加味生脉散对飞碟运动员高温训练前后外周血中血液生化及HSP72表达的影响

沈 坚 徐 峰 金 斌 章荣权

1浙江体育职业技术学院，浙江 杭州 311231；

2浙江省射击射箭自行车运动管理中心，浙江 湖州 313100

如何增强高温耐受能力是运动训练学面临的重要课题之一。如果机体长期处于高温、高湿等环境下，热适应水平会减弱或丧失，如果不及时采取有效的措施进行预防，将导致机体代谢产热以及从热环境中吸收、传输热量的比例增加，水电解质代谢出现紊乱，内环境失衡，从而出现心跳加快，外周阻力增加等一系列以中枢神经系统、心血管系统功能障碍的不良反应与症状，称之为热疾病，热疾病是导致美国高中生出现运动性猝死的第三大原因。[1]热疾病在飞碟运动员夏季训练中时常发生，常常降低训练质量，影响竞技成绩的提高，甚至威胁身心健康，在夏训中，加强对运动员健康的监护，提高运动员的热耐受能力，进而预防热疾病的发生，具有重要的现实意义。热适应是指机体处在热环境一段时间后，机体所产生的对热负荷的适应能力，热适应水平的高低是机体对热环境的适应能力的直接反映。当前，高温环境下机体的热适应水平评价标准尚不统一，热休克蛋白对于机体在正常或高温环境下的生存是必要的，与细胞保护之间的关系最为密切，热休克蛋白72（heat shock protein 72，HSP72）与热应激的关系最为密切，是对热及运动刺激最敏感的热应激蛋白，易被诱导产生，在一定程度上反映机体的热应激程度。[2]有研究[3]认为，热疾病患者体内，HSP72的表达在降低，而适当上调HSP72的表达可以提高机体的热适应水平。[4]

1 对象与方法

1. 1 研究对象及主要试剂

选择浙江省射击射箭自行车运动管理中心飞碟运动员24名，健康状况良好，无吸烟、饮酒等嗜好，无家族遗传病史，年龄16～24岁，平均20.21±1.55岁；训练年限为3～10年。24人采用随机数字表方法分为对照组和中药组，每组12人，两组队员年龄、训练年限等计数资料，经方差齐性检验，差异无显著性意义（P＞0. 05），具有可比性。口服补液盐为飞碟运动员夏季训练所用常规饮品，加味生脉散组成为：人参、麦冬、五味子等，由浙江体育职业技术学院附属体育医院提供，淋巴细胞分离液（上海乾途生物科技有限公司提供）。

1. 2 实验方法

进行高温训练 2周，两组训练强度相同，每天同时在高温环境下（30～36℃）训练，每天连续打五组，一组30发子弹，每组间歇20min。训练过程中，对照组按需饮用口服补液盐冲剂（每袋冲剂含氯化钠2.6克、氯化钾1.5克、枸橼酸钠2.9克、无水葡萄糖13.5克），不服用加味生脉散制剂；中药组飞碟运动员于训练过程中饮用加味生脉散制剂1袋（200ml）及口服补液盐冲剂。

1. 3 实验室检查

两组运动员，于高温训练开始前、高温训练2周后，安排血液测试，抽血后，分置于两个含有EDTA钠的抗凝管中。其中一管送浙江省体育科学研究所实验室进行血液常规及生化指标检测，另一管血液在室温下自然凝固10～20分钟，再经过20分钟左右（2000～3000转/分）的离心，仔细收集上清，寄送上海江莱生物科技有限公司实验室。血液指标包括：红细胞、血红蛋白、白细胞、血小板计数等常规，CK（心肌激酶）、Bun（尿素氮）等反映机体代谢情况的血液生化指标以及Na+（钠离子）、K+（钾离子）、Ca2+（钙离子）、Cl-（氯离子）等反映机体电解质代谢情况的指标。外周血液HSP72表达水平测定：应用双抗体夹心法进行测定，操作步骤：加样、加酶、温育、配液、洗涤、显色、终止、测定，人热休克蛋白72（HSP-72）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒由上海江莱生物科技有限公司提供。

1.4 统计分析

数据资料均以±s表示，用SPSS 19. 0软件进行统计分析处理，两组训练前后均数比较采用单因素方差分析LSD法。

2 实验室检查结果

2. 1 高温训练前后两组血液常规的比较

高温训练前后红细胞、血红蛋白、白细胞、血小板计数高温训练前后，组间无显著性差异（P＞0. 05），白细胞计数，中药组与训练前、对照组之间比较均有显著差异（P＜ 0.05）。

表1 高温训练前后两组血常规比较（±s，n= 12）

2. 2高温训练前后两组血液生化指标的比较

表2 高温训练前后两组血液生化比较（±s，n= 12）

高温训练前后，血液CK、Bun、Na+、K+、Ca2+、Cl-生化指标检验的测量值组间差异无显著性（P＞0.05）。

2.3 高温训练前后两组外周血HSP72表达的比较

表3 两组训练前后HSP 72表达的比较（±s，n= 12）

高温训练之前，两组的HSP72的表达经比较无显著差异（P＞ 0.05）。高温训练之后，经比较，两组的HSP72表达均显著高于训练之前（P＜ 0.05），中药组的HSP72表达显著高于对照组（P＜ 0.05），具体见表3。

3 讨论

随着全球温室效应和厄尔尼诺现象的加剧，全球气温普遍上升，呈现出高温的特点。当前，许多重要的国际、国内赛事，如夏季奥运会、国际足联世界杯和环法自行车赛等一般都在北半球的夏季月份举行，通常也是在高温环境中进行的，[1]2017年天津全运会飞碟项目也于当年8月举办。飞碟是一项技术动作复杂和精确程度很高的室外运动项目，要求运动员需要具备较强的心理素质和抗干扰能力，同时拥有较高水准的稳定性、一致性、灵活协调能力以及持续性。浙江省飞碟队隶属于浙江省射击射箭自行车运动管理中心，位于浙江省湖州市长兴县境内，长兴县位居浙北低山丘陵向太湖西岸平原过渡的地区，属于亚热带海洋性气候，全年光照充足、降雨充沛、雨热同季，夏季时间长，温度高，湿度大，尤其是每年的7、8两月，最高温度甚至高达39℃以上。在这样的高温、高湿环境下训练，需要运动员拥有较高的热适应水平，而热痉挛、热晕厥等热疾病在飞碟运动员夏季训练中尤为常见，运动员发生轻型热疾病可以影响正常训练计划，重症热疾病则可能终止训练，甚至有生命危险，因此为了避免热疾病的发生，充分了解和认识热疾病的发病原因及采取积极的预防措施显得尤为重要，加强对运动员健康的监护、预防热疾病具有十分重要的现实意义。生脉散首载于金代张元素《医学启源》中，由人参、麦冬、五味子三味药组成，具有“益气生津，敛阴止汗”的功效，多用于治疗温热、暑热，耗气伤阴证及久咳伤肺，气阴两虚证。飞碟运动员在高温高湿环境下易发生注意力不集中，这正是影响飞碟运动员成绩的一个重要影响因素，生脉散中人参可以益气安神益智，服用生脉散可以帮助运动员提高注意力，从而提高命中率。通过研究发现，训练前，两组间的血常规及生化指标无显著性差异。训练后，两组间的CK、Bun、Ca2+、Na+、Cl-、K+无差异（P＞ 0.05）；中药组白细胞计数增高，与自身训练前及对照组比较差异显著（P＜ 0.05），这可能与高温应激有关[5]，也提示服用加味生脉散制剂后，机体对高温的应激性有增强的趋势。高温训练后，中药组飞碟运动员和对照组飞碟运动员体内HSP72的表达均较训练前上升，其中中药组上升幅度大（P＜ 0.05），提示服用加味生脉散可显著提高高温训练后运动员体内的HSP72表达。HSP72是具有自卫性[7]的一种应激蛋白，它的表达的适当上调可以增强肌体的热适应水平。尽管加味生脉散影响HSP72表达的作用机制尚需进一步探讨，但上个世纪九十年代就有研究者发现生脉散能降低老年动物在高温环境中的死亡率，[7]还有学者[8]实验证实加味生脉散不仅能明显延长小鼠在高温状态下的生存时间而且能增强高温状态下耐疲劳能力，这提示加味生脉散可能有预防或延缓热疾病发生的作用。现代药理研究[9]也表明生脉散具有抗氧化、改善心肌功能、抗心律失常、提高机体的高温耐受能力的作用。本次研究过程中，中药组飞碟运动员未发生运动性中暑，而对照组中有5名运动员出现运动性中暑的症状，这一结果也表明加味生脉散对预防或延缓运动性中暑的发生有一定作用。因此，服用加味生脉散可为增强飞碟运动员热适应水平、预防热疾病、提高高温下的运动能力提供参考。