补阳还五汤及拆方对心肌梗死大鼠心功能及MMP-9 的影响

邹永玲，张 洋，石志超

（1.中国医科大学附属盛京医院大连医院中医科，辽宁 大连 116000；2.大连医科大学附属第二医院中医科，辽宁 大连 116000；3.大连市中医医院，辽宁 大连 116000）

心肌梗死为冠心病致死和致残的重要原因。心肌梗死发生后因冠脉缺血缺氧导致心肌细胞逐渐凋亡，心功能进行性下降，导致心肌重构[1]。基质金属蛋白酶-9（MMP-9）作为基质金属蛋白酶家族的重要成员，与心肌梗死的发生、发展关系密切[2]；当心肌梗死发生时，MMP-9 表达和活性逐渐增强，MMP-9 的含量水平与心肌梗死进程密切相关[3]。Uemura R 等[4]通过MMP-9 抑制剂对心肌梗死后大鼠进行干预，结果表明其可通过抑MMP-9 的表达，从而改善心功能及抑制心肌重构。曲美他嗪具有降低血管阻力，增加冠脉及循环血流量，可促进心肌代谢及改善冠脉供血；同时能降低心肌耗氧量。研究[5-6]表明，补阳还五汤具有抗炎、抗氧化、抗血栓及改善冠脉供血等药理作用。本实验观察补阳还五汤及其拆方对心肌梗死后大鼠心功能及MMP-9 的表达影响，探讨其作用机制及靶点，为中医药防治心肌梗死提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 动物由辽宁长生生物技术有限公司提供[SCXK（辽）2010-0001]。选用12周龄，普通级，健康、雄性SD 大鼠80 只，体质量230～245 g。

1.2 造模与分组 按每100 g 予10%水合氯醛0.4 mL行腹腔注射麻醉。连接心电图机记录心电图。备皮后于左侧第4肋间开胸，钝性分离胸部肌肉及肋间组织，剥离心包膜，暴露心脏，于冠状动脉前降支起点处结扎前降支[7]。术后记录心电图，心电图表现为ST 段上抬0.05 mv 以上或出现病理性Q 波为判定心肌梗死造模成功标准[8-9]。将造模成功的大鼠随机分为模型组、曲美他嗪组、补阳还五汤组、拆1 方组、拆2 方组；未行冠脉结扎的大鼠为空白对照组，每组各10只大鼠。

1.3 药物与给药剂量 补阳还五汤组由黄芪、当归尾、赤芍、地龙、川芎、红花、桃仁组成；拆1 方组由黄芪组成；拆2 方组由当归尾、赤芍、地龙、川芎、红花、桃仁组成。中药方剂制剂由天江药业有限公司提供；处方中的全部药材均符合《中国药典》2010 年版有关规定。曲美他嗪组为曲美他嗪片（每片20 mg），由施维雅（天津）制药有限公司提供（国药准字H20055465）。空白对照组与模型组灌胃蒸馏水每次3 mL，每日1 次。各给药组大鼠按人鼠剂量换算，给药剂量（g/kg）=给出的人的剂量（g）×系数（0.018）/所求动物体质量（kg）[10]。各中药组，给药为每千克9.0 g 生药；曲美他嗪组，每千克1.5 mg生药；给药组药物溶于3 mL蒸馏水中，每日1 次灌胃。上述各组均灌胃6 周。

1.4 检测方法 给药6 周后行多普勒超声心动图机检测各组大鼠的心功能；遂处死全部大鼠，每只大鼠心脏按标准处理，取100 mg 心肌组织标本，于液氮中冷冻后在保存待测，用于实时定量荧光PCR 检测心肌中MMP-9 的表达。

1.5 统计学方法 采用SPSS 17.0 进行统计学分析，所测得数据均以均数标准差（）表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠心功能变化情况比较 见表1。

2.2 各组大鼠MMP-9 表达结果比较 空白对照组（0.97±0.18），模型组（6.36±1.53），曲美他嗪组（2.02±0.37），拆方1 组（4.08±0.97），拆方2 组（4.10±0.99），补阳还五汤组（2.04±0.41）。与空白对照组比，模型组MMP-9 表达明显升高（P＜0.05）；各给药组MMP-9表达较模型组明显下降，（P＜0.05）。给药组组间比较，补阳还五汤组较两拆方组MMP-9 的表达明显下降（P＜0.05）。

表1 各组大鼠心功能变化情况比较（，n =10）

表1 各组大鼠心功能变化情况比较（，n =10）

注：与空白对照组比较，# P ＜0.05；与模型组比较，△P ＜0.05；与补阳还五汤组比较，▲ P ＜0.05

3 小结

心肌梗死属中医学“胸痹”范畴，其基本病机为本虚标实，本虚以气虚为主，标实以血瘀为重[11]；不通则痛，不荣则痛是其发病之根本[12]；补阳还五汤出自清·王清任《医林改错·卷下·瘫痿论》，该方由黄芪、当归尾、赤芍、地龙、川芎、红花、桃仁组成；方中重用黄芪以益气，气旺而促进血行，血畅则脉通；当归尾、赤芍、地龙、红花、桃仁、川芎活血祛瘀通络，诸药合用共奏益气活血、化瘀通络之功[13-14]。

本实验通过对大鼠冠脉结扎导致心脉血瘀，营造大鼠心肌梗死（胸痹）模型；予补阳还五汤及拆方进行干预。补阳还五汤组及其拆方组均可改善心肌梗死后大鼠的心功能，并下调心肌梗死后心肌中MMP-9 的表达，效果以补阳还五汤显著。其作用机制可能是通过抑制心肌梗死后MMP-9 活性，修复受损心肌组织，增强心肌的抗牵拉性及弹性，抑制心肌重构，达到改善心功能的作用。

本实验表明，补阳还五汤对心肌梗死的疗效作用明显优于单纯的益气法（拆方1 组，单用黄芪）和活血法（拆方2 组，当归尾、赤芍、地龙、川芎、红花、桃仁），提示补阳还五汤方中各味中药配伍后，其功效在治疗心肌梗死过程中发生了协同促进作用，为补阳还五汤“气旺以促血行”的配伍理论提供了科学客观的实验依据，佐证了该方重用黄芪的重要意义。