CA199、NSE、CA153、CEA联合检测在脑胶质瘤诊断及预后分析中的应用*

张 敏，牛发良，赵东霞

河北北方学院附属第一医院核医学科，河北张家口 075000

脑胶质瘤属于常见颅内恶性肿瘤之一，发病率、致死率较高，由于侵袭性较强，血供丰富，治疗后易复发，患者预后不佳[1]。目前，临床主要采用病理组织学确诊脑胶质瘤，但检测易受到操作人员及检测部位的影响，且属于有创检测，不能进行重复操作，因此，寻找准确、微创、可重复的检测方法十分必要[2]。血清肿瘤标志物在各种实体瘤筛查中广泛应用，如血清糖类抗原(CA)199、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、CA153、癌胚抗原(CEA)在肺癌、乳腺癌等肿瘤中均具有一定的诊断价值，但由于器官特异性，4项指标在肿瘤诊断中的诊断效能差异较大[3-4]，单项检测诊断效能并不高，但联合检测在肿瘤中的诊断目前仍存在一定争议。本研究通过检测脑胶质瘤患者血清中CA199、NSE、CA153、CEA水平，旨在分析联合检测在脑胶质瘤诊断及预后分析中的价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2017年8月至2019年9月在本院治疗的52例脑胶质瘤患者作为脑胶质瘤组，其中男33例，女19例；年龄18～74岁，平均(58.34±11.27)岁；平均体质量指数(BMI)为(22.36±1.27)kg/m2；吸烟者21例；饮酒者24例。依据WHO肿瘤病理分级[5]：Ⅰ～Ⅱ级(低级别脑胶质瘤组)32例，Ⅲ～Ⅳ级(高级别脑胶质瘤组)20例。纳入标准：(1)患者首次患病；(2)未接受过化疗、放疗等肿瘤相关治疗；(3)年龄不超过80岁；(4)经病理学检查证实为脑胶质瘤；(5)胶质瘤分级符合WHO中枢神经系统肿瘤分级标准[5]。排除标准：(1)临床资料不完整；(2)多发脑肿瘤；(3)存在其他部位原发性恶性肿瘤；(4)肝、肾功能不全；(5)合并精神系统疾病，无法配合检查。另选取在本院接受脑外伤颅内压手术患者60例作为对照组，其中男35例，女25例；年龄18～74岁，平均(57.61±10.45)岁；平均BMI为(22.18±1.32)kg/m2；吸烟者23例；饮酒者29例。脑胶质瘤组和对照组患者性别、年龄、BMI、吸烟比例、饮酒比例等比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医院伦理委员会批准；且所有受试者均签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1试剂与仪器 CA199检测试剂盒购自上海透景生命科技股份有限公司(货号：CA19901)。NSE检测试剂盒购自上海晶抗生物工程有限公司[货号：JK-(a)-2388]。CA153检测试剂盒购自齐一生物科技(上海)有限公司(货号：QY-H10637)。CEA检测试剂盒购自上海钰博生物科技有限公司(货号：YBEA150Hu)。FC型酶标仪购自美国赛默飞世尔公司。

1.2.2标本采集 所有受试者入院后于治疗前采集外周静脉血5 mL，收集在抗凝管内，3 000×g离心10 min后收集血清，置于-20 ℃保存。

1.2.3CA199、NSE、CA153、CEA水平检测 采用酶联免疫吸附试验检测血清中CA199、NSE、CA153、CEA水平。将标准品梯度稀释，酶标包被板设空白对照孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、待测样品孔。添加50 μL待测血清(血清稀释度为 5 倍)，混匀后用封板膜封板后置37 ℃温育30 min，用洗涤液清洗5次，拍干后添加酶标试剂50 μL，空白对照孔除外，封板膜封板后置37 ℃温育30 min，用洗涤液清洗5次，拍干。每孔先加入显色剂A 50 μL，再加入显色剂B 50 μL，混匀后37 ℃避光显色15 min。 每孔加终止液50 μL，终止反应，以空白对照孔调零，450 nm波长依序测量各孔吸光度(A)值。制作标准品标准曲线，测得各指标A值，计算初始浓度。

1.2.4判定标准 采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估CA199、NSE、CA153、CEA在脑胶质瘤诊断中的最佳临界值，根据临界值判定脑胶质瘤诊断的阳性、阴性结果。CA199、NSE、CA153、CEA联合检测时，当其中一项为阳性，则联合检测结果为阳性。

1.2.5预后评估 脑胶质瘤患者治疗后1个月采用门诊或电话随访方式，记录MRI复查结果，主要检测脑部肿瘤的变化，根据WHO评价标准评估患者近期预后[5]，治疗后肿瘤完全缓解、部分缓解视为预后良好，病灶稳定及进展视为预后不良。

2 结 果

2.1脑胶质瘤组和对照组患者血清中 CA199、NSE、CA153、CEA水平比较 脑胶质瘤组患者血清中CA199、NSE、CA153、CEA水平均较对照组高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 脑胶质瘤组和对照组患者血清CA199、NSE、CA153、CEA水平比较

2.2不同恶性程度脑胶质瘤患者血清中 CA199、NSE、CA153、CEA水平比较 与低级别脑胶质瘤组相比，高级别脑胶质瘤组患者血清CA199、NSE、CA153、CEA水平均升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 不同恶性程度脑胶质瘤患者CA199、NSE、CA153、CEA水平比较

2.3CA199、NSE、CA153、CEA对脑胶质瘤的诊断价值分析 ROC曲线分析显示，NSE诊断脑胶质瘤的曲线下面积(AUC)为0.709(95%CI:0.616～0.791)，临界值为29.24 U/mL；CA199诊断脑胶质瘤的AUC为0.859(95%CI:0.781～0.918)，临界值为29.48 U/mL；CA153诊断脑胶质瘤的AUC为0.782(95%CI:0.694～0.854)，临界值为49.19 U/mL；CEA诊断脑胶质瘤的AUC为0.630(95%CI:0.694～0.854)，临界值为12.40 ng/mL。以各项指标的临界值作为阳性评定标准，则NSE诊断脑胶质瘤的灵敏度为61.54%，特异度为73.33%，准确度为67.86%；CA199诊断脑胶质瘤的灵敏度为72.55%，特异度为75.00%，准确度为73.87%；CA153诊断脑胶质瘤的灵敏度为68.75%，特异度为70.31%，准确度为69.64%；CEA诊断脑胶质瘤的灵敏度为63.04%，特异度为65.15%，准确度为64.29%。见图1和表3。

2.4联合检测与单项检测诊断效能对比 NSE、CA199、CA153、CEA联合诊断的灵敏度为88.46%，特异度为81.67%，准确度为84.82%。4项指标联合诊断的灵敏度、准确度均高于单项检测，差异有统计学意义(P<0.05)。

图1 CA199、NSE、CA153、CEA对脑胶质瘤诊断的ROC曲线

表3 CA199、NSE、CA153、CEA单项检测及联合检测对脑胶质瘤的诊断结果(n)

2.5CA199、NSE、CA153、CEA水平与脑胶质瘤患者预后的关系 治疗后1个月，预后良好组41例，预后不良组1例。与预后良好组相比，预后不良组患者血清中CA199、NSE、CA153、CEA水平均显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 CA199、NSE、CA153、CEA水平与脑胶质瘤患者预后的关系

2.6影响脑胶质瘤患者预后的Logistic回归分析 以预后结果作为因变量，以患者NSE、CA153、CA199、CEA水平作为自变量，Logistic回归分析结果显示，NSE、CA153、CA199、CEA 是影响脑胶质瘤患者预后的独立因素。见表5。

表5 影响脑胶质瘤患者预后的Logistic回归分析结果

3 讨 论

脑胶质瘤是临床上发病率、复发率、致死率高的神经系统肿瘤之一。临床主要采用手术辅助放化疗及免疫治疗脑胶质瘤，但由于脑胶质瘤位置特殊，肿瘤容易向脑组织浸润性增长，且脑组织缺乏有效免疫系统，造成脑胶质瘤预后较差[6]。脑胶质瘤患者临床症状及体征比较复杂，目前，临床主要采取MRI、超声、脑脊液、脑电图等方式检测，然而在肿瘤初期阶段，临床特征无特异性[7]，无法早期诊断脑胶质瘤。因此，寻找早期诊断脑胶质瘤的有效方式对于改善患者预后具有重要意义。

肿瘤标志物是从肿瘤细胞分泌至组织或体液中的物质，CA199属于类糖脂分子。过往研究发现，在胃癌、胰腺癌等癌细胞产生的CA199进入血液循环，使血清中CA199水平升高，可作为肿瘤检测标志物[8-9]。目前，CA199在脑部肿瘤中的报道不多。WANG等[10]研究发现，颅内表皮样囊肿患者血清中CA199水平明显高于对照组，且与患者临床参数如肿瘤大小等具有明显正相关关系，ROC曲线分析发现CA199对颅内表皮样囊肿诊断的AUC为0.8，说明CA199对颅内表皮样囊肿具有较高的诊断价值。姜宇等[11]研究发现，CA199在脑膜癌患者脑脊液中水平明显升高，对疾病诊断具有一定的价值。以上研究表明，CA199水平的异常升高可能在脑部肿瘤中具有一定的诊断价值。本研究结果显示，脑胶质瘤患者血清CA199水平明显高于对照组，随着肿瘤恶性程度的升高而逐渐升高，且对脑胶质瘤诊断的AUC为0.859，灵敏度为72.55%，特异度为75.00%，准确度为73.87%，提示CA199与脑胶质瘤发生、发展相关，对脑胶质瘤具有一定的诊断价值。

NSE属于烯醇化酶同工酶，在神经元、红细胞及神经细胞中表达，是组织分布特异性因子，多数学者认为NSE对神经内分泌肿瘤、脑卒中、颅脑损伤等疾病具有一定的诊断价值[12]。GEORGANTZI等[13]研究发现，神经母细胞瘤患者中NSE水平明显升高，经治疗后水平降低，对疾病的诊断、预后评估具有一定的临床价值。姜利华等[14]研究发现，NSE在脑胶质瘤中水平升高，对脑胶质瘤的发生具有一定的诊断价值。本研究发现脑胶质瘤患者血清NSE水平明显高于对照组，随着肿瘤恶性程度的升高而逐渐升高，且对脑胶质瘤诊断的AUC 为0.709，灵敏度为61.54%，特异度为73.33%，准确度为67.86%，提示NSE对脑胶质瘤具有一定的诊断价值。

CA153属于大分子量糖蛋白，主要定位于肿瘤细胞表面，当细胞发生癌变后从细胞上脱落进入血清中造成血清CA153水平升高。以往研究显示，在乳腺癌、卵巢癌中其阳性检出率较高[15]。CA153在脑部肿瘤中的报道较少，有研究发现，CA153在非小细胞肺癌患者脑转移中水平显著升高，是影响非小细胞肺癌脑转移患者预后的独立因素[16]。本研究发现，脑胶质瘤患者血清CA153水平明显高于对照组，随着肿瘤恶性程度的升高而逐渐升高，且对脑胶质瘤诊断的AUC为0.782，灵敏度为68.75%，特异度为70.31%，准确度为69.64%，提示CA153与脑胶质瘤发生、发展相关，对脑胶质瘤具有一定的诊断价值。

CEA主要存在胚胎、癌组织中，当正常细胞转化为恶性肿瘤细胞时，基因调控受损，血清中会产生大量CEA[17]。过往研究发现，非小细胞肺癌患者中CEA水平升高与肿瘤的发生、复发有关[18]。目前，CEA在脑肿瘤中的研究不多，但有研究发现CEA在肿瘤脑转移中水平升高，对肿瘤脑转移具有一定的诊断价值。本研究结果显示，脑胶质瘤患者血清CEA水平明显高于对照组，随着肿瘤恶性程度的升高而逐渐升高，CEA对脑胶质瘤诊断的AUC为0.630，灵敏度为63.04%，特异度为65.15%，准确度为64.29%，提示CEA对脑胶质瘤具有一定的诊断价值。

高效的生物学标志物不但应具有取材方便、检测迅速、成本低廉等优势，还应具有较高的灵敏度和特异度。血清肿瘤标志物往往比影像学更早发现病情，然而血清诊断灵敏度虽高，但存在较多假阳性和假阴性，不能满足临床诊断需求。不同的检测方法间可提供互补的信息，达到取长补短的效果。本研究发现NSE、CA153、CA199、CEA 4项指标联合检测后，灵敏度、准确度均高于单项检测，提示联合检测诊断价值更佳。

近期研究发现，CA199、CA153等血清肿瘤标志物与肿瘤患者预后有关[19]。本研究结果显示，与预后良好组相比，预后不良组患者血清NSE、CA153、CA199、CEA 水平升高，推测上述4项指标水平升高可能与脑胶质瘤患者预后不良有关。进一步进行Logistic回归分析发现，NSE、CA153、CA199、CEA为影响脑胶质瘤患者预后的独立因素，提示NSE、CA153、CA199、CEA水平高的脑胶质瘤患者预后不佳。

本研究也存在一定的缺陷，纳入的病例数量较少，后续应纳入更多样本为脑胶质瘤的诊断提供更充分的理论依据。