参与了动脉粥样硬化的形成[5]。此外，NGAL与动脉硬化斑块的易损性相关。对颈动脉硬化患者动脉粥样硬化组织中NGAL水平的研究发现，巨噬细胞、内皮细胞和平滑肌细胞内均检测到NGAL，有症状的颈动脉粥样硬化组织中NGAL的mRNA表达高于无症状者[5]。依据美国心脏协会的组织学分类为动脉粥样硬化Ⅵ型和超声结果为低回声斑块的患者，NGAL的水平更高；与无症状或狭窄度<90%的患者比较，有症状或狭窄度≥90%的患者NGAL水平更高[6]。在人类颈动脉粥样硬化组织中，NGAL的表达与动脉粥样硬化斑块不稳定表型相关[5-6]。

血液中的NGAL可以作为颈动脉狭窄患者动脉粥样硬化斑块易损性的一个生物标志物[6,9]。颈动脉斑块的易损性是很重要的预测脑血管事件的标志物，如果无症状患者血液中NGAL水平超过临界值，结合无回声斑块和高度狭窄，可以进行早期手术[9]。以往的研究[7-8]和本文均证实，发生急性缺血性脑卒中后，血液中NGAL水平升高。此外，本文使用ROC曲线对血清NGAL预测急性缺血性脑卒中的诊断效能进行评价，结果表明，血清NGAL具有较好的预测急性缺血性脑卒中的效能，与hsCRP相似，优于TC、LDL-C和Hcy。

hsCRP与急性缺血性脑卒中独立相关[10]，能够用于急性缺血性脑卒中的早期诊断，可以预测动脉狭窄和阻塞、死亡风险和急性缺血性脑卒中病原学亚型[11]。TC和 LDL-C与急性缺血性脑卒中有直接的相关性[12-13]。HDL-C与急性缺血性脑卒中的关系是有争议的，有研究显示，HDL-C与急性缺血性脑卒中呈负相关[12,14]，另有研究认为，HDL-C与脑血管疾病的相关性是HDL-C亚组分的功能，HDL2-C与斑块的厚度直接相关，HDL3-C与斑块的面积呈负相关[15]。小和中等大小HDL颗粒与降低的急性缺血性脑卒中风险相关，而HDL2-C与急性缺血性脑卒中无相关性[16]。有研究结果显示，TG与急性缺血性脑卒中具有相关性[13]，也有研究结果认为TG与急性缺血性脑卒中无相关性[14]。这主要归因于标本是否在空腹状态下采集[12]。Hcy水平升高是公认的人类血管疾病和急性缺血性脑卒中的危险因素[17]。血液中的Hcy与急性缺血性脑卒中密切相关，高水平预测高急性缺血性脑卒中风险[18]。上述研究已经明确了血液中hsCRP、TC、LDL-C和Hcy与急性缺血性脑卒中的直接相关性。本研究结果显示，血清NGAL与hsCRP、TC、LDL-C、Hcy呈正相关，表明血清NGAL与急性缺血性脑卒中有直接的相关性。二元Logistic回归分析结果也表明，NGAL是影响急性缺血性脑卒中发生的风险因素。

由于NGAL是一个肾损伤的标志物[19]，并且与人类肿瘤的发生和发展相关[20]。因此，在选择观察对象时，排除了有急性肾损伤、慢性肾病和肿瘤的患者。此外，NGAL是一个急性时相蛋白，对各种炎症敏感。所以，在应用NGAL预测急性缺血性脑卒中时，要考虑肾脏疾病、肿瘤和炎症这些因素。

急性缺血性脑卒中患者血液中NGAL水平与发病后3个月时较差的临床后果和发病后发生感染相关，有助于预测急性缺血性脑卒中后3个月时的临床效果[21]。作为一个急性时相蛋白，NGAL在急性缺血性脑卒中后调节再灌注损伤，发生脑卒中后，NGAL水平升高可以加重脑梗死，并且通过增强炎性细胞的渗入和促进神经细胞的凋亡使得病情继续恶化[7]。NGAL在急性缺血性脑卒中的预后方面具有潜在的价值，需要进一步的研究探讨。

血清NGAL具有较好的预测急性缺血性脑卒中的性能，是预测急性缺血性脑卒中的生物标志物。