两种不同免疫检验方法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志物的效果分析
2021-01-18黎红梅
龚 帅，黎红梅*
（重庆市垫江县人民医院，重庆 408300）
乙型病毒性肝炎是临床常见的肝脏疾病，主要由乙型肝炎病毒引起，病变部位以肝脏为主。为实现对该疾病的尽早诊断及治疗，需加强可靠检出方法的研究[1]。现阶段主要采用酶联免疫吸附法和电化学发光法检测乙型肝炎病毒感染血清标志物[2]。笔者对ECLIA、ELISA两种免疫检验方法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志物的阳性检出率进行了比较，现报道如下。
1 资料和方法
1.1 标本来源
选取2019年1月—2020年1月期间在我院接受治疗的乙型肝炎患者90例，所有乙型肝炎病毒感染患者均符合《病毒性肝炎的防治方案》中的诊断标准[5]。患者中年龄最小的患者为24岁，年龄最大的患者为44岁，患者的平均年龄为（34.8±4.2）岁，其中男性患者有56例，剩余患者全部为女性患者。
1.2 仪器与试剂
全自动电化学发光免疫分析仪（Cobas E601）（德国罗氏诊断公司）；科华ST-360本酶标仪。ECLIA法检测试剂：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc试剂盒（德国罗氏诊断公司）；ELISA法检测试剂：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc试剂盒（英科新创科技有限公司），HBsAg血清标准物（北京康彻斯坦公司）。
1.3 方法
①采集患者空腹外周静脉血5 ml，离心处理10 min，速度为3000 r/min，将分离后的血清置于-20℃的冰箱中进行冷冻保存备测。然后分别采用电化学发光法法和用酶联免疫吸附法检测乙型肝炎患者血清标本感染标志物，其中检测的项目主要包含HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb及HBcAb等。按试剂说明书操作。对这两种方法的检测结果进行比较分析。②将HBsAg血清标准物质（1 IU/ml）按倍比稀释（1.0、0.5、0.25、0.125、0.063、0.032），将稀释后的标本分别使用ELISA法和ECLIA法检测，检测重复5次，平均值作为检测结果，将能测出的最低浓度作为检出限。
1.4 结果判读
参照试剂盒说明书。①ECLIA检测：测定结果以COI表示，HBsAg、HBeAg COI≥1.0时为阳性，抗-HBe、抗-HBc COI＜1.0时为阳性，抗-HBs≥10 IU/L为阳性。②ELISA检测：测定结果以S/CO表示，HBsAg、HBeAg、抗-HBs S/CO≥1.0为阳性；抗-HBe、抗-HBc S/CO＜1.0时为阳性。
1.5 统计学处理
研究中相关数据应用SPSS 21.0软件处理分析，使用%表示研究中的计数资料，（±s）表示计量资料。采用t对组间对比进行检验，有统计学意义应用P＜0.05进行表示。
2 结 果
电化学发光法对于HBsAg、HBeAg、HBeAb阳性检出率均高于酶联免疫吸附试验，差异均有统计学意义（P＜0.05）；两种检测方法对于HBsAb、HBcAb阳性检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。
表1 两种检测方法血清标志物的阳性检出率
3 讨 论
近年来，乙肝的发病率呈逐年攀升，发病年龄呈年轻化趋势。早期积极检查，及时确诊是防止疾病进展的重要手段[3]。目前，临床上主要通过ELISA、ECLIA等检测手段对乙肝病毒血清学进行检验，为疾病的早期确诊以及后续治疗方案的实施提供参考[4]。
目前，酶联免疫吸附法在临床上广泛应用，是早期检验乙肝病毒血清学的主要手段之一。但ELISA法的检测结果容易受到人为操作因素的影响，如加样后加酶结合物间隔时间、终止反应后延时比色时间、洗板次数、反应温度等[5]，这些因素甚至会直接影响阴阳性结果的判断。而且因为试剂制作工艺的差异以及保存方式的不同等原因，会导致此检测方法的稳定性不足，只能进行定性检测，无法得知各标志物的真正浓度，在临床使用上有一定的局限性。
随着我国医疗技术的不断发展，电化学发光法是目前临床检测中最为先进的技术。电化学发光法主要将发光技术和免疫测定技术相互结合，对患者进行半定量或定量的抗原检测及微量抗体检测。此次研究中对患者的乙型肝炎病毒感染血清标志物进行检测时，电化学发光法对于HBsAg、HBeAg、HBeAb阳性检出率均高于酶联免疫吸附试验，差异均有统计学意义（P＜0.05）；两种检测方法对于HBsAb、HBcAb阳性检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。由此可知，对乙型肝炎患者病毒感染血清标志物进行检测时，电化学发光法和酶联免疫吸附法相比具有更高的灵敏度和准确度，而且操作起来也十分简单。可有效弥补人为操作的不足之处，最大限度降低漏诊率、误诊率，提升临床检验准确性。
综上所述，将电化学发光法应用于乙肝病毒血清检验的效果更为显著，且灵敏度较高，特异性好，适用于大规模自动化操作和定量检测。具有更广阔的发展前景。
