肺炎支原体肺炎患儿血清炎性因子及心肌酶的表达水平及意义

马卉,任明芬

新乡医学院第二附属医院儿科(河南新乡 453002)

小儿肺炎支原体肺炎(MPP)是因肺炎支原体(MP)感染所致的下呼吸道疾病，占儿童社区获得性肺炎的15%～30%[1]。MP感染后，刺激机体产生多种细胞因子，与细胞结合后介导炎症反应、免疫反应。相关研究发现，MPP患儿的白细胞介素(IL)-10、γ干扰素、IL-6、超敏C反应蛋白等多种炎性因子水平较非肺炎儿童显著升高[2-3]。MP感染不仅会造成肺部实质性病变，还可引起肺外并发症，常累及多个系统、器官，其中心肌损害较为常见[4-5]。然而MP感染引起心肌损害缺乏特征性表现，容易被忽视，延误治疗[6]。肌酸激酶同工酶(CPK-MB)可直接反映心肌损害程度，是常用的量化指标之一[7-8]。相关研究发现，MPP患儿血清CPK-MB、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)表达均高于正常水平，其中年龄、特应性体质是影响心肌CPK-MB、α-HBDH水平的危险因素，表明MPP患儿存在心肌损害，且年龄低、特应质患儿更易发生心肌损害[9]。住院MPP患儿病程、病情严重程度等各有不同。本研究主要探讨住院患儿MPP血清炎性因子及心肌酶水平表达的意义，并比较了轻症与重症、急性期与恢复期、普通MPP与难治性支原体肺炎(RMPP)的血清炎性因子与心肌酶表达差异，旨在更好地指导临床诊治MPP患儿。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2016年1月至2019年1月收治的100例住院的MPP患儿作为观察对象，设为观察组。纳入标准：(1)符合MPP诊断标准；(2)均有发热、肺部啰音、咳嗽等症状体征；(3)年龄1～13岁；(4)家属自愿参与。排除标准：(1)近半年有其他急性感染者；(2)合并肺结核、急性上呼吸道感染等呼吸系统疾病；(3)过敏体质；(4)合并自身免疫性疾病。另选健康儿童50例设为对照组，近3个月均无发热、咳嗽、严重感染。两组性别构成、年龄差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 两组基本资料比较

MPP患儿分类：(1)急性期为未经任何药物治疗，临床症状体征无变化；(2)恢复期为经抗生素、糖皮质激素、免疫调节剂等药物治疗2周，临床症状减轻、改善。(3)轻症：热程≤20 d，无系统肺外合并症，胸X线片显示为支气管炎、肺炎；(4)重症：热程>20 d，肺外合并症≥2个，胸X线片呈大片实变影、胸腔积液。(5)RMPP：在MPP确诊的基础上，合并以下任意一条：①脱水；②全身炎症反应综合征；③炎症累及双侧多肺叶；④抗菌治疗2周以上无改善且发热持续时间超过10 d。

100例MPP患儿中，急性期29例，恢复期71例；轻症68例，重症32例；普通MPP 74例，RMPP 26例。

1.2 方法 采集两组静脉血3 mL，3 000 r/min离心处理，分离血清，置于-80℃冰箱中待检。

1.2.1 血清炎性因子 使用酶联免疫吸附法测定IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，试剂盒均购自上海江莱生物科技有限公司。主要步骤：(1)编号微量反应板，加样；(2)加酶结合物，静置37℃×30 min；(3)加洗涤液静置20 s，洗涤3～5次，拍干；(4)加底物和显色剂，摇匀，静置37℃×10 min；(5)加终止液终止反应，使用美国AWARENESS酶标仪读取光密度值，绘制曲线，计算含量。

1.2.2 心肌酶 使用美国杜邦RXL全自动生化分析仪及配套试剂测定血乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、CPK-MB，操作按照仪器作业指导书进行。

2 结果

2.1 两组血清炎性因子与心肌酶比较 观察组血清炎性因子IL-6、IL-10、TNF-α及心肌酶指标LDH、CK、CPK-MB均高于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 两组血清炎性因子与心肌酶比较

2.2 急性期、恢复期MPP患儿血清炎性因子与心肌酶水平比较 急性期MPP患儿的血清炎性因子IL-6、IL-10、TNF-α及心肌酶指标LDH、CK、CPK-MB均高于恢复期MPP患儿(P<0.05)，见表3。

2.3 轻症、重症MPP患儿血清炎性因子与心肌酶水平比较 轻症MPP患儿的血清炎性因子IL-6、IL-10、TNF-α及心肌酶指标LDH、CK、CPK-MB均低于重症MPP患儿(P<0.05)，见表4。

表3 急性期、恢复期MPP患儿血清炎性因子与心肌酶水平比较

2.4 普通MPP与RMPP患儿血清炎性因子与心肌酶水平比较 普通MPP患儿的血清炎性因子IL-6、IL-10、TNF-α及心肌酶指标LDH、CK、AST、CPK-MB均低于RMPP患儿(P<0.05)，见表5。

表5 普通MPP与RMPP患儿血清炎性因子与心肌酶水平比较

3 讨论

MP主要通过飞沫传播，其可引起肺部疾病和损害，并可累及心血管、皮肤、神经系统等多个系统，引起多种肺外并发症[10]。非流行年份MPP发病占吸入性肺炎的10%～20%左右，流行年份可超过30%[11]。儿童由于机体发育不完善，免疫功能较低，更易感染MP，患儿多见于学龄前儿童，近年来MPP发病年龄呈低龄化趋势[12]。MPP临床表现有发热、咳嗽、肺部啰音等症状体征，部分患儿反复发热、病程迁延，严重影响儿童身心健康。

MP侵入呼吸道上皮细胞后，可刺激机体产生大量炎性细胞因子，引起局部炎症反应，造成局部组织中性粒细胞、巨噬细胞浸润[6]。炎性细胞因子进入血液循环系统，使血清炎性因子水平发生变化，因此，血清炎性细胞因子能够反映机体感染情况[13]。TNF-α主要由单核细胞、巨噬细胞合成分泌，属于一种多肽类调节因子[14]。TNF-α与炎症反应密切相关，是一种致炎因子，其能够上调MHCⅠ类抗原、ICAM-1等黏附分子的表达，促进单核-巨噬细胞、血管内皮细胞等产生IL-6、IL-8等细胞因子，刺激机体炎症反应[15]。IL-6属于一种致炎因子，其主要由单核细胞、成纤维细胞等合成分泌，具有多种生物学功能，包括促进T细胞、B细胞增殖，刺激B细胞分泌免疫球蛋白，刺激急性期反应蛋白生产等。MP感染后，炎症急性期可大量产生IL-6，并参与肺部炎症病理性改变过程。IL-10是由单核-巨噬细胞、树突状细胞、T细胞等产生的抑炎因子，其主要通过抑制细胞表面分子、促炎因子、炎症趋化因子的基因表达，增加特异性、非特异性免疫分子的活性，起到抑炎的作用[16]。本研究结果显示，观察组血清IL-6、IL-10、TNF-α均高于对照组。表明，MPP患儿血清IL-6、IL-10、TNF-α呈高表达。

心肌组织细胞中含有大量的生物酶，这些生物酶在血浆中的活性很低。心肌细胞受损后，可造成细胞膜通透性改变，心肌酶从细胞内释放出来，进入血液循环，使血清中的心肌酶水平增加[17]。MPP心肌损害机制并不完全清楚，可能为MP感染后直接作用于心脏，使心肌受损；也可能为MP与心肌细胞有共同抗原，MP侵入机体后产生自身抗原，发生免疫应答，形成免疫复合物，导致心肌受损[18-19]。LDH、CK、AST、CPK-MB均为心肌酶，LDH、AST除了心肌外，还分布于人体多个脏器中，各种因素作用下所致的脏器损伤均可引起LDH、AST表达增加，因此，组织特异性、敏感度差[20]。CK、CPK-MB主要存在于心肌细胞内，血清中呈微量表达，具有较高敏感度，可反映心肌损害程度，常作为诊断心肌损伤的指标[21]。本研究结果显示，观察组的LDH、CK、AST、CPK-MB均高于对照组。表明，MPP患儿血清心肌酶表达上调，存在心肌损伤。

据报道，MPP急性期患儿C反应蛋白水平、外周血白细胞计数、血清LDH、AST、CK-MB、CK水平均显著高于MPP恢复期患儿和健康体检儿童[22]。Medjo等[23]的研究表明，血清炎性因子IL-10在急性期MPP发病机制中发挥重要作用。本研究结果显示，急性期MPP患儿的血清炎性因子、心肌酶水平高于恢复期MPP患儿。提示炎性因子可能参与了急性MPP发病过程，引起患儿心肌损伤，而经治疗转为恢复期后，炎症反应得到抑制，心肌损伤减轻。研究显示，MPP患儿经抗感染治疗后，血清TNF-α、LDH、AST、CK-MB、CK降低[24]。证实，MPP患儿经治疗后血清炎性因子及心肌酶的表达下调，临床上可作为判断治疗效果的指标。本研究结果显示，轻症MPP患儿的血清炎性因子心肌酶水平低于重症MPP患儿；普通MPP患儿的血清炎性因子、心肌酶水平均低于RMPP患儿。研究指出，RMPP组患儿心肌酶水平明显高于MPP组患儿[25]。本研究结果与之类似，提示重症MPP、RMPP患儿机体炎症反应、心肌损伤更明显。同时亦提示，血清炎性因子参与MPP发展过程，测定血清炎性因子与心肌酶水平有助于判断MPP患儿病程、病情。

综上所述，住院MPP患儿血清炎性因子与心肌酶均呈高表达，急性期、重症MPP与RMPP的升高更明显，可作为患儿病情程度及临床转归的预测因子。