大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶菌株的临床分布及耐药性分析

施建东，黄梅霞，柯芬

产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）是由质粒介导的耐抗生素酶，可水解头孢一、二、三代及氨曲南，是导致革兰阴性细菌产生抗生素耐药性的重要原因［1］。近年来随着临床抗生素的滥用，促使ESBLs 不断产生，耐药质粒在不同菌株间的相互传播加快，加重细菌耐药现象［2-3］。大肠埃希菌（ECO）、肺炎克雷伯菌（KPN）作为产ESBLs 的代表菌，会诱发肠道感染、肺部感染及泌尿系统感染等，对产ESBLs 的代表菌ECO 和KPN 临床分布及耐药性进行分析，这对开展临床治疗工作具有重要意义［4-5］。本研究旨在分析ECO 和KPN 产ESBLs 菌株的临床分布及耐药性，以为医院耐药菌监测及防治感染提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2019 年5 月—2021 年5 月从莆田盛兴医院各科室住院患者送检标本中分离出的208 株ECO 和KPN，其中ECO、KPN 分别为89 株、119 株。

1.2 仪器与试剂 VITEK2compact 全自动细菌分析仪与M-H培养基分别由法国生物梅里埃公司、天仁同祥生物技术有限责任公司提供，抗菌药物纸片由英国Oxoid 公司提供，质控菌株ECO ATCC25922、KPN ATCC700603 购自湖北省临床检验中心。

1.3 药敏试验 菌株药敏试验结果采用纸片扩散法（K-B 法）判断，将送检标本划在血平板，于37 ℃环境中培养18～24 h，重新分离菌株培养，将单个菌挑取出，完成细菌悬液的配置，经0.5 麦氏比浊管比浊，蘸取菌液，并涂抹于琼脂表面接种3次，室温下，平板放置干燥3～5 min，琼脂表面紧贴含药纸片，置于孵育箱（35 ℃）16～18 h 后读取结果。

1.4 ESBLs 测定及判断 通过标准化K-B 法对菌株进行测定，确证试验采用头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸纸片或头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸纸片；将相关菌配制成0.5 麦氏单位，涂于M-H 平板上，菌干后贴上两队抗生素组合，于37 ℃环境中放置24 h，菌产ESBLs 判断标准：任何一组药物抑菌圈直径、相应单药抑菌圈直径≥5 mm。

1.5 观察指标（1）分析产ESBLs 的ECO、KPN 标本来源及科室分布。（2）分析产ESBLs、非产ESBLs 的ECO、KPN耐药性。

2 结果

2.1 产ESBLs 的ECO、KPN 标本来源 从本院临床各科室送检标本中分离出的208 株ECO 和KPN，其中ECO、KPN 分别为89株、119株，产ESBLs的ECO、KPN分别为43株（48.31%）、23 株（19.33%），共检出66 株，检出率为31.73%（66/208）。产ESBLs 的ECO 与KPN 的主要检出标本分别来源于尿液、痰液。见表1。

表1 产ESBLs 的ECO、KPN 标本来源分布 ［株（%）］

2.2 产ESBLs 的ECO、KPN 的科室分布 在ICU 中，产ESBLs 的ECO、KPN 均分布最多。见表2。

表2 产ESBLs 的ECO、KPN 的科室分布 ［株（%）］

2.3 产ESBLs、非产ESBLs 的ECO、KPN 耐药性 产ESBLs的ECO 对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南、头孢他啶、左氧氟沙星、庆大霉素、环丙沙星、妥布霉素、头孢唑林、头孢替坦耐药率分别为0、2.33%、2.33%、65.12%、100.00%、46.51%、83.72%、20.93%、95.35%、23.26%；产ESBLs 的KPN 对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南、头孢他啶、左氧氟沙星、庆大霉素、环丙沙星、妥布霉素、头孢唑林、头孢替坦耐药率分别为8.70%、8.70%、8.70%、56.52%、100.00%、52.17%、43.48%、34.78%、91.30%、34.78%；产ESBLs 的ECO、KPN 均对左氧氟沙星、头孢唑林耐药率较高，对亚胺培南耐药率最低（耐药率分别为0、8.70%）。见表3。

表3 产ESBLs、非产ESBLs 的ECO、KPN 耐药性 ［株（%）］

3 讨论

自1983 年德国首次分离出SHV-2 型ESBLs 以来，其种类及数量不断增长［6］。本研究分析ECO 和KPN 产ESBLs 菌株的临床分布特点，发现产ESBLs 的ECO、KPN 分别为43株、23 株，共检出66 株，检出率为31.73%（66/208）；产ESBLs 的ECO 主要检出标本来源于尿液，产ESBLs 的KPN主要检出标本来源于痰液，且科室分布均以ICU 为主，表明产ESBLs 的ECO 主要引起尿路感染，而KPN 主要引起呼吸道感染，且存在更多侵入性操作、病情严重且免疫低下的患者感染风险较高。

产ESBLs 能够通过接合、转化及传导等方式在细菌间传播，会导致耐药扩散，且产ESBLs 菌株在呼吸系统及泌尿系统中易定植，会导致严重感染，增加临床治疗难度［7-8］。抗菌药物的使用、医院感染管理水平与细菌耐药率间具有密切联系，在临床抗菌药物的选取中，需要依据非产ESBLs 细菌与产ESBLs 细菌的特点决定，以提高抗菌药物使用合理性，降低细菌多重耐药性的发生，提高治疗效果［9-10］。本研究结果显示，产ESBLs的ECO对左氧氟沙星、头孢唑林耐药率较高，对亚胺培南、厄他培南耐药率较低，产ESBLs 的KPN 对左氧氟沙星、头孢唑林耐药率较高，对亚胺培南、厄他培南耐药率较低。史治国［11］分析了产ESBLs 的ECO 和KPN 临床分布及耐药性，其研究结果得出，在ICU、呼吸内科，产ESBLs的ECO 与KPN 检出率最高；ECO 在痰液与尿液中检出率最高，KPN 在痰液中检出率最高；且产ESBLs 对亚胺培南、美罗培南耐药率极低。同时，与非产ESBLs 菌株相比，产ESBLs 菌株药率较高，本研究与之较为相似。提示与非产ESBLs 菌株相比，产ESBLs 菌株耐药率均有不同程度的增加，为此临床治疗时应合理使用抗生素，严格参照抗菌谱治疗，尽量减少或避免使用左氧氟沙星、头孢他啶等耐药率较高的药物，而采用亚胺培南、厄他培南等治疗效果良好的药物。根据产ESBLs 的ECO 和KPN 菌株的临床分布及耐药性结果，临床上需对产ESBLs 细菌进行预防，以良好控制产ESBLs 细菌，分别通过控制体液传播、飞沫传播为主，同时需要加强抗菌药物管理方案的实施与加强，以减少抗菌药物的使用，依据药敏试验结果合理使用抗菌药物，以预防并控制产ESBLs 的ECO 与KPN［12-13］。同时患者及其家属、医护人员均需采取相关预防感染措施，强化对产ESBLs 细菌的监测，并加强管理，强化无菌操作，避免交叉感染，并注重对其耐药性的检测，进而指导临床用药，延缓细菌耐药情况的发生［14-15］。

综上所述，产ESBLs 的ECO 和KPN 检出率高，其中ECO 可能诱发泌尿道感染，KPN 则会诱发呼吸道感染，且呈多重耐药性，而亚胺培南、厄他培南是较为理想的选择。