高效液相色谱法测定血宝胶囊中大黄酚含量

孙长仁

（吉林省白山市食品药品检验所，吉林 白山 134300）

血宝胶囊由熟地黄、当归、漏芦的、丹参、党参、鸡血藤、附子、桂枝、枸杞子、仙鹤草、川芎、虎杖、牛西西、连翘、赤芍、补骨脂、制何首乌、黄芪（蜜炙、刺五加、鹿茸、紫河车、女贞子、等多味药材组方，具有补阴培阳，益肾健脾。用于再生障碍性贫血，白细 胞缺乏症，原发性血小板减小症，紫癜。牛西西同样为血宝胶囊主要成分。

牛西西具有、促进血小板再生，收敛止血，润肠通便，清热解毒等功效，而其功效的发挥，活性成份主要依赖于“大黄酚”。因此选择血宝胶囊中牛西西的活性成分大黄酚作为质量控制指标。

1 仪器与试药

THERMO FIsher U3000效液相色谱仪。（大黄酚，110796-201922，含量以96.0%计 中国食品药品检定研究院）血宝胶囊（白山正茂药业股份有限公司 国药准字Z22024266），批号为ZLB1922、ZLB1905,ZLB1815、ZLB2001，ZLB2005、Methanol（CH3OH）Water（0.45 um），磷酸（分析纯）

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

方法色谱柱为（Agilent Tc-5 C18柱（250 mm×4.6 mm,，5 μm）流动相：甲醇-0.1%磷酸（80：20），流速：0.8 mL/min；检测波长254 nm

2.2 对照品溶液制备

精密称取大黄酚对照品适量，加甲醇制成每1 mL含30 μg的对照品溶液。

2.2.1 供试品溶液制备

取本品粉末约0.25 g,精密加入三氯甲烷25 mL和1 mol/L硫酸溶液20 mL，称定重量，置80℃水浴中加热回流2小时，冷却至室温，再称定 重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀。分取三氯甲烷液，精密量取10 mL，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10 mL量瓶中， 加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.2 测定法

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.3 方法学考察

线性关系考察：吸取对照品溶液（194.496 μg/mL）0.05、0.25、1.5、2.5、5、7.5 mL分别置10 mL容量瓶中用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，即得。依法测定，以峰面积为横坐标，进样质量为纵坐标绘制标准曲线，回归方程y=2E-07x-0.0077（n=6） r=0.9993大黄酚进样量的线性范围为（0.00486 μg～0.7294 μg）

稳定性试验：取同一供试品溶液（序号4），分别在0、2、6、12、24、48小时，照正文方法测定，按峰面积计算，稳定性良好。结果见表1。

表1 稳定性试验

重复性试验：取同一供试品,按正文拟定的色谱条件，连续测定6次。结果见表2。

表2 重复性实验

实验结果表明重复性良好。

加样回收试验：精密称取已知含量的样品6份,分别精密加入对照品溶液适量,依法测定含量并计算回收率。结果如表3。

表3 大黄酚加样回收试验果（n=6）

2.4 样品含量测定

正文拟定的色谱条件测定5批样品结果为ZLB1922、ZLB1905,ZLB1815、ZLB2001，ZLB2005批号 血宝胶囊中大黄酚含量分别为0.34 mg/粒，0.33 mg/粒，0.33 mg/粒，0.34 mg/粒，0.35 mg/粒

3 讨 论

血宝胶囊对治疗缺铁性贫血，其疗效比较明显，还能有效避免西药带来的毒性反应。血宝胶囊为血液疾病保守治疗过程中的常用药物[1]。目前2015版药典尚未收入血宝胶囊的检验标准，因此检验牛西西的活性成分大黄酚作为质量控制指标十分必要，通过方法学考证符合2015年版药典通则要求[2]。