新生儿ABO 溶血病试验结果与日龄的关系分析

薛雷，王俊杰，轩海华

（周口市中心医院输血科，河南 周口 46600）

新生儿溶血病 （hemolytic disease of newborn，HDN） 是指由于母婴血型不合引起胎儿或新生儿的免疫性溶血性疾病。孕妇的IgG 血型抗体经胎盘进入胎儿血液循环， 与胎儿红细胞表面抗原相结合，最后这些抗体致敏的红细胞被单核吞噬细胞系统破坏，引起胎儿贫血、水肿、死胎、早产及新生儿溶血病[1，2]。 目前临床应用最广的 HDN 诊断试验主要为新生儿溶血病三项试验，包括直接抗人球蛋白试验、游离试验和抗体释放试验[3]。 随着患儿日龄的增加，单核吞噬细胞系统对致敏红细胞的破坏，血浆中胆红素升高，红细胞减少，不同的采样时间，血清学试验将会有完全不同的结果[4]。 在临床工作中， 我们发现有些新生儿溶血筛查试验标本送检时，新生儿日龄已达到10 天以上。为了分析日龄对新生儿溶血筛查血清学三项试验结果特别是对有着确诊意义的抗体放散结果的影响，我们对科室近两年来收到的新生儿ABO 溶血筛查试验标本进行了筛选和分类，报告如下。

1 对象与方法

1.1 对象

1.1.1 研究对象 2016 年 6 月到 2018 年 8 月我科室收到的临床诊断高胆红素血症且母婴ABO 血型不合RhD 均为阳性的送检标本756 例。 由于患儿年龄太小，再次抽取标本依从性差，我们与我院检验科血常规室合作，从2016 年6 月到2018 年8 月送检血常规标本中筛选出符合条件标本146 例。筛选条件： 新生儿且在我科ABO 溶血筛查试验中确诊。 以上标本均为 EDTA-K2 抗凝全血 2～3ml。

1.1.2 试剂与仪器 抗A 抗B 血型正定型试剂、人ABO 血型反定型用红细胞试剂盒、RhD（IgM）血型定型试剂均来自上海血液医药有限公司，抗人球蛋白检测卡来自长春博迅生物技术有限责任公司。以上试剂均在有效期内使用。 恒丰HH-W 恒温水浴箱、BASO2005-1 离心机等。

1.2 方法

1.2.1 新生儿血型鉴定及ABO 溶血筛查 试验参照《输血技术操作规程》[5]采用抗人球蛋白检测卡进行检测。

1.2.2 新生儿ABO 溶血病确诊标准[6]⑴母婴AB O 血型不合； ⑵新生儿早期出现高胆红素血症；⑶直接抗人球蛋白试验和（或）红细胞抗体释放试验阳性。 满足上述三项者即可确诊。

1.2.3 统计方法 运用SPSS20.0 统计软件进行计算， 组间比较采用卡方检验，P＜0.05 显示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同日龄组患儿HDN 阳性率及差异 符合筛选条件标本 756 例， 确诊 HDN453 例， 阳性率59.9%。 新生儿日龄≤7d 组天阳性率为39.0%；新生儿日龄 8～10d 组阳性率 17.3%； 新生儿日龄＞10d 组阳性率3.6%。不同日龄组的HDN 阳性率有着显著差异（日龄＞10d 组与日龄≤7d 组比较，χ2=346.042，P＜0.05; 日龄＞10d 组与日龄 7～10d 组比较，χ2=82.916，P＜0.05）。 见表1。

表1 不同日龄组患儿溶血三项试验结果及各组HDN 阳性率

新生儿日龄≤7d 组内阳性率85.5%。 新生儿日龄7～10d 组内阳性率47.5%。 新生儿日龄＞10d组内阳性率20.0%。 随着日龄的增长，HDN 阳性率呈快速下降趋势。 见表2。

表2 不同日龄组患儿HDN 确诊例数及各组内阳性率

2.2 不同日龄组患儿再次确诊HDN 阳性率及差异146 例符合筛选条件患儿再次进行新生儿ABO 溶血筛查试验，不同日龄组的HDN 阳性率有着显著差异，见表3。 日龄＞10d 组与日龄≤7d 组比较，χ2=9.403，P＜0.05; 日龄＞10d 组与日龄 7-10d 组比较，χ2=13.156，P＜0.05。 见表3。

表3 不同日龄组患儿再次确诊HDN 例数及各组内阳性率

3 讨论

HDN 可有多种原因引起，其中母婴ABO 血型不合最为常见。 HDN 的确诊依赖于血清学的三项试验即直抗试验、抗体游离试验、抗体释放试验[7]。游离试验用于检测患儿血清中来自母体的血型抗体，由于未致敏红细胞，只能作为诊断HDN 的参考条件。 直抗试验和抗体释放试验主要检测患儿红细胞是否被来自母体的抗体所致敏。 但由于新生儿红细胞上的抗原发育尚未成熟，结合位点少，密度低，导致直抗试验敏感性较低[8]。 抗体释放试验实质是直接抗人球蛋白试验的放大实验，也是判定HDN 最有力的证据，抗体释放试验出现阳性结果，理论上即可明确HDN 诊断[9]。 我们的试验也是将抗体释放试验作为HDN 的确诊试验。 本报告中母婴ABO 血型不合标本756 例，确诊453 例，阳性率为59.9%，这与郭莹莹等报道[10]一致。

血样的采集时间与HDN 的阳性率存在密切相关，日龄越小，阳性率越高[11]。本报告显示新生儿日龄≤7d、8～10d、＞10d 的三组患儿，HDN 阳性率分别为：39.0%、17.3%、3.6%。

不同日龄组内的新生儿HDN 阳性率随着日龄的增加则快速地下降。 本报告显示新生儿日龄≤7d、8～10d、＞10d 的三组患儿， 其组内的 HDN阳性率分别为：85.5%、47.5%、20%。

本报告中已经确诊HDN 的新生儿再次进行溶血三项试验时，结果也存在着因日龄的增加而产生的不同。 146 例已经确诊HDN 的新生儿再次进行新生儿ABO 溶血筛查试验时，确诊 119 例，阳性率为 81.5%。 新生儿日龄≤7d、8～10d、＞10d 的三组患儿， 再次试验时其组内的HDN 阳性率分别为：100%、92.9%、66.7%。 因此对于日龄＞10d 的患儿ABO 溶血筛查三项试验结果阴性时，一定要结合临床表现，不能轻易排除新生儿ABO 溶血病。

新生儿溶血病患儿多伴有贫血，少数高危患儿会出现胆红素脑病等危及生命的严重并发症。 而且新生儿贫血可导致患儿发育迟缓，易患感染性疾病，增加死亡风险[12]。 而ABO 新生儿溶血的早期诊断能够指导临床上及时进行蓝光治疗，改善高胆红素血症表现，降低多器官损害并发症的发生[13，14]。 因此临床医生应加强意识，对疑似新生儿溶血病的患儿应尽早采集标本，及时送检，以提高新生儿溶血病的检出率[15]。 达到早诊断、早发现、早治疗的目的，尽力减少HDN 对患儿的危害。