冷凝集致淋巴细胞亚群检测困难1例

赵云平,徐宏忍,潘永圣,郭 杰,尹利民

(云南省昆明市第一人民医院检验科，云南 昆明 650011)

-淋巴细胞亚群是机体调节免疫应答水平、维持免疫稳定的重要细胞。冷凝集现象给淋巴细胞亚群检测带来一定困难，冷凝集不仅影响RBC，对淋巴细胞、单核细胞及中性粒细胞等白细胞也会产生凝集作用[1]。

1 病例介绍

患者女，48岁，诊断为多发性骨髓瘤8月余，于2020-05月在昆明市第一人民医院巩固治疗，其间检测淋巴细胞亚群，标本为乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝静脉血，发生冷凝集现象。检测设备：CantoII流式细胞仪(美国BD公司),检测试剂：淋巴细胞亚群检测试剂盒(美国BD公司)。

采取以下几种方法处理患者标本：①直接上机检测：将冷凝集标本直接按照仪器和试剂盒说明书进行检测；仪器提示无法吸样等报警信息，样本管内壁肉眼观察可见管壁有细沙样颗粒物质，显微镜下观察血涂片可见大量红细胞成缗钱状排列。②37℃水浴法：将冷凝集标本水浴箱温浴30 min后，严格按照仪器和试剂盒说明书进行检测；仪器提示无法吸样等报警信息，观察试管壁出现细沙样颗粒物质。③血浆置换法：将冷凝集标本1 600 r·min-1离心5 min分离血浆，吸弃血浆，保留全部白细胞和血小板层，加入等量生理盐水，振荡混匀，严格按照仪器和试剂盒说明书进行检测；经此方法处理后，红细胞凝集现象完全消失，仪器吸样正常，无相关报警信息；检测结果CD3+T淋巴细胞0.533×109/L，与血常规淋巴细胞绝对计数(0.600×109/L)比较差异无显著性(P<0.05)。

2 讨 论

健康人血清中含少量冷凝集素，但效价很低，一般在1∶16以下，环境温度<4℃时才有活性，产生凝集现象，当温度达到20℃时一般不会出现凝集现象。但在某些病理(如自身免疫性溶血性贫血、多发性骨髓瘤及支原体肺炎等)情况下，冷凝集素效价可异常增高[2]。血液离体后温度降低，较高浓度的冷凝集素可诱导红细胞出现凝集现象[3]。冷凝集素会与红细胞结合，凝集的红细胞在温度>37℃时可逆性散开，并快速从红细胞表面解离，此时不会造成非特异性凝集[4]。

该患者为多发性骨髓瘤患者，标本发生冷凝集，血常规标本37℃水浴法处理后可正常检测，结果准确，但淋巴细胞亚群标本用37℃水浴法处理后仪器仍然无法吸样，推测可能是两者检测过程不一样导致。血常规是温浴完成立即上机检测，检测时间短，标本不会很快产生冷凝集现象；流式细胞仪检测淋巴细胞亚群需30 min进行前处理，标本又会产生冷凝集现象，所以37℃水浴法可能不适合冷凝集淋巴细胞亚群检测。冷凝集素是引起标本冷凝集的主要原因，理论上将血浆中冷凝集素清除，标本即不会发生冷凝集，因此血浆置换法可能更适合冷凝集淋巴细胞亚群的检测。