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γ-氨基丁酸的制备方法及其功能食品研究进展

2020-12-22宁亚维马梦戈杨正侯琳琳赵忠情陈艺王志新贾英民

食品与发酵工业 2020年23期
关键词:糙米谷氨酸乳酸菌

宁亚维,马梦戈,杨正,侯琳琳,赵忠情,陈艺,王志新,贾英民

1(河北科技大学 食品与生物学院,河北 石家庄,050018) 2(北京工商大学 食品与健康学院,北京,100048)

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA),也称γ-氨酪酸,分子式为C4H9NO2,相对分子质量为103.12,由谷氨酸(glutamic acid,Glu)经谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)催化而来。GABA作为一种抑制性神经递质在神经系统中发挥重要作用,如与GABA-A受体结合可以扩张血管降低血压[1];可以增加神经元细胞膜对Cl-的通透性,引起细胞超极化,产生突触后抑制效应,达到镇静神经的效果。GABA通过促进GABA神经递质的释放,增加GABA能神经元细胞数目,缓解因GABA神经元细胞减少导致的小鼠抑郁[2]。此外,GABA还可以调节β-淀粉样蛋白相关的功能活性,缓和阿尔兹海默症[3]。近来发现GABA还具有抑制肿瘤细胞增殖、改善脑血栓、降低1型糖尿病等功能[4]。尽管GABA具有诸多功能性,但是人体内GABA含量会随着人的年龄以及外界环境压力的增加而日益减少,因此在日常饮食中补充GABA对改善人体健康具有重要意义。

食品中的GABA可通过食品原料富集和外源添加2种方式强化。食品原料富集是指对含有GABA的食用性植物原料通过胁迫处理增加其体内GABA合成量,即植物源富集法。外源添加分为微生物合成法和化学合成法。微生物合成法包括直接发酵生产法和全细胞转化法。化学合成法是以吡咯烷酮、丁内酯、氯化亚砜等为原料通过化学反应开环制得GABA。但是由于化学法存在成本因素限制、副反应多及环境污染等局限性,因此目前主要通过绿色、安全的植物源富集法和微生物合成法制备GABA。随着科技的发展,近来新兴非加热技术在植物源GABA富集方面也表现出较好的应用前景。本文简要概述了GABA的生物合成机制,对GABA制备方法及其功能性食品的开发现状进行了综述,并对其未来研究开发方向进行了展望。

1 植物源GABA合成机制及富集方法

GABA广泛分布于小麦、大豆、发芽糙米等多种植物中,但含量较低。通常植物受到外界因素刺激时,机体启动自我防御机制,体内GABA水平增加,以利于植物适应外界环境变化,因此可以通过胁迫的方式提高植物原料中GABA的水平。

1.1 植物富集GABA的内在机制

高等植物中GABA的富集主要包括2条途径(如图1所示)[5],第一条是植物体内GAD催化L-谷氨酸生成GABA,生成的GABA经GABA转氨酶(GABA transaminase,GABA-T)、琥珀酸半醛脱氢酶(succinate semialdehyde dehydrogenase,SSADH)催化生成进入TCA循环的琥珀酸半醛(succinate semialdehyde,SSA)、琥珀酸,这些反应和GAD催化反应一起构成GABA支路。其中,GAD、GABA-T和SSADH是该途经重要的调控酶,激活GAD或抑制GABA-T、SSADH可提高GABA富集量。目前的研究多通过激活GAD富集GABA。第二条途径是由二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)和多胺氧化酶(polyamine oxidase,PAO)降解多胺中间产物(腐胺、亚精胺)生成,与第一条途经相比,该途径生成GABA较少,不是GABA富集生产的主要途径。

高等植物体在生长过程中通过合成GABA来抵御盐碱胁迫、缺氧、机械刺激等逆境环境。比如盐胁迫下植物体GAD 活性提高,GABA含量显著增加以适应胁迫。缺氧和机械刺激导致植物体胞内H+积累,胞内pH降低,激活GAD促进植物体GABA的合成;同时该GABA合成过程消耗了增加的质子,因此能够发挥稳定植物细胞内pH的作用。由此可见,在植物生长过程中逆境环境会胁迫体内合成GABA。

图1 GABA支路及多胺降解生成GABA途径Fig.1 The pathway of GABA formation by GABA branch and polyamine degradation

1.2 植物种子发芽胁迫法富集GABA

植物体内的GABA本身含量较低,但经浸泡发芽处理后GAD、蛋白酶等内源酶被激活,因此GABA得到富集。谷类种子如糙米、小麦、荞麦等,豆类中大豆、绿豆、蚕豆等都可用于发芽富集GABA。适宜的温度、时间浸泡发芽处理可以激活种子中的蛋白酶促进蛋白质分解增加Glu含量,Glu进一步由激活的GAD催化生成GABA。SOMBOON等[6]在35 ℃浸泡3 h籼稻糙米再使其发芽21 h,GABA含量达(44.89±7.81) mg/100 g,是不发芽组的15.5倍。WANG等[7]发现,25 ℃浸泡6 h的小麦在发芽12 h时GABA增加了50.7%。TRUONG等[8]测得35 ℃浸泡8 h的绿豆发芽12 h后,GABA含量约为108 mg/100 g,显著高于原绿豆中GABA含量。XU等[9]在25 ℃浸泡大豆Jindou 25 5 h后,于19、25和32 ℃ 3个不同温度下萌发102 h,测其GAD活力均增加,其中以32 ℃增加2.45倍最为显著,相应的GABA含量增加6.97倍,为(23.82±0.82) mg/100 g。此外,CHEN等[10]发现浸泡发芽处理绿豆中GABA的富集还与激活的多胺氧化酶转化多胺生成GABA有关。利用植物种子发芽富集GABA方法简单、绿色安全,可作为富含GABA的植物性食品原料用于功能性食品的加工。

逆境胁迫会刺激植物体内H+和Ca2+增加,从而激活GAD促进GABA的积累[5]。如低氧条件下植物电子传递链受阻,糖类物质经糖酵解途径大量生成丙酮酸,进而积累乙醇和乳酸,导致细胞质酸化[11]。高盐浓度逆境条件增加细胞渗透压导致植物细胞膜流动性改变,引发一系列磷酸化反应并激活Ca2+通道,导致大量Ca2+释放到细胞质中。而发芽胁迫法将发芽与胁迫处理相结合(图2),进一步促进了GAD的表达,为利用植物种子富集GABA提供了很好的思路(表1)。

图2 不同胁迫种子发芽方式Fig.2 Different ways of seed germination under different stress

表1 GABA植物源富集法Table 1 Enrichment of GABA in plant materials

WANG等[7]探究了低氧对发芽小麦GABA含量的影响,发现经低氧处理后小麦中GABA增加88.73%。OH等[12]在40 ℃厌氧条件下培养8 h浸湿的米糠,GABA含量从10.7 mg/100 g增加到171.5 mg/100 g,进一步添加谷氨酸、辅酶后,GABA的积累量达最大值2 242 mg/100 g。朱云辉等[13]用盐胁迫发芽苦荞来富集GABA,在NaCl浓度为34 mmol/L条件下,苦荞中GABA富集量达25.01 mg/100 g,是未发芽胁迫的2.47倍。此外研究表明,采用2种或2种以上胁迫方式比单一胁迫富集GABA更有效。尹永祺等[14]探究了低温联合低氧胁迫对发芽玉米籽粒中GABA含量的影响,发现玉米籽粒经低氧胁迫发芽72 h后,在-18 ℃冷冻6 h和25 ℃回温4 h条件下,GABA含量达152 mg/100 g,增加29.9倍。张颖等[15]将通气胁迫、Ca2+胁迫结合处理发芽糙米,在35 mmol/L的Ca2+溶液中浸泡糙米使其发芽21 h,然后以1.5 L/min的通气量通气9 h,最终糙米GABA含量28.18 mg/100 g,比正常发芽的样品提高了64.42%。

1.3 新兴胁迫技术促进植物源GABA富集

新兴的非热加工技术(如高静压、超声波、电解水、等离子体)因可激活植物组织中的酶增加GABA含量,同时具有冷加工可灭活微生物但不会对热敏性物质产生破坏作用的特点,在植物源GABA富集方面具有独特优势。低于400 MPa的高静压可以增强GAD和蛋白酶的活性。如XIA等[16]采用100 MPa高压条件处理发芽糙米10 min后,GABA含量从9.30 mg/100 g增加到12.82 mg/100 g。SHIGEAKI等[17]以200 MPa的压力处理大豆,贮存3 d时测其GABA量是未经高压处理组的1.35倍。UENO等[18]发现,浸泡15 h的大豆在200 MPa处理10 min时GABA生成速率为21 μmol/(g·min),而在300 MPa处理相同时间时为74 μmol/(g·min),表明在300 MPa处理10 min的压力-时间组合下GABA产量更高。超声波可以通过降解发芽糙米细胞壁周围物质增加细胞内Ca2+和H+浓度有效激活GAD[19]。张祎等[20]利用超声波处理发芽糙米富集GABA时发现,样品以30 kHz频率处理15 min时GABA积累量达到最大,而增加频率GABA含量下降,表明在相同时间处理情况下低频超声波处理对GABA的积累优于高频。DING等[21]以25 kHz的频率超声波处理30 min发芽小麦GABA含量增加了30.69%。电解水作为一种胁迫处理不仅可以提高GAD的活性,在促进谷物发芽方面还可以发挥抑菌防霉作用,且制备方便成本低廉,因此在富集GABA方面受到关注。HAO等[22]发现微酸性电解水(有效氯含量20.3 mg/L)可使得发芽荞麦中GABA的积累达到143.20 mg/100 g。LIU等[23]也发现中等有效氯质量浓度为17.76 mg/L的强酸性电解水可使发芽糙米GABA富集量达到最大值24.36 mg/100 g。低压等离子体技术也可以激活糙米中GAD活性,将糙米置于3 kV的低压等离子体中处理10 min后发芽24 h,GABA由初始的7.5 mg/100 g显著增加到28 mg/100 g[24]。可见,新兴技术在富集GABA方面也得到广泛应用。

2 微生物源GABA合成机制及生产工艺

微生物合成法包括发酵法和全细胞转化法,前者指微生物直接发酵基质中的L-谷氨酸/钠盐生成GABA,发酵液为成分复杂的多相体系,GABA分离提纯难度较大。后者是指先发酵培养出含GAD的微生物,再分离出细胞作为催化剂催化L-谷氨酸/钠盐生产GABA,转化液成分简单,GABA提纯简便、得率高。

2.1 生产GABA的微生物源及合成机制

生产GABA的菌株来源广泛且种类多样(表2),其合成机制主要是通过微生物体内GAD催化L-谷氨酸脱羧形成GABA。而对于耐酸性细菌,其GABA合成还依靠于一种特有的GAD抗酸系统,该系统中存在负责Glu和GABA转运的Glu-GABA(Glu-GABA antiproter)蛋白,当细胞处于酸性环境中时,该蛋白可将Glu转运至细胞内消耗H+合成GABA[30],由于H+的消耗形成了质子电化学梯度,膜上质子泵F0F1-ATPase将胞外H+转至胞内并生成ATP为细胞生长提供能量。即耐酸性细菌在维持胞内外pH平衡过程中也会生成GABA。

2.2 发酵法生产GABA

2.2.1 乳酸菌发酵法

发酵法中以公认安全且具有多种益生功能的乳酸菌研究最多,其GABA的合成依赖于不同菌种、菌株及培养条件的差异,对于产GABA的菌株通过优化其培养条件可以提高GABA产量。RIBEIRO等[31]从奶酪中分离出植物乳杆菌、副干酪乳杆菌、肠系膜明串珠菌、乳酸乳球菌等多种产GABA的乳酸菌,在添加30 mg/L谷氨酸钠的MRS肉汤中30 ℃培养48 h后,植物乳杆菌产GABA量最多(937 mg/L),分别是其他菌株的1.6、19.1和15.1倍。RAFFAELLA等[32]利用植物乳杆菌DSM 19463于添加20 mmol/L 谷氨酸钠、1%葡萄汁(质量分数)的MRS肉汤中30 ℃发酵72 h,GABA生成量为498.1 mg/L。LIM等[33]从泡菜中筛选出1株短乳杆菌 HYE1,在含质量分数1%谷氨酸的MRS培养基中30 ℃培养48 h后得到1 509.68 mg/L GABA,在2.14%麦芽糖、4.01%胰蛋白酶、2.38%谷氨酸(均为质量分数)、初始pH为4.74优化条件下同等温度、时间培养后GABA增加28%。此外,混合乳酸菌发酵也能显著增加GABA的产量。KIM等[34]在含有3%L-谷氨酸、10%冷冻天麻粉(均为质量分数)的培养基中添加0.5%的短乳杆菌GABA 100与双歧杆菌BGN4菌液,30 ℃条件下联合发酵6 d后GABA产量为1.26×104mg/L,显著高于短乳杆菌GABA 100单独发酵时的产量。HAN等[35]选用1株产GABA的嗜热链球菌与鼠李糖乳杆菌1∶1(接种量皆为106CFU/mL)共接种于含有15 g/L谷氨酸钠和质量分数10%脱脂乳粉的培养基中37 ℃发酵48 h后时产生的GABA质量浓度达8 300 mg/L,是其单独培养时(2 800 mg/L)的2.96倍。总之,产GABA的乳酸菌以乳杆菌的报道最多,通过优化其工艺条件或与混合菌株共培养可有效提高发酵效率,但大部分菌种发酵产量较低,因此筛选高产GABA的协同发酵菌株或开发高效GABA发酵工艺尤为重要。

2.2.2 酵母菌发酵法

近来发现酵母菌具有大量氨基酸和较高的GAD酶活性,且安全性高,也被用来发酵生产GABA。但酵母菌GABA合成效率低于乳酸菌,工业上较少单独使用酵母菌发酵生产GABA,而是通常将其与乳酸菌联用来增加GABA产量。如范媛媛等[36]在添加60 g/L 的L-谷氨酸钠、50 g/L葡萄糖发芽糙米培养基中接种体积分数4%的复合菌(短乳杆菌L2∶卡斯酒香酵母ZSM-001体积比为2∶1),于30 ℃培养90 h后将发酵液纯化浓缩,测得GABA含量达3.33×104mg/L,比单用卡斯酒香酵母ZSM-001菌发酵提高了50.8%。ZHANG等[37]用植物乳杆菌BC114和酿酒酵母菌 SC125共接种于100 mL含有5 g/LL-谷氨酸的灭菌桑葚培养基中,在30 ℃孵育72 h后得到2 420 mg/L的GABA,是单独用酵母菌培养时的2.35倍。可见,将产GABA的酵母菌与乳酸菌协同发酵可提高GABA产率,且酵母菌安全性高,是复合菌种发酵法制备GABA的理想选择菌株。

2.2.3 霉菌发酵法

霉菌作为发酵工业中的重要菌也可用于发酵制备GABA,但霉菌发酵时间长、效率低,单独用霉菌发酵制备GABA不仅耗时且产量低,而将其与乳酸菌共培养或通过优化发酵条件可以提高GABA产量。如边鑫等[38]对8株霉菌培养至稳定期后进行接种发酵筛选高产GABA的霉菌菌株,观察到发酵36 h时黑曲霉B的GABA产量首先到达最大,为346 mg/L,而米曲霉3.800发酵到48 h左右时才达到最大GABA值,也仅为674 mg/L。刘志强等[39]将红曲霉SM048和植物乳杆菌Lac.1共同接种于TYG培养基中,在 pH 4~4.5、30 ℃的条件下进行分段发酵,GABA 产量为520 mg/L,比红曲霉SM048单独发酵时提高了147.62%。张庆庆等[40]将红曲霉接种在添加61.4%干豆渣、38.6%大米粉、0.45%谷氨酸钠、0.20%(NH4)2SO4、0.23% MgSO4、0.37% KH2PO4、0.25% CaCl2(均为质量分数)优化的固态培养基中,并在优化的32 ℃下培养12 h,GABA产量为41.7 mg/100 g,比优化前提高13.4%。霉菌发酵速度慢、产量低,虽然对其进行工艺优化后产GABA量有所提升但产量仍较低,效率不及乳酸菌和酵母菌。

2.3 全细胞转化法富集GABA

全细胞转化法是利用菌体细胞作为酶源,先培养细胞生长到一定的浓度,之后将收集、洗涤培养的细胞加入底物反应体系中,再经细胞内的GAD作用催化底物脱羧生成GABA。具有周期短、生产成本低、工业化生产潜力高等优点。常用的微生物类型包括野生菌株和基因工程菌株。

2.3.1 野生菌株转化法

野生菌株转化生产GABA的反应条件温和、所产GABA易于分离纯化,具有较好地工业化应用前景。目前野生菌株转化法所用微生物以乳酸菌研究报道居多。张术聪等[41]制备了植物乳杆菌GB01-21的转化液,测得GABA的含量为139.2 g/L,转化率为99.3%。孙丽慧等[42]以短乳杆菌DLF-19076全细胞作为催化剂,通过3次补料后以87.84%的转化率获得85.71 g/L的GABA。除乳酸菌外,也有霉菌转化生产GABA的研究。田东亮[43]筛选出1株横梗霉,在最优条件下转化12 h后GABA产量达到3.79 g/L,转化率达到36.8%。王志超[44]以霉菌MQ-9为出发菌株,先对其进行紫外-LiCl复合诱变处理,之后优化条件并固定菌体,最终GABA转化率达到 33.98%。虽然研究表明优化条件后利用霉菌产GABA的转化率有所提高,但与多数乳酸菌生产GABA的转化率(90%以上)相比,霉菌的转化率仍相对较低,因此利用霉菌转化生产GABA的研究少于乳酸菌。

2.3.2 基因工程菌株转化法

基因工程菌株因具备表达水平高、生产效率高等优势,在GABA全细胞转化方面具有较高的工业化生产潜力,已报道的利用基因工程技术改造细胞作为催化剂富集GABA的菌株种类多样,有乳酸菌、大肠杆菌、芽孢杆菌等,其中研究较多的是乳酸菌和大肠杆菌。乳酸菌产GABA得率高、安全度高,是转化生产GABA的理想菌种。大肠杆菌具有目标基因表达水平高、易于培养、成本低、GAD活性普遍很高等优点,因此常以大肠杆菌作为重组微生物的宿主菌,异源表达产GABA乳酸菌的GAD构建基因工程菌作为生产GABA的细胞催化剂。KE等[45]以大肠杆菌BW25113为宿主菌,异源表达乳酸乳球菌的GABD基因,之后以构建的基因工程菌作为全细胞生物催化剂在转化12 h时GABA产量为308.96 g/L,转化率为99.9%。田灵芝等[46]从1株具有较高GAD活力的植物乳杆菌扩增获得 GAD基因lpgad,构建了重组质粒pET-28a-lpgad,并在大肠杆菌BL21(DE3)中高效诱导其表达,然后将培养至14 h的菌体离心收集、洗涤,以6.2 g/L的菌浓转化L-谷氨酸底物24 h后GABA产量可达143.5 g/L,转化率为 97.32%,是原始菌株的2.19倍。此外,芽孢杆菌也可经基因工程改造全细胞转化制备GABA。如张六六等[47]通过在枯草芽孢杆菌中优化GAD及辅因子磷酸吡哆醛再生基因的串联表达,构建了1株高产L-谷氨酸脱羧酶的重组枯草芽孢杆菌,通过全细胞催化底物L-谷氨酸24 h,GABA产量可达327 g/L。与发酵周期长、后处理过程繁琐的传统发酵法相比,全细胞转化法生产GABA周期短、收率高,且利用基因工程技术异源表达重组GAD进行定向改造能够进一步提高全细胞转化法生产GABA的效率。

表2 产GABA的菌株及GABA产量Table 2 GABA-producing strains and their GABA production

3 GABA功能性食品开发现状

大健康背景下人们对生活质量的追求提高,功能性食品的开发能够满足人们对传统食品提出的深层次要求,GABA作为一种功能性因子,在功能性食品生产中的应用越来越广泛。

3.1 GABA粮食制品的开发

粮食食品是人类生存与发展的基本条件,采用浸泡、发芽等方法加工粮食作物可以开发出多种富含GABA的粮食制品,使得人们能够在日常的膳食饮食中摄入所需的GABA。米类中以发芽糙米为研究热点,在日本已经获得了产业化生产,其GABA含量比普通白米高7倍。以发芽糙米为原料进行再加工可以制得丰富的GABA糙米食品。最为简单的是GABA营养粉,如孙雨茜等[53]挤压膨化发芽糙米,进行超微粉碎后添加玉米粉、麦芽糊精等辅料得到GABA含量16.63 mg/100 g的风味营养粉,高于未发芽的营养粉产品近 3 倍。发芽糙米也被用于烘焙、饮料和酒类食品的加工,生产富含GABA的糙米面包、饼干、糙米乳酸菌饮料、糙米白酒等[54]。麦类胚芽中含有较高的Glu含量,是用于生产GABA食品的优良原料。以发芽小麦为原料可以制备出GABA饮料、麦茶,进行磨粉后用于生产富含GABA的馒头、面包等主食。柴美清等[55]以46 ℃水浴保温孵育1.5 h的麦胚为原料制备了一种GABA含量为82 mg/100 mL的麦胚饮料,是普通麦胚饮料GABA含量的4.56倍。尹永祺等[56]对发芽后的小麦进行炒制焙香,制得一种麦芽茶,其GABA含量为20 mg/100 g。王沛等[57]以小麦为原料先制得富含GABA的芽麦全粉,再添加酵母、水等辅料生产富含GABA的全芽麦馒头,含量在200~280 mg/100 g,是一种新型功能性全麦食品。对豆类进行发芽发酵不仅可以提高GABA含量,还可以改善其营养组分、降低抗营养因子,从而提高其利用价值。其中最简单的形式是豆芽食品,以豆类原料直接胁迫发芽制得。另外较为常见是豆乳食品,如吴嘉琪等[58]以富含GABA的发芽大豆为主要原料,制作了一种GABA含量为18.56 mg/100 mL的谷芽豆乳。此外还有富含GABA的豆奶、豆酱、豆豉等豆类制品[59]。粮食作物种类丰富且发芽生长快、周期短,易于实现工业化生产,目前以开发出的富含GABA的粮食制品形式最为多样。随着食品加工技术的快速发展,GABA食品种类会更加多元化。

3.2 GABA乳制品的开发

乳酸菌发酵制得的乳制品由于口感好而广受消费者青睐,因此以发酵乳制品为载体开发GABA功能性食品具有较好的市场前景,同时也符合国家乳业振兴促进乳制品创新升级的国家政策。GABA乳制品通常是以高产GABA的乳酸菌为发酵剂生产富含GABA的奶酪、酸奶、发酵乳。此外在发酵过程中添加一定量的谷氨酸盐或辅酶磷酸吡哆醛进行优化可以提高产品中GABA产量。CARAFA等[60]利用产GABA嗜热链球菌84C(106CFU/mL)和短乳杆菌DSM 32386(10 CFU/mL)混合发酵制备奶酪,在成熟20 d时得到GABA含量(9.1±2.2) mg/100 g 的奶酪,高于嗜热链球菌84C单独发酵时(7.1±2.1) mg/100 g,为利用共培养物开发功能性奶酪提供了思路。EL-FATTAH等[61]利用浓缩乳清蛋白强化的脱脂乳粉发酵酸奶,在发酵剂中添加能赋予酸奶高粘特性和产GABA混合菌后发现,酸奶中GABA含量达1.64 mg/100 mL,是相应只添加具有高粘性菌株处理组的4.56倍。韩啸[62]以1株产GABA的短乳杆菌DL1-11制备了一种功能性发酵乳,在添加0.15%的L-谷氨酸钠进行优化后产品中GABA含量达(101.20±2.48) mg/100 g,是优化前的2.37倍。总之,通过高产GABA乳酸菌的筛选及乳品配料的改良,如添加谷氨酸钠等物质,能够显著提高乳制品中GABA产量,但由于谷氨酸钠在乳制品中应用较少,因此筛选或培育高产GABA的乳酸菌可行性更好。

3.3 GABA肉制品的开发

GABA肉制品的开发研究与粮食制品和乳制品相比较少,主要报道的是用乳酸菌添加于发酵剂中制备富含GABA的肉制品。在乳酸菌发酵4个月和12个月的日本发酵鱼制品aji-no-susu中分别检测到150和140 mg/100 g的GABA,并从中分离出2株产GABA的蛋白酶乳杆菌KN1和KN2,表明产GABA的乳酸菌可用于发酵生产含GABA的肉制品[63]。KANTACHOTE等[64]将高产GABA的菌株用于发酵香肠的制作,以产GABA的戊糖片球菌HN8和那慕尔乳杆菌NH2为混合发酵剂(接种量各为6 lg CFU/g)发酵猪肉香肠,得到的产品中GABA含量达396.2 mg/100 g。RATANABUREE等[65]使用同样的2株菌用于一种泰式“Nham”香肠的制作,在发酵剂中添加质量分数0.5%谷氨酸钠后其GABA含量为405.1 mg/100 g,大约高出市面上普通“Nham”香肠的8倍。目前GABA肉制品的开发报道较少,通常能在发酵肉中存活的细菌需要很强的耐受力,因此需要筛选高产GABA且高耐受力的乳酸菌以更好地应用于GABA肉制品的开发。

4 展望

GABA作为一种对人体有多种生理功能的生物活性物质,已受到国内外研究学者的广泛关注。近来蛋白质组学、分子生物学等领域的发展及不断提高的生活健康水平为GABA的研究提供了更为广阔的研究空间,未来GABA资源的开发方向之一是可以通过深入了解GAD的催化机制,利用组学等知识对该酶进行蛋白质结构改良以获得高转化效率的GAD,从而提高GABA合成量。另一开发方向是有针对性地开发适合不同人群的富含GABA的食品,如开发适合中老年人群的GABA主食类产品(馒头、面包、发芽糙米等)、开发适合中青年人群的便携式休闲化GABA食品(饼干、发酵奶片等)以及适合大众人群的GABA酸奶等乳酸菌发酵食品,以期通过在日常生活中摄入这些富含GABA的食品来改善现代人因生活节奏快、压力大等因素导致的焦虑、失眠等亚健康状况。

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