N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP在鼻咽癌放疗后骨转移中诊断及预后中的价值

王林 纪东★ 许仝一

鼻咽癌为临床常见恶性肿瘤，其中95%以上为低分化鳞状细胞癌，具有较高的恶性程度，易发生骨、肝、肺转移，其中骨转移发生率达7.1%～63.9%［1-2］。放射性核素骨显像可通过骨盐代谢及骨骼血供情况评估恶性肿瘤患者是否发生骨转移，但对于隐匿病灶检出率有限［3］。骨髓细胞代谢产物对肿瘤细胞有趋化作用，从而导致肿瘤发生骨转移，促使成骨细胞形成骨基质，破骨细胞降解骨基质，造成骨代谢紊乱，同时引起相应骨转换标志物表达水平异常变化［4］。因此，科学筛选骨转换标志物作为监测指标，对鼻咽癌放疗后骨转移诊断、病情控制及预后评估具有重要意义。N 端骨钙素（N-Osrteoc）、β-胶原特殊系列（β-Crosslaps）、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽（TPINP）均为常用骨转换标志物，但其在鼻咽癌放疗后骨转移患者中诊断价值如何，临床鲜有研究，基于此，本研究从骨代谢角度对鼻咽癌放疗后患者进行观察，旨在弥补影像学检查和常规肿瘤标志物对骨转移诊断和预后评价的不足。现将具体结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2015年3月至2018年3月鼻咽癌放疗后骨转移患者89 例作为转移组，放疗后未发生骨转移患者37 例作为未转移组。入选标准：经内镜病理检查确诊为鼻咽癌；转移组均行放射性核素骨显像检查确诊；均知情本研究并签署同意书。排除标准：影响骨代谢的内分泌疾病，近3 个月内出现过骨折或接受双磷酸盐、激素、钙制剂治疗者；合并其他恶性肿瘤者。

1.2 方法

取晨空腹静脉血3 mL，室温凝固，以3 500 r/min 的转速离心10 min（离心半径：8 cm），分离取上层血清，置于-80℃恒温箱待测。采用德国罗氏公司CobasE-601 全自动电化学发光免疫分析仪及配套试剂盒以电化学发光免疫法测定N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP、癌胚抗原（CEA）及细胞角蛋白19 片段2l-l（CYFRA21-1）水平。

1.3 观察指标

①比较两组临床资料，包括年龄、性别、病理类型（角化癌、未分化型非角化癌、分化型非角化癌）、临床分期（Ⅰb 期、Ⅱ期、Ⅲ期）、肿瘤家族史、卡氏功能（KPS）评分（＞70 分、≤70 分）、血红蛋白（Hb）是否正常、常规肿瘤标志物（CEA、CYFRA21-1）。②比较两组血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平。③采用Pearson 相关性分析转移组血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 与常规肿瘤标志物相关性。④受试者工作特征（ROC）曲线评价血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平对鼻咽癌放疗后骨转移的诊断价值。⑤随访2年，统计转移组2年生存率。⑥采用Kaplan-Meier 曲线对鼻咽癌放疗后骨转移患者进行生存分析。

1.4 统计学处理

采用SPSS 23.0 软件进行处理数据，计数资料以n（%）表示，χ2检验，等级资料采用Ridit 检验，计量资料采用（±s）表示，用t检验，采用Pearson 相关系数模型分析相关性；采用ROC 曲线，获取曲线下面积、置信区间、敏感度、特异度及cut-off 值，用DeLong 检验，采用Kaplan-Meier 曲线进行生存分析，均采用双侧检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组临床资料比较

两组病理类型、肿瘤家族史、KPS 评分、Hb 等资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；两组年龄、性别、临床分期、血清CEA、CYFRA21-1 水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 两组血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平

转移组血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平高于未转移组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表1 两组临床资料比较［n（%）］Table 1 Comparison of clinical data between 2 groups［n（%）］

表2 两组血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum N-Osrteoc，β-Crosslaps and TPINP levels between 2 groups（±s）

表2 两组血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum N-Osrteoc，β-Crosslaps and TPINP levels between 2 groups（±s）

组别转移组未转移组t 值P 值n 89 37 N-Osrteoc（μg/L）18.34±4.49 14.13±3.76 5.016＜0.001 β-Crosslaps（ng/L）681.16±225.44 430.57±142.39 8.866＜0.001 TPINP（μg/L）87.52±29.01 46.29±15.57 8.158＜0.001

2.3 转移组血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 与常规肿瘤标志物相关性

Pearson 相关性分析，转移组血清N-Osrteoc（r=0.881、0.800）、β-Crosslaps（r=0.789、0.773）、TPINP（r=0.770、0.760）与CEA、CYFRA21-1 呈正相关（P＜0.05），见图1。

图1 转移组血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 与常规肿瘤标志物相关性Figure 1 The correlation between serum N-Osrteoc,β-Crosslaps,TPINP and conventional tumor markers in metastasis group

2.4 多元线性回归分析

将年龄、性别、临床分期、血清CEA、CYFRA21-1等其他因素控制后，血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 仍与鼻咽癌放疗后骨转移显著相关（P＜0.05），见表3。

表3 多元线性回归分析Table 3 Multiple linear regression analysis

2.5 血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 对鼻咽癌放疗后骨转移的诊断价值

根据两组血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平绘制ROC 曲线，结果显示，见表4、图2。

表4 血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 对鼻咽癌放疗后骨转移的诊断价值Table 4 The diagnostic value of serum N-Osrteoc，β-Crosslaps and TPINP for bone metastases after radiotherapy for nasopharyngeal carcinoma

图2 血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 对鼻咽癌放疗后骨转移的诊断价值Figure 2 The diagnostic value of serum N-Osrteoc,β-Crosslaps,and TPINP for bone metastasis after radiotherapy for nasopharyngeal carcinoma

2.6 转移组2年生存率

随访2年，转移组失访3 例。86 例鼻咽癌放疗后骨转移患者，2年生存率为67.44%（58/86）。

2.7 生存分析

根据转移组血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 平均值作为界限，分为高危患者、低危患者，KM 曲线分析，血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 高危患者2年生存率低于低危患者（χ2=4.993、3.980、4.291，P=0.025、0.046、0.038），见图3。

图3 生存分析Figure 3 Survival analysis

3 讨论

骨转移是鼻咽癌放疗后最常见的转移部位，目前临床多采用影像学方法或肿瘤标志物检测诊断骨转移，影像学检查对骨转移部位、数量、大小均具有较好的分辨率，但费用高，不适用于短期多次复查或长期监测。临床证实，骨转移是骨形成、骨吸收相关细胞因子构成网络并互相作用的过程，能诱导成骨细胞或破骨细胞数量及活性改变，导致正常骨组织中骨合成动态平衡打破，进而形成骨转移灶，骨转换标志物随之发生相应变化［5］。因此，骨转换标志物有望为评价鼻咽癌骨转移提供新方向。

骨钙素（BGP）由成熟的成骨细胞合成，其中约1/3 表现为N-Osrteoc，N-Osrteoc 具有较好的稳定性，可维持骨正常矿化速率，其含量可特异性反映成骨速率［6-7］；TPINP 由成骨细胞合成释放，反映成骨细胞合成骨胶原能力，二者均可用于评估成骨细胞活力［8-9］。同时学者陈雪等［10］对卵巢癌患者血清N-Osrteoc 水平进行监测发现，患者发生骨转移后N-Osrteoc 水平显著升高，且随着骨转移病灶数目增加，其血清N-Osrteoc 水平均逐渐升高，对病情评估及预后预测具有重要价值。方美群等［11］研究指出，TPINP、N-Osrteoc 二者可作为肺癌患者骨转移诊断、疗效评估的有效指标。TPINP、N-Osrteoc 仅可反映患者骨形成情况，而鼻咽癌患者放疗后骨转移的发生是由骨形成与骨吸收共同作用的病理结果，故需联合其他指标进行诊断。

β-Crosslaps 是Ⅰ型胶原纤维在破骨细胞吸收骨质的过程中降解产生的末端肽，其释放入血后可反映骨基质吸收情况，在评估破骨细胞活性方面具有较高的敏感性、特异性［12-14］。庞艳等［15］研究证实，β-Crosslaps 诊断对卵巢癌骨转移具有较高的辅助诊断价值，在骨转移诊断及病情监测中有重要意义。鼻咽癌患者肿瘤细胞分泌的甲状旁腺激素相关蛋白（PTHrP）能促进破骨细胞介导骨吸收，从而形成骨转移病灶，随着肿瘤细胞生长与侵袭，骨组织损伤程度增加，骨代谢微环境遭到破坏，造成β-Crosslaps 水平升高，因此推测β-Crosslaps 与鼻咽癌患者放疗后骨转移有关。

为进一步明确联合诊断效果，本研究发现，年龄≥50 岁、男性、Ⅲ期是发生骨转移的影响因素，提示临床需针对上述高风险群体强化病情评价机制，联合检测血清N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 以提高诊断效能。本研究结果可见骨代谢异常严重的鼻咽癌患者放疗后生存率更低，可为患者预后评估提供新方案。但鼻咽癌不同类型骨转移患者，如溶骨型、移成骨型临床需结合具体病情予以强化对症治疗，以控制转移灶，N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平在鼻咽癌放疗后不同类型骨转移患者否存在差异仍需临床进一步深入探究，以期为鉴别患者骨转移类型提供新途径。

综上可知，鼻咽癌放疗后骨转移患者肿瘤标志物、N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP 水平异常升高，临床可通过监测N-Osrteoc、β-Crosslaps、TPINP水平评估鼻咽癌患者放疗后骨转移情况，有利于为患者预后评估提供参考依据。