浅谈离子色谱法测定当归中二氧化硫残留量

王化同，王 侠，于 瑶

（1.长春市食品药品检验中心，吉林 长春 130012；2.通化市食品药品检验所，吉林 通化 134001）

当归是我国比较常用的中药材，其不仅能够补血活血，还能够调经止痛，目前主要应用于经闭痛经、肠燥便秘等病症中。然而在当归加工的过程中，由于一些商人为了增加自己的经济效益，使用硫磺熏蒸当归，尽管能够在一定程度上避免当归被虫吞食，但是却导致当归当中残留二氧化硫，当人体摄入之后，会与人体内蛋白质发生可逆反应，对消化道的黏膜进行刺激，从而让人体出现过敏症状，降低人体的免疫力。目前我国针对中药材中残留的二氧化硫还没有制定出统一、限量规定，危害了我国人民的生命财产安全，所以本文主要研究了离子色谱法对当归中二氧化硫残留量的测定，发现该类测定方法具有简便、快捷等特点，且测定的准确度较高，具有较好的应用前景。

1 实验仪器及试药

采用离子色谱仪为THERMO FISHER ICS-5000+离子色谱仪；阴离子分析柱；电导检测器；A10纯水仪以及万能粉碎机等仪器。试药包括优级纯的碳酸钠、碳酸氢钠；分析纯的亚硫酸钠、硫代硫酸钠、甲醛、碘和淀粉；实验水为去离子水，实验采用当归样品为硫磺熏制以及普通当归。对照品为水中硫酸根，来源为北京坛墨质检科技有限公司，批号为B1807067，浓度为1000μg·mL^(-1)。

2 实验方法

2.1 配置对照品溶液

使用去离子水将硫酸盐标准溶液进行稀释，稀释成不同浓度的溶液，作为对照品溶液，其浓度分别为

5μg/mL、105μg/mL、205μg/mL、305μg/mL、50μg/mL、75μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL、300μg/mL、400μg/mL、500μg/mL。

2.2 制备样品溶液

将当归样品进行粉碎，并精密称定5g，置于水蒸气蒸馏装置的样品瓶当中，将20 mL的水加入样品瓶中搅拌均匀，将20mL质量分数为3%的双氧水加入100 mL的量瓶中，让其作为接收液，并与水蒸气蒸馏装置连接，将5mL盐酸快速加入样品瓶中密封，再进行水蒸气蒸馏步骤。当接收瓶内的液体将要达到100mL时，停止蒸馏，使用去离子水将接收瓶内的物质进行稀释并定容至刻度，摇匀，作为样品溶液。

2.3 色谱条件

色谱柱为AS19阴离子分析柱，其规格为250×4 mm、5 μm；3.2mmol/L碳酸钠和1.0 mmol/L碳酸氢钠组合成淋洗液；流速为0.7 mL/min；进样量为20 μL。

2.4 考察线性范围

分别将不同浓度的对照品溶液进样20μL，得出最终的峰面积和浓度，绘制标准曲线，并得出相关的回归方程为：

Y=85.27X+515.4 相关系数r=0.9996

通过计算可以知道，当硫酸根处于5-500 μg/mL范围内具有较好的线性。

2.5 考察专属性

进行专属性试验的主要目的是为了了解是否存在假阳性情况对测定造成干扰。主要使用没有经过硫磺熏制的当归作为对照，将其粉碎成中粉之后，精密称定5 g，置于水蒸气蒸馏装置当中，加入20 mL的水进行混合，并将20 mL质量分数为3%的双氧水加入100 mL量瓶中与水蒸气蒸馏装置相连接，把5 mL的盐酸快速加入样品瓶中，密封之后进行水蒸气蒸馏，当接收瓶内的液体将近达到100mL时就停止蒸馏，并使用去离子水将接收瓶内的物质进行稀释并定容，从而制成阴性对照溶液。通过测定结果可以知道，当当归没有经过硫磺熏制，其中不会存在二氧化硫物质。

2.6 考察精密度

使用去离子水将硫酸盐标准溶液稀释成不同浓度的对照品溶液，取浓度为100μg/mL的对照品溶液连续进样6次之后，将峰面积记录下来，对其进行计算可以得出峰面积的RAD为0.61%，由此结果可以知道其具有较好的精密度。

2.7 考察稳定性

将同一经过蒸馏和稀释之后的样品溶液在24 h之内进行进样，进样6次，将峰面积记录下来，并对其进行计算，通过计算可以知道峰面积的RSD为0.46%，说明在24 h之内，样品溶液具有较好的稳定性。

2.8 考察重复性

将经过粉碎后的当归样品进行蒸馏稀释之后制备出6份样品，并按照以上的测定方法进行测定，经过计算可以得到样品中二氧化硫的残留量平均含量为407.17μg/g，RSD为1.7%。

2.9 考察回收率

制备不同浓度的样品进行测定，分别称取2.0、2.5、3.0g样品，每个浓度各制3份，将5.0、4.0以及3.0 mL的硫酸根对照品溶液分别精密加入样品当中，该对照品溶液的浓度为0.5008mg/mL，临用时用碘量法对其进行标定，并将其进行蒸馏和稀释之后制备出供试品溶液，测定之后对其回收率进行计算，可以得到该溶液的平均回收率为91%， RSD为3.5%。

2.10 测定供试品

按上述方法制备供试品溶液，分别对相应的当归（不同产地批次20批）进行二氧化硫的残留量测定，根据测定可以知道未检出的二氧化硫残留量占总样品量的40%；残留量≤30mg/kg占总样品量的50%；30 mg/kg＜残留量≤150 mg/kg-的占总样品量的5%；残留量＞150 mg/kg占总样品量的5%。

3 试验结果与讨论

在试验过程中主要采用了四种测定方法，其中包括离子色谱法直接测定、样品直接超声测定、在氮气的保护下进行水蒸气蒸馏以及直接水蒸气蒸馏等方法。使用离子色谱法直接对样品中的亚硫酸盐进行测定，当对淋洗液进行调整之后，尽管离子色谱上的硫酸根和亚硫酸根能够实现完全分离，但是该类样品处理方法的可控性相对较难，影响了测定的效果；将样品进行直接超声，尽管在一定程度上让测定的步骤更加简便，但是需要提取的溶液中的杂质太多，相对比较复杂；样品在氮气的保护下进行水蒸气蒸馏，在整个蒸馏的过程中其无法控制使用的氮气气流量，同时尽管在蒸馏液中使用了一些稳定剂进行保护，但是亚硫酸根依旧存在不稳定的情况，其浓度出现不断降低的趋势，所以其测定的结果与分析要求不相符。最后直接使用水蒸气进行蒸馏，将双氧水加入接收液当中，让亚硫酸盐能够反应生成硫酸盐，并使用离子色谱法对溶液中的硫酸根离子进行测定，该类方法具有较好的可操作性和可控性，且其测定的结果能够达到规定的分析要求。

当样品进行粉碎之后，其粉碎的细度在一定程度上影响着测定的结果，经过相应的考察（测定粗粉、中粉、细粉）可以发现，粉碎样品为细粉的测定结果比粗粉的测定结果高5%，且比中粉的测定结果高2%，但考虑到粉碎过细会增加粉碎难度，药材组织中细胞壁破裂致使大量不溶物及粘液质等杂质析出，对水的膨胀系数变大，易发生糊化，对后续操作带来困难等缺点，所以在实际实验的过程中主要采用中粉的测定值，并通过研究可以知道，当样品粉碎之后放置的时间越长，其含量测定的结果将会呈现出下降的趋势。

社会在不断发展，人们的生活水平和生活质量不断提高，有害物质的残留对食品、药品等的安全问题已经逐渐引起了重视，所以加大对相关检测技术和方法的研究是必然趋势。目前检测二氧化硫的方法包括滴定法、比色法以及离子色谱法等，其中离子色谱法具有灵敏度高、操作比较简单以及自动化程度较好等特点，所以在对当归等中药材中残留的二氧化硫进行检测主要采用离子色谱法。在选择吸收液的过程中，首先选择了氢氧化钠为吸收液，由于测定样品中含有亚硫酸根，具有较大的不稳定性，所以需要加入稳定剂进行测定，整个操作相对比较复杂，且重复较差，所以选择双氧水作为吸收液检测，通过检测结果可以知道，其样品检测的结果与相关的分析要求相符。

在实际实验的过程中，还根据水蒸气蒸馏装置对其进行了一定的改进工作，将T型管加入到系统当中，能够保证在蒸馏的过程中将冷凝下的水滴及时去除，并保证当系统出现堵塞情况时，其能够与大气相通，同时在蒸馏的过程中并不需要进行通氮等步骤，通过这些改进，能够将整个实验的安全性和可操控性有效提高，并保证测定结果的准确性。

4 结束语

在现代社会中，人们的生活品质的提高说明人们越来越重视自己的身体健康，国家也积极制定出了相关的标准，保证食品、药材等的安全性。因为二氧化硫对人体的身体健康拥有较大的影响，如果过量摄入会导致人体出现支气管炎、气管炎等多种疾病，所以为了保证当归等中药的质量和安全，制定出相关的二氧化硫残留限量标准，要求二氧化硫的残留量不能超过150mg·kg-1，目前离子色谱法是一类测定二氧化硫残留量较好的测定方法，其具有较好的适用性，能够将当归等中药材中二氧化硫的残留量准确测量出来，为国家制定相关的残留量限定标准提供数据支持。随着时代不断进步，相关研究学者还应该针对离子色谱法进行更加深入的研究，不断提高离子色谱法测定的准确性，让我国中药材的质量安全得到更加有效的保障。