五加皮膏对大耳白兔骨折愈合的疗效观察*

郑浩江，王小婧，刘海忠，曹 丽，刘诗蓉，唐烨霞

(1.内蒙古科技大学包头医学院，内蒙古 包头 014060；2.内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院)

骨折是临床常见病，目前治疗多以手术为主，不仅创伤较大而且费用较高，尤其是一些老年人有骨质疏松等情况，行手术治疗风险高。因此，探索一种安全有效、创伤小、费用低的治疗方式尤为重要[1]。本研究采用五加皮膏外敷于大耳白兔胫骨骨折处，观察药物对急性期骨折愈合的影响，探索一种安全性高、费用低廉、创伤小、适用性广、疗效较好的药物治疗骨折，同时为临床治疗提供实验依据。

1 对象与方法

1.1实验动物 成年健康雄性日本大耳白兔购于北京芳元缘养殖场，实验动物合格证号：SCXK(京)2014-0012，每只体质量2.5 kg，共60只。

1.1.1药品和试剂 五加皮、麝香购自包头市华康源医药有限公司。五加皮膏的制备：将五加皮干燥后(60 ℃环境)，制成微细颗粒并取600 g，将麝香30 g用纯净水溶解，取新鲜鸡血600 mL及新鲜鸡骨600 g(新鲜鸡骨需捣碎成泥)。将以上所有材料混匀搅拌成膏。

1.2方法

1.2.1骨折模型制备 成年健康大耳白兔60只，适应性喂养1周后开始造模。根据中药药理实验学实验方法，造模前白兔禁食12 h，采用25 %氨基甲酸乙酯按4 mL/kg(体重)行耳缘静脉注射麻醉，麻醉后右后肢剪毛、消毒，手术切开皮肤，分离皮下组织，暴露胫骨。用双层钢锯造成白兔胫骨中段不完全性骨折，骨折处宽3 mm，深度为胫骨的1/3，术毕缝合伤口，清洗包扎术口，并进行X线扫描确认造模成功。术后每只动物肌注青霉素钠50万单位/d，连用3 d。随机将造模成功的60只白兔分为五加皮膏治疗组30只和外固定组30只。

1.2.2治疗方法 五加皮膏治疗组白兔造模术后1 d，待切口干燥后，将制成的药膏均匀涂抹于大小适中的无菌白纱布上，以骨缺损为中心上下宽约5 cm外敷24 h，24 h后取下药膏，对每只动物进行小夹板外固定,注意每天检查外固定情况以防脱失。外固定组白兔不敷药物，进行简单包扎并用小夹板外固定。

1.2.3观察指标 白兔术后状况一般状况为每日观察白兔创口愈合、肢体活动及一般情况。影像检查于白兔造模成功分组治疗后，分别在用药后2周、4周、8周后进行X线检查，观察骨折端骨痂生长情况，骨折愈合情况。运用以下评分标准(5分制)：(1)没有发现骨痂阴影(0分)；(2)可见骨痂阴影,但骨折线比较模糊(1分)；(3)有明显骨痂生长，骨折线十分模糊(2分)；(4)有丰富骨痂生长，骨折线接近消失(3分)；(5)骨折线消失，接近骨化(4分)。收集上述评分结果进行数据统计。

1.2.4骨折处骨组织标本的制备和染色 第2、4、6周分别将白兔放置于无菌手术台固定，取骨折处骨组织，将其在甲醛溶液中固定12 h后放置于脱钙液充分脱钙，采用石蜡包埋后行HE(苏木精-伊红)染色，观察标本情况。

2 结果

2.1一般情况观察 两组实验白兔在实验过程中无死亡，且术肢创口逐步好转，术口未见感染，术肢活动逐步恢复。

2.2骨折处影像学变化 治疗2周后五加皮膏治疗组白兔骨折端可见清晰的骨折线，有轻度骨膜反应，在骨折断端周围有骨痂生长迹象，但骨痂量少。而外固定组白兔未见新生骨痂。4周后五加皮膏治疗组骨痂密度升高，术肢骨折断端缺损处基本被骨痂充满，且断端骨折线较为模糊。外固定组新生骨痂较前增多，但骨折断端的缺损和骨折线较清晰。8周后五加皮膏治疗组白兔胫骨骨痂填满骨折处，骨痂密度接近正常骨皮质，逐步形成骨髓腔，未见骨折线。外固定组骨折线较前略模糊但仍可见，骨痂量增加明显但密度不均匀尚未填满骨折处。据骨折愈合评分标准，对五加皮膏治疗组和外固定组白兔骨折愈合情况进行评分及统计分析，结果如表1所示，与外固定组相比，五加皮膏治疗组在用药2周、4周、8周后白兔骨折愈合质量高于外固定组(P<0.05)。

表1 白兔骨折愈合质量的影像学评分(X线)结果分)

2.3骨折组织HE染色结果 治疗后2周，五加皮膏治疗组白兔骨折处出现骨小梁，伴有成纤维细胞、炎性细胞浸润(单核巨噬细胞等)及新生毛细血管的聚集，(图1-a)。外固定组白兔骨组织周围细胞水肿，有极少量排列杂乱的骨小梁(图1-b)。治疗后4周可见，五加皮膏治疗组白兔骨组织可见较多的成骨细胞、排列均匀的纤维组织，骨小梁较前增多(图1-c)。外固定组有少量纤维组织、成纤维细胞、成骨细胞(图1-d)。治疗后8周可见五加皮膏治疗组骨小梁增多明显且能相互衔接逐渐向板层骨转变，内骨痂和外骨痂均有形成，有髓腔形成，各部分骨组织排列整齐有序(图1-e)。外固定组骨折断端仍可见少量新生骨小梁，少量外骨痂处可见到纤维性骨连接，骨组织排列紊乱，有少量的骨软化病变(图1-f)。

图1-a、1-b为2周后五加皮膏治疗组和外固定组骨组织HE染色(×100)，图1-c、1-d为4周后五加皮膏治疗组和外固定组骨组织HE染色(×100)，图1-e、1-f为8周后五加皮膏治疗组和外固定组骨组织HE染色(×100)。

3 讨论

本实验对白兔骨折模型进行五加皮膏外敷治疗，观察其对骨折愈合的疗效。与外固定组相比，五加皮膏治疗组骨折断端X线成像及组织形态学观察均好转。使用五加皮膏的白兔骨折愈合速度在各个时间点较外固定组快,提示五加皮膏具有促进骨折愈合的作用。

在我国疾病治疗方面除有西医，还有民族医学，中蒙医药就是非常重要的民族医学。蒙古族人民在长期的游牧生活中易出现骨折等外伤，因而逐步形成具有民族医药特色的蒙医整骨疗法，并在日常疾病治疗中被广泛应用[2-3]。五加皮膏中新鲜鸡骨、鸡血能够推动气血运行，配合麝香之芳香走窜，有疏通经络、活血化瘀之效，共同起到改善骨折局部的血液循环之效；肾主骨，通过五加皮补肝肾、强筋骨、祛风湿之效。诸药联用，共同起到促进骨痂生长，加速骨折愈合的作用。

骨折是骨科临床常见病，目前治疗多为手术或夹板固定[4]。探索一种安全性高、费用低廉、创伤性小、适用性广、疗效较好的药物治疗方式非常重要。本实验研究结果需要进一步进行机制研究，完善研究内容，为临床提供足够的数据支持。